学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

丝蛋白肽对小鼠免疫功能的影响

作　者: 李加斌
导　师: 邹凤竹
学　校: 山东农业大学
专　业: 特种经济动物饲养
关键词: 丝蛋白肽急性毒理免疫调节免疫保护
分类号: S881.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 31次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

蚕丝是由丝胶蛋白包被丝素蛋白而构成的复合纤维，其中丝素的含量约75%，丝胶的含量约25%，以及尚有少量的蜡质、碳水化合物、色素和无机成分。丝素是由蚕后部丝腺合成分泌的纤维蛋白质，不溶于水。丝胶是蚕的中部丝腺分泌的球状蛋白。由商务部统计可知，2010年我国桑蚕茧产量为61.8万吨，桑蚕丝产量9.6万吨。蚕丝通过酸、碱或酶降解可得丝蛋白肽。目前已有文献报道丝蛋白肽具有抗氧化、抗凝血、抗肿瘤、加强矿质元素吸收、抑制酪氨酸酶活性和防紫外线等生物学活性。为了进一步探讨丝蛋白肽的生物医学功能，本论文将研究丝蛋白肽对小鼠的急性毒性以及丝蛋白肽对正常及免疫低下小鼠模型免疫功能的影响，以寻找一种潜在的新型免疫调节活性物质。基于此，本论文首先通过灌胃高剂量丝蛋白肽研究了其对小鼠的急性毒性，而后研究了丝蛋白肽对正常小鼠免疫功能的影响。在选择免疫低下小鼠模型造模方式时发现，目前在环磷酰胺致免疫抑制模型和X-射线致免疫损伤模型方面没有一个统一的标准，而每个文献又有不同的造模方式，因此本论文首先通过制造模型预实验确定了免疫低下模型的方法，而后研究了丝蛋白肽对免疫低下模型小鼠免疫功能的影响，主要内容如下：（1）通过6h内连续两次灌胃小鼠剂量为30000mg/kg丝蛋白肽，研究了丝蛋白肽对BALB/c小鼠的急性毒性。检测了小鼠体征状态、体重、血常规、肝肾功以及尸体解剖组织学检查等指标，结果表明，灌胃丝蛋白肽组小鼠各指标与空白对照组相比均无显著性差异，根据化合物经口急性毒性标准判定丝蛋白肽属于无毒级别。（2）通过四种不同剂量丝蛋白肽灌胃给药小鼠30d，研究了丝蛋白肽对正常小鼠免疫功能的影响。结果表明，丝蛋白肽的高剂量组能显著提高小鼠单核吞噬细胞的吞噬功能。（3）通过造模方式选择实验确定了环磷酰胺制造小鼠免疫抑制模型的方法，腹腔注射150mg/kg环磷酰胺2次，间隔2d，造模后4d小鼠免疫系统功能显著下降。并腹腔注射给药三种不同剂量丝蛋白肽45d，研究了丝蛋白肽对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响。结果表明，丝蛋白肽能够显著提高免疫器官脏器系数、碳粒廓清指数、脾T/B淋巴细胞转化以及NK细胞活性，说明丝蛋白肽能够有效增强和保护免疫抑制小鼠免疫系统的功能。（4）通过造模剂量选择实验确定了X-射线制造小鼠免疫损伤模型的方法，接受总剂量为2Gy的X-射线全身一次性辐照，辐照后24h小鼠免疫系统功能显著下降。并腹腔注射给药三种不同剂量丝蛋白肽45d，研究了丝蛋白肽对X-射线致免疫损伤小鼠免疫功能的影响。结果表明，丝蛋白肽能够显著提高免疫器官脏器系数、脾脏白髓尺寸、碳粒廓清指数、脾T淋巴细胞转化以及NK细胞活性，说明丝蛋白肽能够有效增强和保护免疫损伤小鼠免疫系统的功能。（5）通过MTT法研究了七种浓度的丝蛋白肽在体外对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果表明，在一定浓度范围内丝蛋白肽能够刺激体外脾淋巴细胞的增殖能力。

