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仁果类果实煤污病和蝇粪病病原菌多样性

作　者: 李焕宇
导　师: 孙广宇
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 植物病理学
关键词: 28S核糖体基因内转录间隔区菌丝体类型分类座囊菌纲
分类号: S436.61
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 19次
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内容摘要

煤污病和蝇粪病是仁果类果实生长晚期的两种重要病害,在果实表面形成污斑或污点,严重降低果实商品品质。煤污病和蝇粪病菌体类型多样,病原菌种类复杂,寄主也极为广泛。本试验主要对苹果煤污病和蝇粪病进行了研究,并对山楂和梨煤污病和蝇粪病病原菌多样性进行了初步探讨。于2006和2007年在中国陕西、山西、河南和甘肃4省25个地区共采集苹果煤污病和蝇粪病样品529份,分离得到纯菌种342株。对42株代表性菌株测定其核糖体基因rDNA的大亚基LSU区域部分序列,进行系统发育分析,结果显示:39个菌株归于月盾霉属Peltaster、Xenostigmina、Stomiopeltis、假小尾孢属Pseudocercosporella、接瓶霉属Zygophiala、锥梗孢属Dissoconium、链丝孢属Catenolaria、枝氯孢属Ramichloridium、球腔菌属Mycosphaerella、钉孢属Passalora、Strelitziana等11个属,其余3个菌株不能归属。总结了11个属在PDA培养基上的菌落培养性状,据此对所有菌株进行初步归属。供试菌株中317个菌株均可归于上述11个属,其余25个菌株不属于这些属。这一结果表明苹果煤污病和蝇粪病病原菌具有多样性,同时为根据菌落特征将病原菌分离物归类到属提供了一种简易方法。根据菌体类型分类标准将供试标苹果煤污病样品菌体划分为分支状、刻点状、蜂巢状和煤烟状四种类型。进一步比较发现菌体类型与病原菌归属表现出明显的相关性:分支状类型主要由Stomiopeltis spp.引起,刻点状类型主要由Peltaster spp.引起,蜂巢状类型主要由Pseudocercosporella spp.引起,煤烟状类型主要由Mycosphaerella spp.引起;蝇粪病病原菌主要包括Dissoconium spp.、Stomiopeltis spp.、Zygophiala spp.和Catenolaria spp.。菌体类型与病原菌归属之间虽不是一一对应,但可作为田间初步判断与归类的一个很有用的工具。结合ITS序列分析、菌落培养性状和形态学特征着重对3个属进行了鉴定描述。包括接瓶霉属Zygophiala 2种,隐性接瓶霉Z. cryptogama和柱孢接瓶霉Z. cylindrica;月盾霉属Peltaster 2种,同形孢月盾霉Pe. uniformis和礼泉月盾霉Pe. Liquanensis;假小尾孢属Pseudocercosporella2种,倒棍形假小尾孢Ps. obclavata和梭假小尾孢Ps. fusiformis;其中Z. cryptogama为我国新纪录种,其余5个种为新种。根据LSU序列分析将已报道的Ramularia-like真菌初步确定为一个新属,命名为链丝孢属Catenolaria,鉴定描述了该属中的三个新种:灵宝链丝孢C. lingbaosum、黄链丝孢C. flavus和粉链丝孢C. pulveris。采集得到40和12份山楂和梨煤污病和蝇粪病样品,分别得到纯菌株37和7株。对其中42株病原菌的ITS序列进行系统发育分析,将其初步归于锥梗孢属Dissoconium、月盾霉属Peltaster和球腔菌属Mycosphaerella等3个属的8个种。其中,山楂煤污病病原菌包括Dissoconium sp. FG5.2、Peltaster sp. 1、Pe. liquanensis、Pe. uniformis、Mycosphaerella sp. 1和Mycosphaerella sp. 2等3个属的6个种,梨煤污病和蝇粪病病原菌包括Mycosphaerella sp. 1、Mycosphaerella sp. 3和D. mali等2个属的3个种。表明山楂和梨煤污病和蝇粪病病原菌具有多样性,其中一些种类与苹果上病原相同,另外一些种类在苹果上尚未发现,可能为这些寄主所特有。

全文目录

摘要  5-7
ABSTRACT  7-11
第一章引言  11-25
  1.1 文献综述  11-23
    1.1.1 煤污病和蝇粪病的发生及危害  11-12
    1.1.2 煤污病和蝇粪病菌体类型  12-15
    1.1.3 煤污病和蝇粪病病原菌  15-18
    1.1.4 核苷酸序列分析方法的应用  18
    1.1.5 煤污病和蝇粪病病原菌的寄主  18-19
    1.1.6 蝇粪病病原菌S. pomi 的病害循环  19-20
    1.1.7 煤污病和蝇粪病的发生条件  20-22
    1.1.8 煤污病和蝇粪病病原菌的营养来源  22
    1.1.9 煤污病和蝇粪病的防治  22-23
  1.2 本论文的研究目的和内容  23-25
第二章材料与方法  25-33
  2.1 试验材料  25-26
    2.1.1 样品来源  25
    2.1.2 试验用培养基  25
    2.1.3 试验用试剂和主要溶液的配置  25-26
    2.1.4 试验用主要仪器  26
  2.2 试验方法  26-33
    2.2.1 标本保存  26
    2.2.2 病原菌的分离和菌种保存  26
    2.2.3 煤污病和蝇粪病菌体类型的初步划分  26-27
    2.2.4 室内接种测定致病性  27
    2.2.5 形态鉴定  27-28
    2.2.6 核苷酸序列分析  28-33
第三章结果与分析  33-74
  3.1 煤污病和蝇粪病病原菌的分离与保存  33
  3.2 室内接种测定致病性  33
    3.2.1 苹果煤污病和蝇粪病病原菌致病性的测定  33
    3.2.2 山楂和梨煤污病和蝇粪病病原菌致病性的测定  33
  3.3 煤污病和蝇粪病菌体类型的初步划分  33-35
    3.3.1 苹果煤污病和蝇粪病菌体类型划分  33-35
    3.3.2 山楂和梨煤污病和蝇粪病病征菌体类型的划分  35
  3.4 苹果煤污病和蝇粪病病原菌的初步鉴定  35-42
    3.4.1 苹果煤污病和蝇粪病病原菌的LSU 序列分析  35-40
    3.4.2 苹果煤污病和蝇粪病病原菌菌株的初步归属  40-42
  3.5 苹果煤污病和蝇粪病菌体类型与病原菌对应关系  42-43
  3.6 部分苹果煤污病和蝇粪病病原菌种类鉴定  43-74
    3.6.1 接瓶霉属  43-49
    3.6.2 月盾霉属  49-56
    3.6.3 假小尾孢属  56-61
    3.6.4 链丝孢属新属  61-74
第四章结论  74-76
参考文献  76-82
附录  82-90
致谢  90-91
作者简介  91

仁果类果实煤污病和蝇粪病病原菌多样性

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