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克罗恩病与IL-32的表达及基因多态性的相关性分析

作　者: 曹锴
导　师: 魏文祥；庞智
学　校: 苏州大学
专　业: 药理学
关键词: 克罗恩病 IL-32表达易感基因 CARD15/NOD2 IRGM ATG16L1 NKX2-3 单核苷酸多态性
分类号: R574.62
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:观察促炎性细胞因子IL-32在克罗恩病(Crohn’s disease)患者肠黏膜中的表达情况,研究CARD15、IRGM、ATG16L1、NKX2-3基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNP)位点与中国人克罗恩病易感性的关系,为深入研究克罗恩病的发病机制奠定基础,亦为该病的防治提供实验依据。方法:⑴收集临床确诊的克罗恩病患者(47例)及其健康对照(16名)的组织标本,经病理检验,通过免疫组化以及western blot方法观察IL-32在克罗恩病患者肠黏膜内的表达情况,检验IL-32在克罗恩病患者肠黏膜中的表达与意义。⑵提取克罗恩病患者(32例)和健康对照个体(30名)的外周血,抽提白细胞基因组DNA,检测CARD15_rs2066842、IRGM_rs13361189、ATG16L1_rs2241880以及NKX2-3_ rs10883365的SNP多态性与克罗恩病的关系,根据靶序列片段设计相应的引物,PCR扩增目的片段,经纯化后测序,测序结果分组做统计分析。结果:⑴与对照相比,经免疫组化法和western blot法检测的IL-32在克罗恩病患者肠黏膜中表达上调,二者的表达量有显著性差异(P﹤0.05)。⑵克罗恩病病例组和健康对照组基因频率和基因型频率的组间比较显示: CARD15_rs2066842、IRGM_rs13361189、ATG16L1_rs2241880以及NKX2-3_rs10883365的SNP分布频率的差异均无统计学意义(P﹥0.05)。提示这四个基因多态性位点可能与中国人克罗恩病的易感性无关。结论:⑴IL-32无论在克罗恩病患者还是在健康对照个体的肠黏膜内均有表达,但在克罗恩病患者肠黏膜内IL-32表达上调,研究显示IL-32表达上调能加重克罗恩病的炎症反应。⑵国外研究报道的与高加索人克罗恩病相关的CARD15_rs2066842,IRGM_ rs13361189、ATG16L1_rs2241880以及与日本人克罗恩病易感性的NKX2-3_rs10883365的SNP位点可能与我国克罗恩病患者的易感性无关,这些SNP的变异至多是增加了中国人罹患克罗恩病的风险。

全文目录

中文摘要  4-6
Abstract  6-9
前言  9-13
第一部分 IL-32 在克罗恩病患者肠黏膜中的表达及意义  13-26
  材料与方法  13-20
  结果  20-26
第二部分基因多态性与克罗恩病的相关性分析  26-40
  材料与方法  28-30
  结果  30-40
讨论  40-46
结论  46-47
参考文献  47-53
综述:白细胞介素-32 的生物学特性及其与克罗恩病相关性的研究进展  53-60
攻读学位期间公开发表和待发表的论文  60-61
本论文受以下课题资助  61-62
中英文对照缩略词表  62-63
致谢  63-64

克罗恩病与IL-32的表达及基因多态性的相关性分析

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