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丛枝菌根真菌吸收同化外源氮产生精氨酸的研究
作 者: 田萌萌
导 师: 金海如
学 校: 浙江师范大学
专 业: 植物学
关键词: 丛枝菌根真菌 氮源 碳源 精氨酸
分类号: TQ922
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 30次
引 用: 2次
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内容摘要
丛枝菌根(Arbuscular Mycorrhiza, AM)真菌是自然界中普遍存在的一类重要内生菌根真菌,AM真菌与宿主植物互惠共生:AM真菌从周围环境吸收营养传递给宿主植物,宿主植物则供给真菌生长所必需的碳水产物。AM真菌根外菌丝体(Extraradical Mycelium, ERM)可以从周围环境中吸收同化不同形式的外源氮,这些氮素被整合到精氨酸(Arginine, Arg)中。Arg是AM真菌中主要的氮储存形式,也是氮在菌丝中运转和传递的载体。本文确立了盆栽条件下培养AM真菌的最佳C、N、P营养浓度,研究了不同外源氮、不同菌种、不同外源碳条件下AM真菌中Arg含量的变化影响。AM真菌的生长繁殖受很多因素的影响,盆栽条件下培养基的营养条件是影响AM真菌生长繁殖的主要因素。以大葱(Allium fistulosum,金长3号)为宿主植物接种AM真菌Glomus intraradices,以改良后的Hoagland营养液为基础营养,改变培养基中C(葡萄糖)、N (NH4NO3)、P (KH2PO4)浓度,通过测定AM真菌菌根侵染率、孢子数量和宿主植物的干物重,试图找出培养AM真菌的最佳C、N、P营养条件。结果显示培养基中分别施加0.5%的葡萄糖、2 mmol/L的NH4NO3、0.05 mmol/L的KH2PO4时AM真菌的菌根侵染率和孢子数量最高,宿主植物的长势也较好。AM真菌的ERM能够从周围环境中吸收同化不同形式的氮源,并且ERM吸收同化不同形式的外源氮的效率不同。以大葱为宿主植物接种Glomus intraradices,采用三室隔离培养系统,分别在菌丝室施加4 mmol/L的不同形式外源氮(NH4Cl、NH4NO3、KNO3、尿素、甘氨酸(Gly)、精氨酸(Arg)、谷氨酰胺(Gln)),通过测定菌根侵染率、孢子数、ERM干重、ERM和菌根中Arg含量、宿主植物中总氮量,分析比较不同氮源下AM真菌生长及产生Arg状况。结果表明菌丝室施加的不同外源氮对AM真菌的生长和Arg产量影响均不同,NH4NO3、尿素和Gln为氮源时ERM中Arg含量和植物茎叶中总氮量较高,NH4NO3、尿素、Arg和Gln为氮源时菌根中Arg含量较高。不同的AM真菌菌种对外源氮的吸收同化能力也不同,以大葱为宿主植物分别接种五种AM真菌(Glomus intraradices, Glomus mosseae, Glomus etunicatum, Glomusaggregatum, Acaulospora mellea),采用三室隔离培养系统,在菌丝室施加4 mmol/L的NH4Cl,通过测定菌根侵染率、孢子数量、ERM干重、ERM和菌根中Arg含量、宿主植物中总氮量,分析比较不同菌种的AM真菌吸收同化外源氮生产Arg的能力。结果显示不同菌种的ERM和菌根中的Arg含量各不相同,Glomus intraradices和Glomus aggregatum相对较高。接种AM真菌能够提高宿主植物的氮素营养。AM真菌的氮代谢和碳代谢息息相关,采用三室隔离盆栽培养系统,以高粱(Sorghum bicolor L. Moench)为宿主植物,接种Glomus intraradices,在菌丝室施加4 mmol/L的NH4NO3,同时在根室施加不同形式的碳源,通过测定分析不同外源碳条件下ERM、菌根和植物茎叶中的Arg含量和总氮含量,探究外源碳对AM真菌吸收氮源产生Arg的影响。结果显示ERM和菌根中的Arg含量远远高于茎叶中;虽然不同形式外源碳提高了AM真菌的ERM干重和菌根侵染率,但是葡萄糖降低了ERM、菌根和茎叶中的Arg含量,蔗糖和甘油对Arg含量没有显著的影响,只有外源Arg和Gln使ERM中的Arg含量显著增加;不同外源碳对菌根和茎叶的总氮含量没有显著影响,但是施加外源碳能够促进AM真菌的生长。
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全文目录
