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贪食迈阿密虫的生物学特性研究
作 者: 林妙春
导 师: 汪彦愔
学 校: 福建师范大学
专 业: 动物学
关键词: 贪食迈阿密虫 种群密度 自然增长率 世代时间 ITS-5.8S 分子系统发育
分类号: S917.4
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 9次
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内容摘要
目的本论文研究对福州地区养殖牙鲆(Paralichthys olivaceus)感染贪食迈阿密虫(Miamiensis avidus)病害情况进行调查及虫种鉴定,建立了贪食迈阿密虫的实验室培养及传代方法,了解环境因子对其种群密度的影响,首次从基因水平探究其分子发育系统,为海水养殖中贪食迈阿密虫病的预防和治疗的进一步研究奠定基础。并能为盾纤毛虫病的防治提供科学理论依据。方法(1)在2008年4月—2008年8月期间按常规鱼病调查方法调查福州周边地区的海水养殖鱼类寄生虫病危害情况;对病灶处分离的病原体进行活体和标本染色后观察,并根据其形态学特征进行虫种鉴定。(2)采用海水纤毛虫实验室培养方法,运用实验生态学的方法研究不同营养、温度、盐度及pH值对贪食迈阿密虫种群密度及自然增长率的影响。(3)测定贪食迈阿密虫ITS-5.8S基因序列,运用PHYLIP 3.66软件及MEGA 3.1软件的邻接法NJ及MEGA3.1软件的除权配对法UPGMA构建系统发育树。结果(1)所采集病灶处的病原体经过鉴定确定为贪食迈阿密虫,这在福建省是首次报道,该病在福州地区海水养殖牙鲆中流行情况较严重,鱼体感染后死亡率达60%~70%。(2)米粒浸出液及酵母膏培养液最适合贪食迈阿密虫生长,水温25℃,盐度40%。及pH 6.0为贪食迈阿密虫最适生存环境,因此可通过降低水温,盐度及pH防治贪食迈阿密虫病。(3)获得516bp的ITS-5.8S序列,填补了GenBank中贪食迈阿密虫ITS-5.8S序列的缺失;三种方法所做出的系统发育树中,贪食迈阿密虫均与长拟尾丝虫亲缘关系最近。
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全文目录
中文摘要 2-3 Abstract 3-4 中文文摘 4-6 目录 6-9 绪论 9-15 1 我国水产养殖中的寄生虫病害问题严重 9-10 2 海洋病害纤毛虫的种类 10-11 3 海洋纤毛虫的流行病学特征 11 4 海洋纤毛虫的研究方向 11-13 4.1 形态分类学研究 11-12 4.2 实验生态学研究 12 4.3 细胞发生学研究 12 4.4 分子系统学研究 12-13 4.5 分子免疫学研究 13 5 发展趋势 13-14 6 本实验的研究内容及意义 14-15 第一章 贪食迈阿密虫病的危害及病原鉴定 15-25 1.1 贪食迈阿密虫的危害情况调查 15-18 1.1.1 调查对象及方法 16 1.1.2 鱼病检查 16 1.1.2.1 体外检查 16 1.1.2.2 体内检查 16 1.1.3 检查结果与讨论 16-18 1.1.3.1 患病鱼的病症 16-17 1.1.3.2 调查结果讨论 17-18 1.2 病原鉴定 18-25 1.2.1 材料与方法 18-20 1.2.1.1 材料 18-19 1.2.1.2 实验方法 19-20 1.2.2 结果 20-22 1.2.2.1 活体观察 20 1.2.2.2 染色观察 20-21 1.2.2.3 病原体鉴定结果 21-22 1.2.3 讨论 22-25 第二章 四种环境因素对贪食迈阿密虫种群密度的影响 25-39 2.1 材料与方法 25-27 2.1.1 实验材料 25 2.1.2 实验方法 25-26 2.1.2.1 贪食迈阿密虫的纯化培养 25 2.1.2.2 培养液配制 25-26 2.1.2.3 分组设置 26 2.1.3 数据处理 26-27 2.2 结果 27-36 2.2.1 不同培养液对贪食迈阿密虫生长的影响 27-29 2.2.2 温度对贪食迈阿密虫生长的影响 29-31 2.2.3 盐度对贪食迈阿密虫生长的影响及不同盐度下虫体形态学的比较 31-34 2.2.3.1 盐度对贪食迈阿密虫生长的影响 31-32 2.2.3.2 不同盐度下贪食迈阿密虫形态学比较 32-34 2.2.4 pH值对贪食迈阿密虫生长的影响 34-36 2.3 讨论 36-38 2.3.1 不同培养液对贪食迈阿密虫生长的影响 36 2.3.2 温度对贪食迈阿密虫的影响 36-37 2.3.3 盐度对贪食迈阿密虫的影响 37 2.3.4 pH值对贪食迈阿密虫的影响 37-38 2.4 结论 38-39 第三章 基于ITS-5.8S的分子系统发育研究 39-55 3.1 实验材料 40 3.1.1 材料 40 3.1.2 主要仪器和试剂 40 3.2 实验方法 40-43 3.2.1 总DNA的提取 40-41 3.2.2 PCR扩增 41-43 3.2.2.1 引物 41 3.2.2.2 PCR反应体系 41 3.2.2.3 PCR扩增程序 41 3.2.2.4 扩增产物的凝胶电泳 41-42 3.2.2.5 目的DNA的纯化回收 42 3.2.2.6 序列分析 42-43 3.3 结果 43-52 3.3.1 PCR扩增结果 43 3.3.2 测序结果 43-44 3.3.3 序列分析 44-49 3.3.4 系统发育树的构建 49-52 3.4 讨论 52-55 第四章 结论 55-57 参考文献 57-63 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 63-65 致谢 65-67 个人简历 67
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中图分类: > 农业科学 > 水产、渔业 > 水产基础科学 > 水产生物学 > 水产动物学
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