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苏云金杆菌以色列种对云南省中缅边境地区三带喙库蚊杀伤效果评价

作　者: 马素媛
导　师: 艾国平
学　校: 第三军医大学
专　业: 公共卫生
关键词: 中缅边境地区三带喙库蚊苏云金杆菌生物测定蚊龄温度密度
分类号: R184.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

研究背景和目的：三带喙库蚊是流行性乙型脑炎的重要传播媒介，除携带乙型脑炎病毒外，还可携带基孔肯雅病毒、版纳病毒、Kadipiro病毒、环状病毒、西尼罗河病毒等[1]。我国是乙脑高流行区，在20世纪60年代和70年代初期全国曾发生大流行，70年代以后随着大范围接种乙脑疫苗，乙脑发病率明显下降，据我国1998-2002年乙脑监测数据显示该病的病死率高达5%-35%，幸存病例中30%-50%将留有严重的后遗症[2]。云南省2007年开始实施乙脑疫苗国家免疫规划，流行强度得到一定程度遏制，2008-2009年的病死率仍然维持在较高水平（5.90%和3.79%），说明流行态势依然严峻，因此还应做好蚊情监测及防控[3]。消灭三带喙库蚊目前应用较为广泛的是对成虫使用化学杀虫剂。但长期大量使用化学杀虫剂，导致我国多地的三带喙库蚊对敌敌畏、溴氰菊酯等化学杀虫剂已达到高抗水平，对其它常用化学杀虫剂部分也产生了部分抗性[4][5][6][7][8]，因此寻找新型无毒、无污染的杀虫剂成为媒介生物防治的重要任务。1976年首次发现对蚊虫有很强杀虫活性的苏云金芽孢杆菌以色列亚种（Bacillus thuringiensis israelensis, Bti）具有对靶生物高度特异、对人畜无毒、不污染环境、不伤害天敌、害虫不易产生抗药性、防治成本比化学农药低、工艺简便和易于生产使用等特点，具有较好的应用和开发前景[1]。云南省德宏州盈江县地处我国西南边陲，与缅甸交界，县城附近地势平坦，四面环山，是大山深处的“平原”。该地以种植水稻和甘蔗等为主，气候温热潮湿，稻田和耕牛饲养等都为蚊虫滋生创造了较好的环境，在该地区蚊虫分布密度非常大，其中绝大部分是三带喙库蚊。2008年、2009年盈江县乙脑的发病率居云南省前五位[2]。本课题组的前期研究结果提示，云南省德宏州盈江县太平镇的三带喙库蚊对溴氰菊酯已产生非常高的抗药性，因此，寻找新型杀虫剂已成为该地区蚊媒防治当前亟待解决的重要问题。本课题组在云南省中缅边境地区德宏州盈江县太平镇的稻田茬地积水捕捉三带喙库蚊幼虫，带回实验室，对Bti杀伤三带喙库蚊幼虫的效果进行生物测定，并探讨在不同蚊龄、温度、水质、密度条件下Bti对三带喙库蚊幼虫杀伤效果及Bti处理对蛹羽化率的影响，旨在为Bti在杀灭三带喙库蚊中的合理应用提供科学依据。方法：首先利用概率分析方法对Bti水分散颗粒剂作用于三带喙库蚊不同蚊龄幼虫的杀伤效果进行生物测定，然后检测和比较在不同温度、水质、密度下Bti对三带喙库蚊幼虫的杀伤效果，明确不同蚊龄、温度、水质、密度对Bti灭蚊效果的影响；并对比观察了亚致死量Bti处理后对三带喙库蚊幼虫化蛹后羽化率的影响。结果：1. Bti对三带喙库蚊幼虫的灭杀起效快，12h内即显示很强的杀伤效果。2. Bti对Ⅱ龄、Ⅳ龄蚊幼虫进行杀伤处理后24h，利用GraphPad Prism软件进行线性回归分析，药物浓度的log值和死亡率的概率值具有线性关系，得到公式y=2.588x-0.2524、y=2.03x+0.3654，LC50分别为107IU/L、192IU/L，LC95分别为465IU/L、9091IU/L。Ⅳ龄幼虫LC95是Ⅱ龄幼虫LC95的19.55倍，提示Ⅱ龄幼虫对Bti更为敏感。3. Bti对井水、稻田水中蚊幼虫杀伤效果进行生物测定，得到公式为y井水=2.03x+0.3654、y稻田水=1.115x+1.306，根据该公式计算LC50分别为192IU/L、2056IU/L，LC95分别为9091IU/L、62348IU/L，提示Bti在井水中比稻田重杀伤蚊虫的效果更好。4.在16℃、28℃、37℃三个不同温度下，加入Bti处理后6h、12h和24h，计算幼虫的累积死亡率。结果显示，在同一处理时间点，温度越高，幼虫死亡率也越高（P<0.01）。在Bti处理幼虫12h和24h，28℃和37℃的幼虫累积死亡率组间差异无统计学意义（P>0.05），但均显著高于16℃的幼虫累积死亡率（P<0.01）。5.不同密度下的三带喙库蚊Ⅲ龄幼虫，显示无论Bti低剂量组或高剂量组随着幼虫密度的增加，Bti对幼虫的杀伤效果在不断降低。高剂量组的杀伤效果随着幼虫密度的增加成直线下降，低剂量组在幼虫120条/L后杀伤效果就不明显。6.未用Bti处理的幼虫化蛹后羽化率为72.46%，用亚致死浓度处理的幼虫化蛹后羽化率为45.15%，两组间比较差异有统计学意义（P<0.01），提示Bti对三带喙库蚊幼虫化蛹后的羽化有明显抑制作用。结论：Bti对云南省中缅边境地区德宏州盈江县太平镇的稻田茬地积水捕捉三带喙库蚊幼虫的杀伤作用较为敏感；一定范围内升高温度可以提高Bti的起效速度和杀伤效果；蚊龄越小杀伤效果越好；水质混浊、密度高的地方需增加用药量；Bti可使幼虫化蛹后的羽化率降低。本研究结果提示，Bti是三带喙库蚊防治的理想生物杀虫剂。

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