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几种国兰组织培养及春兰菌根真菌研究

作　者: 刘幸佳
导　师: 崔永一
学　校: 浙江农林大学
专　业: 园林植物与观赏园艺
关键词: 国兰共生培养菌根真菌真菌诱导子菌根结构
分类号: S682.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

国兰一般指兰科兰属植物中的部分地生种，主要有春兰、蕙兰、建兰、墨兰、寒兰等，其原生种和栽培品种资源丰富，并具有较高的观赏价值和经济价值。在自然条件下，真菌与兰花互利共生，对其完成正常的生命周期有至关重要的作用。本研究旨在分析兰花组培快繁的影响因素，并通过人工接菌建立兰花与菌根真菌的共生体系，探讨两者间的共生效应。主要研究结果如下：1、适合寒兰根状茎分化的培养基为MS+6-BA1.5mg·L-1+NAA0.3mg·L-1；蕙兰根状茎分化的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.3mg·L-1；对春兰进行组织培养的过程中发现，以1/2MS为基本培养基，6-BA0.1mg·L-1+NAA5.0mg·L-1+AC1.0g·L-1最有利于根状茎增殖；6-BA1.0mg·L-1+NAA0.3mg·L-1最有利于根状茎芽分化；IBA1.0mg·L-1+AC1.0g·L-1最有利于春兰幼苗的生根。2、将分离自野生国兰根部的菌根真菌制成液体诱导子，分别加入春兰根状茎增殖分化培养基中培养。分离自野生春兰根部的菌根真菌诱导子对其根状茎的增殖和芽分化都有明显的促进作用。3、将春兰组培苗与12种菌根真菌共培养，结果表明FC11菌株能够促进组培苗新根的分化，同时提高鲜重增长率，利于碳水化合物的积累、水分及营养元素的吸收。对接菌苗进行石蜡切片观察及菌株重分离，进一步证实该菌株能与春兰组培苗建立良好的共生体系。4、将不同品种的春兰组培苗与菌根真菌共培养，结果表明相同菌株处理下，春兰的共生效应在品种上存在差异，叶艺品种与菌根真菌共生效果较好，寰球荷鼎与菌根真菌共生效果较差。5、通过春兰菌根显微结构的观察，发现春兰具有一般地生兰的菌根结构，菌丝通过根毛或破坏表皮细胞进入根被细胞，并定植在根被细胞内；真菌以菌丝的形式穿透细胞壁来侵染其他细胞，并再次形成菌丝结。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-10
1 文献综述  10-18
  1.1 国兰组织培养研究  10-12
    1.1.1 培养基应用研究  11
    1.1.2 植物生长调节物质应用研究  11
    1.1.3 活性炭作用研究  11-12
  1.2 国兰组织解剖学研究  12
  1.3 兰科植物菌根真菌研究  12-16
    1.3.1 兰科植物菌根形态解剖学特征研究  13
    1.3.2 兰科植物和菌根真菌之间的专一性研究  13-14
    1.3.3 菌根真菌对兰科植物的促生作用研究  14-15
    1.3.4 菌根真菌与兰科植物营养关系研究  15
    1.3.5 真菌诱导子应用的研究进展  15-16
  1.5 研究的目的与意义  16
  1.6 技术路线与研究内容  16-18
    1.6.1 技术路线  16-17
    1.6.2 研究内容  17-18
2 国兰组织培养  18-33
  2.1 材料与方法  18-21
    2.1.1 材料  18
    2.1.2 方法  18-21
      2.1.2.1 寒兰根状茎增殖分化培养  18-19
      2.1.2.2 蕙兰根状茎增殖分化培养  19
      2.1.2.3 春兰根状茎增殖培养  19
      2.1.2.4 春兰根状茎分化培养  19-20
      2.1.2.5 春兰根状茎增殖及芽分化过程的观察  20
      2.1.2.6 春兰生根培养  20-21
      2.1.2.7 春兰组培苗炼苗与移栽  21
  2.2 结果与分析  21-31
