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脑缺血再灌注模型大鼠电针干预后脑区炎性因子IL-1β，ICAM-1变化研究

作　者: 任暎贞
导　师: 图娅
学　校: 北京中医药大学
专　业: 针灸推拿学
关键词: 电针缺血性脑中风炎性因子 IL-1β ICAM-1
分类号: R245
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
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内容摘要

研究背景：缺血性脑中风是人类健康大敌。现代机理研究证实：炎症过程参与缺血性脑中风后损伤级联反应,导致脑缺血后再灌注损伤。因此,在缺血性中风初期,溶栓治疗有效,而在长病程及恢复期疗效并不显著。近二十年来,临床和机理研究反复证明：针刺对缺血性脑中风具有良好干预效果,贯穿于急性期,损伤中后期,恢复期及康复期。研究目的：脑缺血再灌注大鼠模型采用比较稳定地血管内栓线阻断法；造模成功后分组进行电针干预；并检测不同穴组干预后12h,24h,48h,72h,96h,144h这6个不同时程中脑区白介素-1β(IL-1β)与细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的动态变化,比较治疗脑缺血再灌注后炎症反应的针刺有效配穴效应；比较观察大鼠大脑损伤侧与健康侧的白介素-1β (IL-1β)与细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的变化趋势。研究方法：将清洁级健康SD大鼠按随机数字表分成空白组(10只)和模型组(成模180只)；造模成功(根据神经功能评分结果进行评价)的大鼠根据随机数字表分为模型对照组(60只),针刺1组(60只,百会透刺印堂配伍水沟穴),针刺2组(60只,百会配伍患侧足三里穴)；造模各组又分为6个时程：造模后12h,24h,48h,72h,96h,144h,每个时程10只动物。取脑组织,采用TTC染色观察大脑梗死情况,HE染色观察脑组织形态学变化；冰冻切片后,免疫组化检测健患侧组织中IL-1β, ICAM-1的表达。实验结果：1模型评价：HE染色镜下观察发现,梗死中心区染色变浅,细胞数目减少,细胞核固缩,核仁变小,形态不规则；间质水肿；内皮细胞肿胀；可以见到大量网格状空泡。TTC染色发现缺血局部脑组织出现典型染色缺失,呈现白色,与大脑中动脉支配区域相符,视交叉前后梗死灶比较稳定。2针刺不同穴组对健患侧脑组织中IL-1β的影响：脑缺血再灌注损伤发生后,模型对照组患侧脑组织的IL-1β表达均呈现典型的双峰模式,在12h到达第一峰峰值,之后持续增高,在48h到达第二峰峰值,72h短暂下降后,又呈现持续增高趋势；模型对照组健侧脑组织的IL-1β表达亦呈现典型的双峰模式,在12h时到达第一峰峰值,至48h小幅下降后又呈现持续增高趋势,在144h到达第二峰峰值。模型大鼠给予百会透刺印堂配伍水沟穴与百会配伍足三里穴电针治疗后,对患侧脑组织中IL-1β的表达水平均有全程下调作用；健侧脑组织中IL-1β的第一峰表达增高,第二峰表达提前。模型大鼠给予百会配伍足三里穴电针治疗与百会透刺印堂配伍水沟穴对比,百会穴配伍足三里穴电针治疗更能够显著下调模型大鼠患侧脑组织IL-1β表达水平。3针刺不同穴组对健患侧脑组织中ICAM-1的影响：脑缺血再灌注损伤发生后,模型对照组的患侧脑组织的ICAM-1表达均呈现双峰模式,在24h到达第一峰峰值,之后迅速下降,72h达到第二峰峰值后,呈现持续增高趋势；模型对照组健侧脑组织的ICAM-1表达亦呈现典型的双峰模式,表达趋势与患侧模型对照组相似,在24h时到达第一峰峰值,后持续增高趋势,在144h到达第二峰峰值。模型大鼠给予百会透刺印堂配伍水沟穴与百会配伍足三里穴电针治疗后,给予百会透刺印堂配伍水沟穴组ICAM-1的表达在患侧脑组织中72h前呈现增高趋势,在健侧脑组织中48h前呈现增高趋势；给予百会配伍足三里穴组ICAM-1的表达在患侧脑组织中48h前呈现增高趋势,在健侧脑组织中48h前亦呈现增高趋势。模型大鼠给予百会穴配伍足三里穴电针治疗与百会透刺印堂配伍水沟穴对比,百会穴配伍足三里穴电针治疗更能够显著下调模型大鼠患侧脑组织的ICAM-1表达趋势。4各组内模型大鼠大脑损伤侧与健康侧IL-1β,ICAM-1的变化趋势比较：模型对照组,针刺1,2组内模型大鼠大脑健康侧与损伤侧脑组织中IL-1β,ICAM-1表达趋势比较,各组患侧脑组织中IL-1β,ICAM-1表达均低于各组的健侧脑组织IL-1β, ICAM-1表达水平。结论：1.模型对照组双侧脑组织中IL-1β及ICAM-1表达均呈现双峰模式,这表明IL-1β及ICAM-1是观察脑缺血炎症的理想分子标志物,可用来判定炎症反应的强弱。2.电针组(百会透刺印堂配伍水沟,百会配伍足三里)对机体应激-损伤信号链发挥网络调节作用,干预了双侧脑组织中IL-1β,ICAM-1的表达,提示电针通过抑制机体过度应激,减轻损伤过程,促进细胞间联系,调动脑组织减轻缺血再灌注损伤。3.百会配伍足三里穴对比百会透刺印堂配伍水沟穴,能够更好调节机体对炎症应激-损伤反应,并减轻炎性反应及炎症损伤。提示电针干预时,远端配穴效应优于局部配穴。4.模型大鼠大脑损伤侧与健康侧IL-1β, ICAM-1的变化趋势比较,各组患侧脑组织中IL-1β, ICAM-1表达水平均低于各组健侧脑组织的表达水平,提示针刺通过降低患侧脑组织IL-1β, ICAM-1的表达来参与脑缺血再灌注损伤过程,抑制炎症反应。

