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姬菇258品种鉴定及生物学特性研究
作 者: 王仁锋
导 师: 张小平
学 校: 四川农业大学
专 业: 微生物学
关键词: 国家标准 食用菌品种鉴定 拮抗 RAPD分子标记 生物学特性
分类号: S646
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 30次
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内容摘要
四川省农科院土肥所微生物室于2009年至2011年应用单孢杂交技术以姬菇53和西德33为亲本成功培育出了综合性状优良的杂交菌株258,具有取代四川省主产姬菇品种西德33的潜力。本研究对菌株258进行品种鉴定使其投入生产推广,对推进四川省姬菇产业的发展具有重要的意义,同时研究菌株258的生物学特性、探明其生长条件对生产也起着重要的指导作用。本研究按国家标准《农作物品种审定规范食用菌》的要求用《食用菌菌种区别性鉴定—拮抗反应法》、《食用菌菌种真实性鉴定—RAPD法》所述方法对菌株258进行品种鉴定鉴定,对照菌株为姬菇51、姬菇53、西德33、川姬菇2号;同时以西德33为对照,对菌株258进行区域试验和生产试验,统计菌株258在大规模生产中的丰产性、稳产性等指标;本研究还通过生物学特性试验,研究菌株258与对照菌株在生物学特性上的差异,探明菌株258最适生长条件。试验结果如下:拮抗反应试验表明5个菌株之间均有明显的拮抗现象,可初步断定菌株258与对照菌株为不同的品种。RAPD分子标记试验共筛选出了6个扩增条带清晰、多态性好的引物将5个供试菌株扩增出41条清晰明辨的多态性条带。使用NTSYSpc2.1生物软件对其进行聚类分析、计算遗传距离。聚类分析结果表明,5个菌株的遗传相似变异系数在0.5488到0.7805之间,在相似系数为0.7226时,5个菌株聚为4类:西德33、258、川姬菇2号各为一类,姬菇51和姬菇53聚为一类;菌株258和对照菌株姬菇51、姬菇53、西德33、川姬菇2号的遗传距离分别为0.2428、0.2744、0.4469、0.3311,遗传变异系数较大;表明菌株258与对照菌株为不同的品种,是杂交新菌株。生产试验和区域试验结果表明菌株258在不同的地域条件下及大规模生产中—致性、稳定性好,丰产性高。菌株258平均产量相比对照西德33增产均达到20%以上,产量差异均达到极显著水平,完全能够取代逐渐退化的西德33,具有很高的推广应用价值。菌丝生物学特性试验结果表明菌株258在多数生物学特性方面与对照菌株较为一致,与它们属于同一种属食用菌这一特征相符;同时在最适pH (pH为6)、最适温度(30℃)和碳源选择上,菌株258和对照菌株表现出显著的差异性,间接反映了菌株258与对照之间的遗传差异。生物学特性试验还表明菌株258的最适生长条件为:pH值6,温度30℃,碳源为可溶性淀粉,氮源为蛋白胨。
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全文目录
摘要 4-5 ABSTRACT 5-9 1 文献综述 9-17 1.1 我国食用菌产业现状 9 1.2 姬菇概述 9-11 1.2.1 姬菇、平菇 9-10 1.2.2 姬菇的生物学特性 10-11 1.2.2.1 姬菇的生活史 10 1.2.2.2 姬菇的形态结构 10 1.2.2.3 姬菇的生态习性 10-11 1.2.3 我国姬菇研究现状 11 1.3 食用菌育种 11-13 1.3.1 自然选育 12 1.3.2 杂交育种 12-13 1.3.3 诱变育种 13 1.3.4 分子育种 13 1.4 遗传标记及其在食用菌中的应用 13-14 1.4.1 遗传标记概述 13 1.4.2 遗传标记在食用菌中的应用 13-14 1.5 DNA分子标记在食用菌中的应用 14-16 1.5.1 DNA分子标记概述 14 1.5.2 DNA分子标记在食用菌研究中的应用 14-16 1.5.2.1 RFLP标记 14 1.5.2.2 ITS测序及ITS-RFLP分析 14-15 1.5.2.3 RAPD分子标记 15 1.5.2.4 AFLP分子标记 15 1.5.2.5 SSR分子标记 15-16 1.5.2.6 ISSR标记 16 1.6 食用菌品种鉴定 16-17 1.6.1 食用菌品种保护制度概述 16 1.6.2 食用菌品种鉴定概况 16-17 1.7 选题背景、目的和意义 17 2 材料与方法 17-27 2.1 试验材料 17-20 2.1.1 试验菌株 17-18 2.1.2 培养基配方 18 2.1.3 试验试剂 18-19 2.1.4 试剂配制 19-20 2.2 试验方法 20-27 2.2.1 菌株258真实性鉴定 20-23 2.2.1.1 拮抗 20-21 2.2.1.2 RAPD 21-23 2.2.2 区域试验 23-24 2.2.2.1 材料与方法 23-24 2.2.2.2 试验观察记录 24 2.2.2.3 试验数据分析 24 2.2.3 生产试验 24-25 2.2.3.1 材料与方法 24-25 2.2.3.2 观察记录项目 25 2.2.3.3 试验数据分析 25 2.2.4 生物学特性试验 25-27 2.2.4.1 pH试验 25-26 2.2.4.2 温度试验 26 2.2.4.3 碳源试验 26-27 2.2.4.4 氮源试验 27 2.2.4.5 碳源、氮源组合试验 27 3 结果与分析 27-42 3.1 拮抗反应试验结果 27-29 3.2 RAPD分子标记鉴定结果 29-32 3.3 区域试验结果 32-34 3.3.1 菌株258第一季区试表现 32-33 3.3.1.1 菌株258第一季区试主要性状表现 32 3.3.1.2 菌株258第一季区试与对照西德33的产量比较 32-33 3.3.2 菌株258第二季区试表现 33-34 3.3.2.1 菌株258第二季区试主要性状表现 33 3.3.2.2 姬菇258第二季区试与对照西德33的产量比较 33-34 3.3.3 小结 34 3.4 生产试验结果 34-35 3.4.1 菌株258生产试验的表现 34-35 3.4.2 菌株258生产试验与对照西德33的产量比较 35 3.4.3 小结 35 3.5 生物学特性试验结果 35-42 3.5.1 pH试验结果 35-37 3.5.2 温度试验结果 37-38 3.5.3 碳源试验结果 38-39 3.5.4 氮源试验结果 39-40 3.5.5 碳、氮源组合试验结果 40-42 3.5.6 小结 42 4 讨论 42-43 4.1 食用菌菌种鉴定方法的选择 42-43 4.2 菌株RAPD鉴定结果与生产表现之间的关系 43 4.3 生物学特性实验对生产的指导作用 43 5 结论 43-44 参考文献 44-48 致谢 48-49 攻读学位期间发表的学术论文目录 49
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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 蔬菜园艺 > 菌类(食用菌)
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