    2.2.1 不同培养基组分对寒兰根状茎增殖与芽分化的影响  21-22
    2.2.2 不同培养基组分对蕙兰根状茎增殖与芽分化的影响  22-24
    2.2.3 植物生长调节剂及活性炭对春兰根状茎增殖的影响  24-25
    2.2.4 不同培养基组分对春兰根状茎芽分化的影响  25-27
    2.2.5 春兰根状茎增殖及不定芽分化的发生过程  27-30
    2.2.6 植物生长调节剂和活性炭对春兰生根的影响  30-31
    2.2.7 移栽驯化  31
  2.3 小结与讨论  31-33
    2.3.1 植物生长调节剂对国兰根状茎增殖的影响  31-32
    2.3.2 植物生长调节剂对国兰根状茎芽分化的影响  32
    2.3.3 植物生长调节剂对国兰组培苗生根的影响  32
    2.3.4 活性炭在国兰组织培养过程中的作用  32-33
3 菌根真菌诱导子对春兰生长的影响  33-40
  3.1 材料与方法  33-34
    3.1.1 材料  33-34
    3.1.2 方法  34
      3.1.2.1 真菌诱导子的制备  34
      3.1.2.2 培养基的制备  34
      3.1.2.3 春兰组培苗驯化试验  34
  3.2 结果与分析  34-39
    3.2.1 真菌诱导子对春兰根状茎增殖的影响  34-35
    3.2.2 真菌诱导子对春兰根状茎芽分化的影响  35-37
    3.2.3 菌根真菌对春兰组培苗驯化生长的影响  37-39
  3.3 小结与讨论  39-40
4 春兰与菌根真菌的共生效应研究  40-54
  4.1 材料与方法  40-41
    4.1.1 材料  40
    4.1.2 方法  40-41
      4.1.2.1 春兰组培苗的接种  40
      4.1.2.2 指标测定  40-41
      4.1.2.3 真菌重分离  41
  4.2 结果与分析  41-51
    4.2.1 菌根真菌与春兰组培苗的共生培养状况  41-45
    4.2.2 菌根真菌对春兰组培苗生长指标的影响  45-48
      4.2.2.1 单一菌株对春兰组培苗鲜重、株高、根数的影响  45-46
      4.2.2.2 混合菌株对春兰鲜重增长率的影响  46-47
      4.2.2.3 共生培养时间对春兰鲜重增长率的影响  47
      4.2.2.4 菌根真菌对春兰不同品种平均鲜重增长率的影响  47-48
    4.2.3 菌根真菌对春兰植株含水量的影响  48-49
    4.2.4 菌根真菌对春兰叶绿素含量的影响  49-50
    4.2.5 菌根真菌对春兰可溶性糖含量的影响  50
    4.2.6 菌根真菌对春兰营养元素含量的影响  50-51
  4.3 小结与讨论  51-54
    4.3.1 单一菌种对春兰生长的影响  51-52
    4.3.2 混合菌种对春兰生长的影响  52
    4.3.3 共生时间及接菌剂量对春兰生长的影响  52
    4.3.4 菌根真菌对植株生理生化指标的影响  52-53
    4.3.5 菌根真菌与兰科植物之间的专一性  53
    4.3.6 菌根真菌与春兰品种共生效应  53-54
5 春兰接菌苗菌根结构观察  54-59
  5.1 材料与方法  54-55
    5.1.1 材料  54
    5.1.2 方法  54-55
  5.2 结果与分析  55-57
    5.2.1 春兰菌根结构  55-56
    5.2.2 菌根真菌入侵过程  56-57
  5.3 小结与讨论  57-59
6 结论与展望  59-61
  6.1 主要结论  59
  6.2 展望  59-61
附图  61-66
参考文献  66-72
作者简介  72
攻读学位期间发表的学术论文  72-73
致谢  73

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