全文目录

符号说明  4-10
中文摘要  10-12
Abstract  12-14
1 引言  14-23
  1.1 蚕丝与丝蛋白肽  14-16
  1.2 丝蛋白肽生物医学应用的研究现状  16-18
    1.2.1 丝蛋白肽生物药物  16-17
    1.2.2 丝蛋白肽生物材料添加剂  17
    1.2.3 丝蛋白肽功能性生物材料  17-18
    1.2.4 其他用途  18
  1.3 生物活性肽的分类  18-21
    1.3.1 阿片类活性肽  19
    1.3.2 降血压肽  19-20
    1.3.3 矿物结合肽  20
    1.3.4 抗氧化肽  20
    1.3.5 抗菌肽  20-21
    1.3.6 免疫调节肽  21
    1.3.7 其他生物活性肽  21
  1.4 免疫调节肽及其免疫调节作用  21-22
    1.4.1 乳源免疫调节肽  21
    1.4.2 其他免疫调节肽  21-22
  1.5 本研究课题的目的、意义及内容  22-23
2 材料与方法  23-39
  2.1 材料  23-26
    2.1.1 实验地点  23
    2.1.2 蚕茧、实验动物和细胞株  23
      2.1.2.1 蚕茧  23
      2.1.2.2 实验动物  23
      2.1.2.3 细胞株  23
    2.1.3 主要仪器  23
    2.1.4 药品与试剂  23
    2.1.5 试剂配置  23-26
      2.1.5.1 磷酸盐缓冲液（PBS）的配置  23
      2.1.5.2 4%多聚甲醛的配置  23-24
      2.1.5.3 注射用碳墨汁的配置  24
      2.1.5.4 乳酸脱氢酶（LDH）基质液的配置  24-25
      2.1.5.5 乙二胺四乙酸二钾（EDTA-2K）血液抗凝剂的配置  25-26
      2.1.5.6 RPMI-1640 完全培养液的配置  26
      2.1.5.7 细胞冻存液的配置  26
  2.2 方法  26-39
    2.2.1 丝蛋白肽的制备  26
    2.2.2 丝蛋白肽对 BALB/c 小鼠急性毒理的实验研究  26-29
      2.2.2.1 小鼠实验技术  26-27
      2.2.2.2 实验分组与给药  27-28
      2.2.2.3 小鼠生命体征观察及体重测量  28
      2.2.2.4 小鼠血常规和部分肝肾功指标的测定  28-29
      2.2.2.5 小鼠尸体解剖以及病理组织检查  29
    2.2.3 丝蛋白肽对正常 BALB/c 小鼠免疫功能的影响  29-34
      2.2.3.1 小鼠实验技术  29-30
      2.2.3.2 实验分组与给药  30
      2.2.3.3 小鼠体重和免疫器官脏器系数的测定  30
      2.2.3.4 小鼠血常规和部分肝肾功指标的测定  30
      2.2.3.5 碳粒廓清指数的测定  30-31
      2.2.3.6 脾淋巴细胞转化指数的测定  31-32
      2.2.3.7 自然杀伤（NK）细胞活性的测定  32-33
      2.2.3.8 血清溶血素含量的测定  33-34
    2.2.4 丝蛋白肽对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响  34-35
      2.2.4.1 小鼠实验技术  34
      2.2.4.2 环磷酰胺的造模方式  34-35
      2.2.4.3 实验分组、给药和造模  35
      2.2.4.4 小鼠体重和免疫器官脏器系数的检测  35
      2.2.4.5 小鼠血常规和部分肝肾功指标的测定  35
      2.2.4.6 碳粒廓清指数的测定  35
      2.2.4.7 脾淋巴细胞转化指数的测定  35
      2.2.4.8 自然杀伤（NK）细胞活性的测定  35
