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鲑降钙素对大鼠牙根吸收修复相关细胞因子表达影响的实验研究

作 者: 徐衍喆
导 师: 李志华
学 校: 南昌大学医学院
专 业: 口腔临床医学
关键词: 鲑降钙素 牙根吸收 牙根修复 骨形成蛋白-2 骨涎蛋白
分类号: R781
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的:本实验旨在探索鲑降钙素牙根吸收修复程度之间的量效及时效关系,探讨鲑降钙素能否有效抑制牙根吸收,为临床提供实验依据和指导。方法:选用54只280g±20g健康雄性SD大鼠分成3组进行实验,实验内容为:1建立大鼠牙根吸收模型,2测试不同给药剂量和给药方法对大鼠牙根吸收修复的影响,3研究局部注射鲑降钙素对大鼠牙根吸收修复时效性影响。实验结果采用描述性统计分析。1.大鼠牙根吸收模型的建立选用2只实验大鼠,在大鼠上颌安装正畸加力装置,以大鼠上颌两中切牙为支抗,施加60g拉力牵引左侧第一磨牙向近中,隔天检查加力装置。加力第7天腹腔注射过量水合氯醛处死,取根尖周组织行HE染色,观察根尖及牙槽骨吸收情况。2.不同给药剂量和给药方法对大鼠牙根吸收修复的影响。选用24只实验大鼠,如实验第一步骤所示安装加力装置,按给药剂量和方式分为9组(3.0IU局部注射组,1.5IU局部注射组,1.0IU局部注射组,3.0IU颈部皮下注射组,1.5IU颈部皮下注射组,1.0IU颈部皮下注射组,加力非注射对照组,空白对照组,每组各3只)。加力后第三天开始注射,每2天注射一次,共注射7次,注射后第15天统一处死大鼠并取加力侧上颌第一磨牙牙根及根尖周组织,通过RT-PCR测定BMP-2及BSP含量变化,根据其灰度值改变对牙根修复程度进行评估。3.局部注射降钙素对大鼠牙根吸收修复时效性研究。选用28只实验大鼠,在大鼠上颌两中切牙和单侧第一磨牙之间添加加力装置。按给药浓度分为3组(局部注射3.0IU组12只,局部注射1.5IU组12只,加力不注射组4只)。加力后第三天开始注射,每2天注射一次,分别在注射后第9天,11天,13天,15天各处死大鼠,并取加力侧上颌第一磨牙根尖周组织,通过RT-PCR测定BMP-2及BSP含量变化,根据其灰度值改变对不同注射剂量组各时间点牙根修复程度进行比较。结果:1.在中切牙与第一磨牙之间加60g力第7天,第一磨牙根尖周组织病理切片表现为破骨细胞形成,牙根吸收。2.注射剂量与给药途径对大鼠根尖周组织BSP和BMP-2的表达有显著影响。其中BMP-2基因表达强度表现为局部注射3.0IU组>局部注射1.5IU组>局部注射1.0IU组>皮下注射3.0IU,1.5IU,1.0IU组>空白对照组。BSP基因在局部注射组(3.0IU,1.5IU,1.0IU)均表现为表达明显强于皮下注射各组。3. BMP-2基因在局部注射3.0IU鲑降钙素9天后,11天,13天,15天表达逐渐增强。BSP基因在局部注射3.0IU鲑降钙素9天至13天表达逐渐增强,15天组表达量和13天组基本接近。结论:1.鲑降钙素可促进大鼠牙根修复,不同给药途径和剂量对大鼠牙根修复的影响有显著差异。2.根尖周局部注射鲑降钙素,可显著促进大鼠牙根吸收的修复,且促进作用随注射时间增加而增加。

全文目录


摘要  3-5
ABSTRACT  5-10
第1章 引言  10-14
  1.1 概述  10
  1.2 国内外研究现状  10-14
    1.2.1 降钙素(CT)对破骨细胞的作用  11-12
    1.2.2 降钙素(CT)对成骨细胞的作用  12-13
    1.2.3 降钙素(CT)与牙根吸收的关系  13
    1.2.4 BMP-2、BSP 与牙根吸收修复的关系  13-14
第2章 材料与方法  14-21
  2.1 实验材料  14-15
    2.1.1 实验动物  14
    2.1.2 实验材料和仪器  14-15
  2.2 实验方法  15-20
    2.2.1 正畸力诱导牙根吸收动物模型的建立  15-16
    2.2.2 牙根吸收模型根尖组织样本的处理  16-17
    2.2.3 实验一:注射鲑降钙素,不同给药浓度和给药途径对大鼠牙根吸收修复的影响:检查 BMP-2 及 BSP 水平的检测  17-19
    2.2.4 实验二:局部注射降钙素对大鼠牙根吸收修复时效性研究:检测BMP-2 及 BSP 水平的变化  19-20
  2.3 统计分析  20-21
第3章 结果  21-34
  3.1 牙根吸收情况的 HE 染色观察  21-22
  3.2 注射鲑降钙素,不同给药浓度和给药途径对大鼠牙根吸收修复的影响  22-23
  3.3 局部注射降钙素对大鼠牙根吸收修复时效性研究:PCR 对 BMP-2,BSP 的半定量分析  23-29
  附图  29-34
第4章 讨论  34-38
  4.1 牙根吸收模型的建立  34
  4.2 降钙素类药物种类的选择  34-35
  4.3 实验对降钙素注射剂量的选择  35
  4.4 BMP-2 和 BSP 升高与牙根修复的关系  35-37
  4.5 鲑降钙素作为促进牙根吸收修复药物的应用前景  37-38
第5章 结论与展望  38-39
  5.1 结论  38
  5.2 展望  38-39
致谢  39-40
参考文献  40-44
攻读学位期间的研究成果  44-45
综述  45-51
  参考文献  49-51

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