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大鼠外伤性白内障晶状体上皮细胞中TGF-β1及ICAM-1表达的研究

作　者: 徐嘉阳
导　师: 邵彦
学　校: 大连医科大学
专　业: 眼科学
关键词: 外伤性白内障 转化生长因子β1 晶状体上皮细胞
分类号: R776.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


目的：外伤性白内障的发展变化是一个比较复杂的生理生化过程，是众多眼外伤发展进程中都会存在的情况之一。在某种程度上，外伤性白内障与后发性白内障有着大体相同的致病机理，二者客观上都是对晶状体的一种创伤刺激过程。因此研究外伤性白内障的致病机理不但可以对其预防和诊治达到事半功倍的效果，更有意义的是，可以指导防治后发性白内障的发生，为患者术后保存良好视力起到关键性作用。近年来，与白内障形成相关的某些细胞因子得到了科学家们的密切关注。转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1，TGF-β1)可使晶体上皮细胞发生异常排列、纺锤形分化并细胞外基质（ext ra ce llular matrix，ECM）积聚增厚而致白内障样改变。细胞间粘附分子-1（inter cellular adhesionmolecule-1， ICAM-1）介导多种细胞之间、细胞-ECM之间彼此附着粘连，同时也调节细胞生长分化、延伸迁移等生物学行为。本实验旨在通过观察TGF-β1和ICAM-1在外伤性白内障晶体上皮细胞（1ens epithelial cell，LEC）中的表达状况，探讨二者之间的相联性以及它们与白内障的发病关系；为外伤性白内障的发病机理及其一般发展规律提供可能性理论依据；为白内障的临床预防与治疗提供有效的新方向。方法：取20只体重为280g±30g健康成年大鼠，雌雄皆可。模型组：均在大鼠左眼人为建立穿透伤性白内障动物模型；正常对照组：未穿刺的对侧右眼。术后将大鼠随机抽取为12h(0.5d)，24h(1d)，72h(3d)，168h(7d)4个时段组，每组各有5只，仔细察看各组大鼠晶状体混浊纤维化的程度状况。通过免疫组化染色法观察大鼠LEC中ICAM-1的表达变化情况，用同样的方法观察TGF-β1的表达情况，比较造模前后各组中二者的含量水平；分析各组LEC内转化生长因子β1与ICAM-1的相关性。采用SPSS17.0统计软件管理数据，P＜0.05代表具有统计学意义。结果：1．造模后用裂隙灯观察各组外伤性白内障的发展情况：对侧眼组大鼠晶状体始终未见纤维化；模型组晶状体均出现不一样程度的混浊，且纤维化程度呈时间依赖性。术后12h（0.5d）仅限于针头划伤的地方呈轻微混浊；术后1d混浊面积逐渐扩张，呈淡白色云片状；术后3d范围更大且混浊加深，呈白色絮状混浊及斑片状混浊；术后5d呈白色凝块样大面积混浊。此后白内障纤维化进展大致趋于稳固不变。2．采用免疫组织化学染色方法测出各组LEC中TGF-β1、ICAM-1的表达：①TGF-β1的表达情况：正常对侧眼组可见到少数散在TGF-β1蛋白表达，模型组各时间点TGF-β1较对侧眼组的阳性表达率明显增高，差异有统计学意义（t0.5d=5.269，t1d=9.610，t3d=20.857，t7d=31.790，每组间均P<0.05）；在四个时间组中，模型组的TGF-β1表达逐渐增多（F=235.592，P<0.05；组间多重比较，各组间P <0.05），此目的因子在对侧眼组中的表达无明显变化（F=0.565，P>0.05）。②ICAM-1的表达情况：对侧眼组没有发现目的因子的蛋白染色，模型组各时间点ICAM-1较对侧眼组的阳性表达率明显增高，差异有统计学意义（t0.5d=25.332，t1d=32.933，t3d=43.507，t7d=56.482，每组间均P<0.05）；在四个时间组中，模型组ICAM-1含量逐渐增加（F=92.383，P<0.05；组间多重比较，各组间P<0.05），而对侧眼组的ICAM-1无明显变化（F=0.047，P>0.05）。③经线性相关性分析证明，模型组LEC中TGF-β1表达与ICAM-1呈显著正相关（r=0.863P<0.05）。结论：1.外伤性白内障病理表现为晶状体蛋白异常改变以及上皮细胞非正常纤维化生长、延伸和上皮-间充质变化。2.外伤性白内障LEC中TGF-β1、ICAM-1的阳性染色均高于对侧眼组，且二者具有明显相关性。说明当晶状体受到创伤应激时，促进TGF-β1及ICAM-1产生增多，共同参与外伤性白内障的形成及发展过程。

全文目录


摘要  7-9
Abstract  9-12
前言  12-13
材料与方法  13-17
  1. 实验对象  13
  2. 主要试剂  13
  3. 主要仪器  13-14
  4. 动物模型  14
  5. 实验分组  14
  6. 标本处理  14
  7. 指标测定  14-16
  8. 数据分析  16-17
结果  17-20
  1. 造模后用裂隙灯观察各组大鼠单眼外伤性白内障晶状体的形成情况  17
  2. 免疫组化检结果  17-20
讨论  20-26
结论  26-27
参考文献  27-29
综述  29-37
  参考文献  35-37
致谢  37-38

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中图分类: > 医药、卫生 > 眼科学 > 晶状体与玻璃体疾病 > 白内障
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