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野生哺乳动物寄生线虫的分类学和派氏异尖线虫群体遗传结构分析

作　者: 明珠
导　师: 张路平
学　校: 河北师范大学
专　业: 动物学
关键词: 哺乳动物线虫分类新种派氏异尖线虫群体遗传结构变性梯度凝胶电泳
分类号: Q953
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

本论文实验包括两个部分,第一部分利用光镜和扫描电镜(SEM)技术对几种野生哺乳动物寄生线虫进行了分类鉴定,共描述线虫3种,包括1新种和2新记录种;第二部分基于线粒体DNA(mtDNA)细胞色素c氧化酶第I亚基基因部分序列(pcox1)及烟酰胺脱氢酶(NADH)第I亚基基因部分序列(pnad1),首次应用聚合酶链式反应结合变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)的方法对黄海海域鱼类寄生派氏异尖线虫Anisakis pegreffii群体遗传结构进行了分析。主要结果如下:1.几种野生哺乳动物寄生线虫的分类学研究天津锥尾线虫,新种Subulura (Murisubulura) tanjinensis sp. nov.采自天津蓟县五道眉老鼠Eutamias sibiricus的肠道内,隶属于蛔目Ascaridida,锥尾科Subuluridae。该新种与鼠锥尾亚属Murisubulura其它种相比较,其唇叶结构、副引带存在与否以及尾乳突的数目均与本亚属其它种有明显区别,因此定名为一新种。长颈鹿小单齿线虫Monodontella giraffae Yorke et Maplestone, 1926采自天津动物园长颈鹿Giraffa camelopardalis肝胆管内,隶属于圆线目Strongylata ,钩口科Ancylostomidae。本次所采标本主要特征与原始描述基本相同,但通过扫描电镜首次观察到该种线虫具有窄的侧翼,并对交合刺和生殖锥的详细结构进行了描述;同时对小单齿属Monodontella的分类地位进行了讨论。该种线虫在我国为首次报道,为我国新记录种。凯氏原圆线虫Protostrongylus (Pulmostrongylus) kamenskyi Schulz, 1930采自新疆雪兔Lepus timidus Linnaeus肺内,隶属于圆线目Strongylata,原圆科Protostrongylidae。本实验首次观察到凯氏原圆线虫P. (P.) kamenskyi镰刀形角质化副引带结构,补充了Schulz(1930)的原始描述。该种线虫在我国为首次报道,为我国新记录种。2.黄海鱼类派氏异尖线虫群体遗传结构分析首次利用PCR-DGGE结合序列分析的方法对黄海鱼类派氏异尖线虫A. pegreffii1433个样品的pcox1和pnad1进行了分析,共涉及19个种群(Ga, Ar, Ch, Ha, De, La, Mu, Lu, Au, Ze, Cl, Ps, Tr, Sa, Co, Pn, Lo, Clu, Sc),得到14种单倍型(Hap1-14)。mtDNA pcox1区序列长均为384bp,共有13个多态位点,其中1处颠换和12处转换。相应的pnad1区序列长均为357bp,有9个多态位点,其中2处颠换和7处转换。所有种群共享的Hap1和2个体数量最多(>80%),表明各种群间具有高水平基因交流。利用MEGA4.1软件的邻接法(Neighbor-Joining)聚类分析显示,Hap13单独形成1支,而其它13种单倍型又明显聚类为2支:一支包括Hap2,3,4,5,7,8,9,10,14;另一支包括Hap1,6,11,12。Arlequin3.1软件计算显示19个种群核苷酸组成基本一致(G+C<A+T)。分子方差分析(AMOVA)计算派氏异尖线虫A. pegreffii种群间的遗传分化系数Fst = 0.00904(P<0.05),种群内个体间遗传变异明显大于种群间遗传变异,说明黄海派氏异尖线虫种群内部遗传多态性较高。Ga与Au, Ps;Mu与Au, Ps的遗传分化系数Fst值在0.16369-0.20464之间,并且Fst的P检验都表现显著差异(P<0.05),表明Ga与Au, Ps;Mu与Au, Ps的遗传分化程度较高。大部分种群间的遗传分化系数处于0-0.15之间,表明这些种群间仅有较弱或中等程度的分化。还有一些种群间遗传分化系数为负数,并且Fst的P检验没有出现显著差异(P>0.05),表明这些种群间没有遗传分化。总体结果表明,黄海派氏异尖线虫19个种群之间遗传分化程度不高,可推断出黄海派氏异尖线虫不存在宿主特异性。

野生哺乳动物寄生线虫的分类学和派氏异尖线虫群体遗传结构分析

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