全文目录

中文摘要  5-8
ABSTRACT  8-12
英文缩略语  12-13
第一部分文献综述  13-29
  综述一中医对中风的认识  13-20
    1 中医对中风病因病机的认识  13-15
    2 中医对中风病针灸治疗方案的记载  15-17
    3 中医对中风的治疗  17-19
    参考文献  19-20
  综述二现代医学对缺血性脑中风的认识  20-26
    1 现代医学对缺血性脑中风的认识  20
    2 缺血性脑损伤与炎性反应  20-22
    3 缺血性脑中风的现代医学治疗  22-24
    参考文献  24-26
  综述三针刺治疗缺血性脑中风的实验研究进展  26-29
    1 增加脑缺血区的血供  26
    2 病理形态学改变  26
    3 调节神经细胞凋亡相关因子  26
    4 控制炎症反应  26
    5 抑制兴奋性氨基酸的释放  26-27
    6 调控神经生化反应  27
    7 阻滞细胞内钙离子超载  27-28
    参考文献  28-29
第二部分实验研究  29-62
  前言  29-30
  实验一血管内栓线阻断法脑缺血再灌注大鼠模型的建立  30-35
    1 实验材料  30
    2 实验方法  30-32
    3 实验结果  32-34
    4 小结  34-35
  实验二不同穴组电针对脑缺血再灌注模型大鼠脑区IL-β的影响研究  35-45
    1. 实验材料  35-36
    2. 实验方法  36-38
    3. 实验结果  38-44
    4 小结  44-45
  实验三不同穴组电针对脑缺血再灌注模型大鼠脑区ICAM-1的影响研究  45-52
    1. 实验材料  45
    2. 实验方法  45
    3. 实验结果  45-51
    4 小结  51-52
  讨论  52-58
    1 模型的选择  52
    2 模型建立的评价选择  52-53
    3 取穴依据  53-54
    4 电针不同穴组对脑缺血再灌注模型大鼠双侧脑区IL-1 β,ICAM-1表达的影响  54-57
    5 各组大鼠大脑损伤侧与健康侧IL-1 β,ICAM-1的变化趋势比较  57-58
  参考文献  58-61
  结论  61-62
致谢  62-63
个人简历  63

脑缺血再灌注模型大鼠电针干预后脑区炎性因子IL-1β，ICAM-1变化研究

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