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应激促进裸鼠胰腺癌生长机制的研究
作 者: 任风梅
导 师: 李玉军
学 校: 青岛大学
专 业: 病理学与病理生理学
关键词: 胰腺肿瘤 模型 EMMPRIN Ki-67 VEGF
分类号: R735.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
[目的]构建裸鼠胰腺癌移植瘤束缚应激模型,探讨应激促进裸鼠胰腺癌生长的机制。[方法](1)建立裸鼠胰腺癌移植瘤束缚应激模型:将胰腺癌panc-1细胞株接种于20只裸鼠背部皮下,建立裸鼠皮下移植瘤模型,然后将裸鼠随机分成单纯荷瘤组和荷瘤+应激组,每组10只。单纯荷瘤组裸鼠按正常方式饲养;荷瘤+应激组裸鼠放入自制束缚筒中,限制其自由活动,8h后将动物放出,恢复自由供食物和水;2周后处死裸鼠并采血。(2)采用ELISA方法检测裸鼠血清中肾上腺素(E)的含量。(3)采用免疫组织化学方法检测裸鼠移植瘤组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)、Ki-67、血管内皮生长因子(VEGF)和CD105的表达。[结果](1)荷瘤+应激组移植瘤质量、瘤体积和血清E含量均高于单纯荷瘤组,差异有显著性(t=-2.812~-2.486,P<0.05)。(2)荷瘤+应激组移植瘤组织中EMMPRIN、Ki-67和VEGF的阳性表达均明显高于单纯荷瘤组,差异有显著性(Z=-2.636~-2.033,P<0.05);荷瘤+应激组微血管密度(MVD)为23.58±2.93,单纯荷瘤组为20.64±1.44,二者间差异具有显著性(t=-2.846,P<0.05)。(3)裸鼠移植瘤组织中EMMPRIN与VEGF、Ki-67的表达呈正相关(r=0.702;0.534,P<0.05)。[结论]应激可能通过上调EMMPRIN的表达,诱导癌细胞增殖、侵袭以及血管生成,促进裸鼠胰腺癌的生长。
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全文目录
摘要 2-3 Abstract 3-6 引言 6-7 第一章 实验材料及试剂 7-9 1.1 仪器设备 7 1.2 材料及试剂 7-8 1.3 常用缓冲液、培养液等溶液的试剂配方 8-9 1.3.1 细胞培养相关试剂 8 1.3.2 HE染色相关试剂 8 1.3.3 免疫组织化学相关试剂 8-9 第二章 实验方法及项目 9-14 2.1 实验细胞及培养 9-10 2.1.1 实验细胞 9 2.1.2 细胞培养 9-10 2.1.2.1 细胞传代 9 2.1.2.2 细胞冻存 9-10 2.1.2.3 细胞复苏 10 2.2 实验动物及饲养 10 2.3 实验分两组 10 2.4 模型的构建 10-11 2.4.1 裸鼠移植瘤模型的构建 10 2.4.2 裸鼠移植瘤应激模型的构建 10-11 2.4.3 观察指标及数据处理 11 2.5 ELISA检测裸鼠血清肾上腺素的含量 11 2.6 移植瘤组织常规HE染色步骤 11-12 2.7 移植瘤组织免疫组织化学检测 12-13 2.7.1 免疫组化用载玻片制备 12 2.7.2 免疫组化检测步骤(PV-6000法) 12-13 2.7.3 结果判定标准 13 2.8 数据统计分析方法 13-14 第三章 实验结果 14-19 3.1 两组裸鼠一般情况观察 14 3.2 两组裸鼠体质量、移植瘤情况 14-15 3.3 裸鼠血清肾上腺素含量 15-16 3.4 免疫组织化学染色结果 16-19 3.4.1 移植瘤组织中EMMPRIN、Ki-67、VEGF的表达 16 3.4.2 移植瘤组织中MVD比较及与VEGF表达的相关性 16-17 3.4.3 EMMPRIN和Ki-67、VEGF表达的相关性 17-19 讨论 19-22 结论 22-23 参考文献 23-26 附图 26-33 综述 33-43 综述参考文献 39-43 攻读学位期间的研究成果 43-44 致谢 44-45
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胰腺肿瘤
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