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米渣蛋白的提取及固定化酶水解米渣蛋白的研究
作 者: 安莉
导 师: 朱恩俊
学 校: 南京财经大学
专 业: 食品科学
关键词: 米渣蛋白 提取 固定化酶 碱性蛋白酶 响应面法
分类号: TS201.21
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
大米蛋白是公认的优质植物蛋白,具有氨基酸配比合理和低过敏性等特性,非常适合作为婴幼儿和特殊人群的营养食品,国内外对大米蛋白的研究都非常重视。本文主要研究了米渣蛋白的提取和改性及改性后功能性质的研究。通过水提法提取米渣蛋白,通过单因素实验研究了提取时间,温度,料液比和水洗次数对得到的蛋白提取率的影响,并采用正交试验对提取时间,温度,料液比进行优化,得出在温度800C,时间2h,料液比1:10,水洗次数1次的条件下,蛋白提取率可达到71.83%。采用碱溶酸沉法提取米渣蛋白,通过单因素实验初步探讨了温度,碱浓度,提取时间,料液比对米渣蛋白提取率的影响,并采用响应面法对提取时间,碱浓度,料液比参数进行了优化,采用多元二次回归方程拟合了三种因素与蛋白提取率的关系,预测最佳提取条件为:碱浓度0.288%,时间2.2h,料液比1:11 ,温度50℃,得到蛋白提取率理论值为72.50%,实验室测得值为70.49%。此实验方案可行。以海藻酸钠为载体,戊二醛为交联剂研究了碱性蛋白酶的固定化方法,分别对海藻酸钠浓度,酶浓度,氯化钙浓度,戊二醛浓度和交联时间进行了单因素实验,并采用响应面法分析并优化了固定化酶的条件,在海藻酸钠浓度2.5%,酶浓度3mg/ml,氯化钙浓度2%,戊二醛浓度4%时固定化酶活性回收率理论值为61.48%,实际测得值为58.34%。得到的固定化碱性蛋白酶的最适温度60℃,最适pH为9,且具有良好的使用稳定性和储存稳定性。采用固定化碱性蛋白酶水解碱法提取得到的米渣蛋白,并通过单因素和响应面法对水解时间,酶与底物比,反应pH参数进行了优化。采用多元二次回归方程拟合了三种因素与水解度的关系:预测最佳水解条件为水解时间2h,酶与底物比1:9,pH8.9,温度60℃,在此条件下,预测理论值达到19.04%,实测水解度为17.74%,两个结果基本吻合。通过研究水解得到的米渣蛋白肽,显示其具有良好的溶解性,在pH2-10范围内保持相对较高的氮溶解指数(NSI>75.00%)。与米渣蛋白相比,在高浓度条件下具有较好的乳化性,同时米渣蛋白肽具有良好的起泡性和泡沫稳定性,但是米渣蛋白肽的吸油性和持水性不如米渣蛋白。
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全文目录
摘要 5-6 ABSTRACT 6-10 第一章 绪论 10-21 1.1 米渣蛋白研究进展 10-13 1.1.1 大米蛋白组成 10 1.1.2 大米蛋白的结构和性质 10-11 1.1.3 大米蛋白的营养及保健作用 11-13 1.2 大米蛋白的提取方法 13-16 1.2.1 碱法提取大米蛋白 13 1.2.2 酶法提取大米蛋白 13-16 1.3 固定化酶的研究进展 16-19 1.3.1 固定化酶技术简介 16-17 1.3.2 酶的固定化方法 17-18 1.3.3 固定化酶的制备原则 18-19 1.4 课题的立题意义和研究背景 19-20 1.5 论文主要研究内容 20-21 第二章 米渣蛋白的提取 21-34 2.1 实验材料和试剂 21-24 2.1.1 实验材料 21 2.1.2 实验试剂 21 2.1.3 实验设备 21-22 2.1.4 实验方法 22-24 2.2 实验结果与分析 24-33 2.2.1 米渣原料的化学成分 24 2.2.2 水提法结果与分析 24-28 2.2.3 碱提法实验结果与分析 28-32 2.2.4 等电点的确定 32-33 2.3 本章小结 33-34 第三章 碱性蛋白酶的固定化及其性质研究 34-46 3.1 实验材料与方法 34-36 3.1.1 实验材料 34 3.1.2 实验仪器 34 3.1.3 实验方法 34-36 3.2 实验结果与讨论 36-45 3.2.1 固定化碱性蛋白酶结果 36-42 3.2.2 固定化碱性蛋白酶的基本性质 42-45 3.3 本章小结 45-46 第四章 固定化碱性蛋白酶改性米渣蛋白的研究 46-54 4.1 试验材料和方法 46-49 4.1.1 实验材料 46 4.1.2 主要仪器和设备 46-47 4.1.3 实验方法 47-48 4.1.4 分析方法 48-49 4.2 结果与讨论 49-53 4.2.1 固定化碱性蛋白酶水解米渣蛋白的研究 49-53 4.3 本章小结 53-54 第五章 米渣蛋白肽功能特性的研究 54-60 5.1 材料和方法 54-56 5.1.1 实验材料 54 5.1.2 实验仪器 54 5.1.3 实验方法 54-56 5.2 实验结果与讨论 56-59 5.2.1 米渣蛋白肽的溶解性测定 56 5.2.2 米渣蛋白肽的乳化性和乳化稳定性的测定 56-57 5.2.3 米渣蛋白肽的起泡性和泡沫稳定性 57-58 5.2.4 米渣蛋白肽的吸油性 58-59 5.2.5 米渣蛋白肽的持水性 59 5.3 本章小结 59-60 主要结论 60-61 展望与创新点 61-62 展望 61 创新点 61-62 参考文献 62-68 致谢 68
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中图分类: > 工业技术 > 轻工业、手工业 > 食品工业 > 一般性问题 > 基础科学 > 食品化学 > 蛋白质
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