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高效液相色谱法测定粮食中杂色曲霉毒素的研究

作　者: 杜娟
导　师: 袁建
学　校: 南京财经大学
专　业: 食品科学
关键词: 杂色曲霉毒素高效液相色谱提取净化检测
分类号: S133
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

杂色曲霉毒素是一种霉菌毒素,是由杂色曲霉、黄曲霉、构巢曲霉、细皱曲霉等真菌产生的次级代谢产物。可污染大多数粮食和饲草,尤其对小麦、玉米、花生和饲草等污染更为严重。杂色曲霉毒素的基本结构是由二呋喃环与氧杂蒽酮连接组成,与黄曲霉毒素结构相似,其毒性仅次于黄曲霉毒素,其具有肝毒性,肾毒性,细胞遗传毒性和强致癌性,严重威胁人类和动物的生命安全。因此,对可能污染杂色曲霉毒素的谷物及其制品进行检测是非常必要的。目前,检测杂色曲霉毒素的方法主要是采用薄层层析法(TLC),TLC方法具有操作简单,不需要复杂精密的仪器设备的优点,但灵敏度较低,准确性不高,杂色曲霉毒素的最低检出量是大米、玉米、小麦为25μg /kg;黄豆、花生样品为50μg /kg。近年来,高效液相色谱法(HPLC)在真菌毒素检测中得到广泛应用,但主要是对黄曲霉毒素等真菌毒素的检测,对杂色曲霉毒素的检测还鲜为报道,本研究通过对小麦、玉米、糙米样品进行前处理方法研究,建立了主要粮食中杂色曲霉毒素的灵敏、可靠、且成本低的高效液相色谱检测方法。同时由于2010年春季江苏地区多雨潮湿,易产生真菌毒素,本课题采用高效液相色谱法对江苏几个代表区域的小麦进行杂色曲霉毒素的检测,以确保各地区粮食的食用安全。现将研究结果分述如下:1.建立了小麦、玉米,稻谷中杂色曲霉毒素的高效液相色谱检测方法小麦,玉米和糙米样品用正己烷提取后,经硅胶小柱固相萃取去除脂肪等杂质后,运用高效液相色谱法测定杂色曲霉毒素的含量,色谱柱为Nova-Pak C18柱,以甲醇-水(70+30, V/V)为流动相,流速0.7mL/min,紫外检测波长为246nm进行检测。该法在0.08~4.0μg/mL范围内线性良好,最低检出量为0.017μg/kg。ST加标量为20μg /kg时,其中小麦的平均回收率为86.59%,相对标准偏差RSD为4.7%;玉米的平均回收率为83.78%,相对标准偏差RSD为3.89%;糙米的平均回收率为87.13%,相对标准偏差RSD为2.89%,最低检出量为0.017μg/kg。2.对江苏代表区域新小麦进行杂色曲霉毒素的普查对江苏南京、南通、徐州、苏州等地采集的200个小麦样品用HPLC法进行了ST毒素含量的检测。本次调查了解了2010年江苏地区小麦中杂色曲霉毒素的污染状况:结果有6个样品检测出杂色曲霉毒素,含量范围在20~67μg/kg。杂色曲霉毒素的阳性检测率低,说明杂色曲霉菌不易在田间产生,而是在储粮期间产生。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-10
第一章绪论  10-21
  1.1 杂色曲霉毒素的产生和理化特性  10-11
    1.1.1 杂色曲霉毒素的发现及生物合成途径  10-11
    1.1.2 杂色曲霉毒素的理化性质及其结构  11
  1.2 杂色曲霉毒素与食品安全  11-14
    1.2.1 杂色曲霉毒素的毒性和作用机理  11-14
    1.2.2 杂色曲霉毒素对农作物的污染  14
  1.3 杂色曲霉毒素的检测  14-19
    1.3.1 杂色曲霉毒素的前处理方法  14-16
    1.3.2 真菌毒素的分析方法  16-19
  1.4 主要研究内容和研究意义  19-21
    1.4.1 主要研究内容  19-20
    1.4.2 研究意义  20-21
第二章粮食中杂色曲霉毒素样品前处理方法的研究  21-35
  2.1 材料与方法  21-23
    2.1.1 材料  21
    2.1.2 试剂  21
    2.1.3 仪器  21
    2.1.4 实验方法  21-23
  2.2 实验结果与讨论  23-33
    2.2.1 提取条件的研究  23-26
    2.2.2 净化条件的研究  26-33
  2.3 结论  33-35
第三章粮食中杂色曲霉毒素高效液相色谱法的建立  35-44
  3.1 材料与方法  35-36
    3.1.1 材料  35
    3.1.2 试剂和溶液配制  35
    3.1.3 仪器  35
    3.1.4 实验方法  35-36
  3.2 实验结果与讨论  36-43
    3.2.1 色谱条件的研究  36-37
    3.2.2 标准曲线的绘制  37-38
    3.2.3 分析方法的精密度和回收率  38-42
    3.2.4 杂色曲霉毒素的高效液相色谱法的比较  42-43
  3.3 结论  43-44
第四章江苏省产新小麦中杂色曲霉毒素污染状况的研究  44-47
  4.1 材料与方法  44-45
    4.1.1 样品采集  44
    4.1.2 试剂  44
    4.1.3 仪器  44
    4.1.4 实验方法  44-45
  4.2 结果与分析  45-46
  4.3 结论  46-47
主要结论  47-48
展望  48-49
参考文献  49-54
攻读硕士学位期间研究成果  54-55
致谢  55

高效液相色谱法测定粮食中杂色曲霉毒素的研究

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