摘要 5-7 ABSTRACT 7-10 目录 10-13 第一章 文献综述 13-30 1 丛枝菌根真菌简介 13-18 1.1 AM真菌的分类及资源 13-14 1.2 AM真菌的结构与生长发育 14-15 1.3 AM真菌的分离与培养 15-16 1.4 AM真菌与植物矿质营养 16-17 1.5 AM真菌与植物抗逆性 17-18 2 AM真菌吸收同化外源氮产生精氨酸的研究进展 18-23 2.1 AM真菌对不同形态外源氮的吸收同化 18-20 2.2 AM真菌ERM吸收同化外源氮合成Arg 20-21 2.3 Arg在AM真菌中的运转和分解 21-22 2.4 Arg分解产物NH_4~+传递给宿主植物 22-23 3 影响AM真菌氮代谢的因素 23-26 3.1 AM真菌生长状况对其自身氮代谢的影响 23-24 3.2 磷素对AM真菌氮代谢的影响 24-25 3.3 碳素对AM真菌氮代谢的影响 25-26 4 本课题研究目的及意义 26-30 第二章 盆栽条件下培养AM真菌最佳C、N、P浓度的探究 30-41 1 实验材料与试剂 30-32 1.1 实验材料 30-31 1.2 药品与试剂 31-32 2 实验方法 32-35 2.1 育苗和培养阶段 33 2.2 菌根侵染率的测定 33-34 2.3 培养基质中孢子的分离与计数 34 2.4 宿主大葱植株干重量的测定 34-35 3 结果与分析 35-38 3.1 不同浓度的葡萄糖对AM真菌生长繁殖的影响 35-36 3.2 不同浓度的NH_4NO_3对AM真菌生长繁殖的影响 36-37 3.3 不同浓度的KH_2PO_4对AM真菌生长繁殖的影响 37-38 4 讨论 38-41 第三章 AM真菌吸收同化不同外源氮产生精氨酸的研究 41-52 1 实验材料与试剂 41-43 1.1 材料 41-42 1.2 相关试剂 42-43 2. 实验方法 43-46 2.1 育苗和培养阶段 43-44 2.2 菌根侵染率的测定 44 2.3 菌丝室河沙中孢子的分离与计数 44 2.4 ERM干重测定 44 2.5 Arg含量的测定 44-45 2.6 总氮含量测定 45-46 3 结果与分析 46-49 3.1 不同外源氮对AM真菌菌根侵染率、ERM干重和孢子产量的影响 46-47 3.2 不同外源氮对ERM中Arg的影响 47-48 3.3 不同外源氮对菌根中Arg的影响 48 3.4 不同外源氮对茎叶中总氮含量的影响 48-49 4 讨论 49-52 4.1 不同外源氮对菌根侵染、ERM干重和孢子数的影响 49 4.2 不同外源氮对AM真菌产生Arg的影响 49-51 4.3 不同外源氮对宿主植物总氮含量的影响 51-52 第四章 不同种AM真菌吸收同化外源氮产生精氨酸的分析比较 52-61 1 实验材料与试剂 52-54 1.1 材料 52-53 1.2 相关试剂 53-54 2 实验方法 54-55 2.1 育苗和培养阶段 54 2.2 菌根侵染率的测定 54-55 2.3 ERM干重测定 55 2.4 菌丝室河沙中孢子的分离与计数 55 2.5 Arg含量的测定 55 2.6 宿主植物茎叶干重和总氮含量测定 55 3 结果与分析 55-59 3.1 不同种AM真菌的菌根侵染率、ERM干重和孢子量 55-58 3.2 ERM和菌根中的Arg含量 58 3.3 宿主植物茎叶干重及总氮含量 58-59 4 讨论 59-61 第五章 不同外源碳对AM真菌吸收同化外源氮产生精氨酸的影响 61-69 1 实验材料与试剂 61-62 1.1 材料 61-62 1.2 相关试剂 62 2 实验方法 62-64 2.1 育苗和培养阶段 63 2.2 菌根侵染率的测定 63 2.3 ERM干重测定 63 2.4 Arg含量的测定 63-64 2.5 总氮含量测定 64 3 结果与分析 64-66 3.1 不同外源碳对宿主植物和AM真菌生长状况的影响 64 3.2 不同外源碳对ERM、菌根和茎叶中Arg含量的影响 64-66 4 讨论 66-69 4.1 Arg是AM真菌中N运转和储存的载体 66-67 4.2 外源碳对AM真菌产生Arg的影响 67-69 参考文献 69-77 攻读学位期间取得的研究成果 77-78 致谢 78-79
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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 其他化学工业 > 发酵工业 > 发酵法制氨基酸
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