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ARMS2基因干扰对视网膜色素上皮细胞促炎介质的影响

作　者: 曾繁星
导　师: 徐海峰
学　校: 济南大学
专　业: 眼科学
关键词: ARMS2 年龄相关性黄斑变性 视网膜色素上皮
分类号: R774.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


目的研究旨在阐明年龄相关性黄斑变性易感因子2（age-related maculopathysusceptibility2，ARMS2）基因和促炎因子之间的关系,以探讨其在年龄相关性黄斑变性发生中可能发挥的作用。方法采用siRNA技术抑制ARMS2在ARPE-19细胞中的表达，Realtime PCR、Western blot检测ARMS2基因抑制效率；以Real-time PCR和ELISA检测ARPE-19细胞C3，C5，IL-6，IL-8，TNF-α分泌水平；比较ARMS2被抑制前、后ARPE-19细胞C3，C5，IL-6，IL-8，TNF-α分泌水平的变化。结果通过Realtime PCR检测ARMS2在实验组（ARMS2-siRNA）（0.72±0.18）的表达水平与正常组（1.00±0.00）及对照组（scrambled siRNA，0.96±0.35）相比明显下降，差异均有显著性，P值均小于0.05；，通过Western blot检测正常组，对照组（scrambled siRNA），实验组（ARMS2-siRNA）的ARMS2蛋白分泌水平分别为0.85±0.122,0.87±0.143, and0.61±0.240(F=42.53, P<0.01)；ELISA检测C3，C5，IL-6，IL-8，TNF-α的蛋白分泌水平实验组较正常组分别下降了34.24±1.812%,37.15±2.021%,35.11±1.751%,30.11±2.191%, and34.33±2.182%(P<0.05)；Realtime PCR检测C3，C5，IL-6，IL-8，TNF-α的TAI（TAI=2-delta delta CT）实验组较正常组分别下降了34.24±1.812%,37.15±2.021%,35.11±1.751%,30.11±2.191%, and34.33±2.182%(P<0.05)。结论本研究的证据支持AMD风险等位基因为ARMS2直接或间接与促炎介质相关的观念。更重要的是,我们的数据表明,ARMS2基因可能影响C3，C5，IL-6，IL-8，TNF-α的分泌水平,这也可能AMD发生机制之一。

全文目录


目录  5-6
摘要  6-7
Abstract  7-9
主要符号表  9-10
引言  10-13
第一章 实验材料和方法  13-26
  1.1 实验材料  13-18
  1.2 实验方法  18-26
第二章 实验结果  26-29
  2.1 细胞培养  26
  2.2 Western blot 检测 ARMS2 蛋白表达  26-27
  2.3 RealtimePCR 检测 ARMS2, C3, C5, IL-6, IL-8, and TNF-α的表达  27-28
  2.4 ELISA 检测 C3, C5, IL-6, IL-8, and TNF-α的表达  28-29
第三章 讨论  29-33
第四章 结论  33-34
参考文献  34-37
综述  37-49
  参考文献  44-49
攻读学位期间的研究成果  49-50
致谢  50

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中图分类: > 医药、卫生 > 眼科学 > 视网膜及视神经疾病 > 黄斑、中心窝疾病
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