      2.2.4.9 血清溶血素含量的测定  35
    2.2.5 丝蛋白肽对 X-射线致免疫损伤小鼠免疫功能的影响  35-37
      2.2.5.1 X-射线造模方式的选择实验  35-36
      2.2.5.2 实验分组、给药和造模  36
      2.2.5.3 小鼠体重和免疫器官脏器系数的检测  36
      2.2.5.4 小鼠血常规和部分肝肾功指标的测定  36
      2.2.5.5 碳粒廓清指数的测定  36
      2.2.5.6 脾淋巴细胞转化指数的测定  36
      2.2.5.7 自然杀伤（NK）细胞活性的测定  36
      2.2.5.8 血清溶血素含量的测定  36
      2.2.5.9 脾脏组织切片观察  36-37
    2.2.6 丝蛋白肽在体外对脾淋巴细胞增殖的影响  37-38
    2.2.7 数据统计与分析  38-39
3 结果与分析  39-73
  3.1 丝蛋白肽对 BALB/c 小鼠急性毒理的研究  39-44
    3.1.1 小鼠生命体征与体重  39-41
      3.1.1.1 小鼠死亡状态  39
      3.1.1.2 小鼠体征状态  39
      3.1.1.3 小鼠体重  39-41
    3.1.2 对小鼠血常规和部分肝肾功的影响  41-44
    3.1.3 对小鼠脏器组织的影响  44
  3.2 丝蛋白肽对正常 BALB/c 小鼠免疫功能的影响  44-51
    3.2.1 对小鼠体重及免疫器官脏器系数的影响  44-47
    3.2.2 对小鼠血常规和部分肝肾功指标的影响  47-49
    3.2.3 对小鼠碳粒廓清能力的影响  49
    3.2.4 对小鼠脾淋巴细胞转化能力的影响  49-50
    3.2.5 对小鼠 NK 细胞活性的影响  50
    3.2.6 对小鼠血清溶血素含量的影响  50-51
  3.3 丝蛋白肽对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响  51-61
    3.3.1 环磷酰胺造模制造小鼠免疫抑制模型  51-53
    3.3.2 对免疫抑制小鼠体重及免疫器官脏器系数的影响  53-56
    3.3.3 对免疫抑制小鼠血常规和部分肝肾功指标的影响  56-58
    3.3.4 对免疫抑制小鼠碳粒廓清指数的影响  58
    3.3.5 对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞转化指数的影响  58-59
    3.3.6 对免疫抑制小鼠 NK 细胞活性的影响  59-60
    3.3.7 对免疫抑制小鼠血清溶血素含量的影响  60-61
  3.4 丝蛋白肽对 X-射线致免疫损伤小鼠免疫功能的影响  61-69
    3.4.1 X-射线致免疫损伤小鼠模型  61
    3.4.2 对免疫损伤小鼠体重及免疫器官脏器系数的影响  61-63
    3.4.3 对免疫损伤小鼠血常规和部分肝肾生化指标的影响  63-65
    3.4.4 对免疫损伤小鼠碳粒廓清指数的影响  65-66
    3.4.5 对免疫损伤小鼠脾淋巴细胞转化指数的影响  66
    3.4.6 对免疫损伤小鼠 NK 细胞活性的影响  66-68
    3.4.7 对免疫损伤小鼠血清溶血素含量的影响  68
    3.4.8 对免疫损伤小鼠脾脏组织结构的影响  68-69
  3.5 丝蛋白肽在体外对脾淋巴细胞增殖的影响  69-73
4 讨论  73-80
  4.1 丝蛋白肽对 BALB/c 小鼠急性毒理的研究  73-74
  4.2 丝蛋白肽对正常 BALB/c 小鼠免疫功能的影响  74-75
  4.3 丝蛋白肽对免疫低下模型小鼠免疫功能的影响  75-78
  4.4 丝蛋白肽在体外对脾淋巴细胞增殖的影响  78-80
5 结论  80-82
参考文献  82-91
致谢  91

丝蛋白肽对小鼠免疫功能的影响

内容摘要

全文目录

相似论文