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护骨素和Wnt3a、Wnt5a在口腔正畸骨改建中的表达

作　者: 徐阳
导　师: 秦明群
学　校: 桂林医学院
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 护骨素 Wnt3a Wnt5a 正畸骨改建
分类号: R783.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：护骨素与临床口腔正畸骨改建有着密切关系,Wnt3a、Wnt5a与成骨相关,但在口腔正畸骨改建方面未见报道。通过建立大鼠正畸牙移动模型,研究大鼠磨牙移动过程中护骨素(?)(?)Wnt3a、Wnt5a在牙周组织中的表达及其对临床的指导意义。方法：共采用72只健康雄性Wistar大鼠,随机分为12笼,每笼6只。先腹腔注射麻醉大鼠,用水合氯醛按照体积分数的10%为350～400mg/kg。待鼠进入麻醉状态后,给大鼠上正畸装置。在Ni-Ti牵引弹簧的两端分别系以双丝,一端拴结于左侧第一磨牙上,另一端拴结于同侧上切牙,牵引力为50g。设每只大鼠右侧作为空白对照。分别在加力第1d,3d,5d,7d,10d,14d各处死12只大鼠,36只用于免疫组织化学研究,36只用于RT-PCR,检测目的因子分别在蛋白和分子水平的表达。结果：①HE染色显示,随着加力时间的递增,组织形态发生变化：正畸加力3d组中呈现压力侧牙周膜靠近牙槽骨处出现破骨细胞,牙周膜腔隙变窄；在加力第7d组,于压力侧的牙周膜腔进一步变窄,牙槽骨边缘出现骨吸收陷窝如蚕蚀状,陷窝内出现单核或多核破骨细胞。②免疫组织化学染色显示OPG、Wnt3a.Wnt5a目的蛋白均呈阳性表达。阳性细胞主要定位于胞浆,呈棕黄色。OPG阳性细胞表达主要集中于压力侧的骨形成部位--第一磨牙近中压力侧牙周膜细胞及牙槽骨的成骨细胞内。在牙齿移动第1天时,压力侧OPG表达与空白对照侧比较无差异,均呈弱阳性表达；牙齿移动3天时,大鼠压力侧OPG表达增强；牙齿移动5天、7天、10天时大鼠压力侧OPG表达均呈强阳性,尤其是第7天；牙齿移动14天时,OPG表达减弱。Wnt3a(?)(?)Wnt5a阳性细胞表达部位不集中,散在的分布于牙周膜细胞和牙槽骨的成骨细胞内。阳性细胞表达与时间无线性关系。③OPG.Wnt3a.Wnt5a在RT-PCR中出现目的条带,与免疫组化的结果相符。结论：在口腔正畸过程中,OPG参与了正畸牙周组织改建的过程,OPG在正畸牙齿压力侧的表达具有时间依赖性,这为正畸治疗上对牙齿移动速度及牙槽骨改建方面的控制,都提供了一个很好的切入点。Wnt3a和Wnt5a于正畸牙齿压力侧在蛋白和分子水平也均有表达,但与加力时间长短无明显相关关系。Wnt信号通路通过对成骨细胞和破骨细胞功能的调节来作用于骨改建的过程。护骨素、破骨细胞分化因子系统直接参与骨代谢的调节,正畸牙周组织改建是以牙槽骨的交替吸收和增生为其生物学基础,因此护骨素(?)(?)Wnt3a.Wnt5a的表达可能是导致正畸特点的分子机制之一,有可能为正畸治疗提供新的研究方向。

全文目录

中文摘要  4-6
ABSTRACT  6-8
英汉缩略词对照表  8-9
前言  9-11
1 材料与方法  11-16
  1.1 主要实验材料与仪器  11
  1.2 实验试剂  11
  1.3 实验仪器  11-12
  1.4 试验方法  12-15
  1.5 统计方法  15-16
2 结果  16-23
  2.1 HE染色  16
  2.2 免疫组化染色  16-18
  2.3 不同加力时间压力侧OPG、Wnt3a、Wnt5a阳性细胞数  18-19
  2.4 OPG和Wnt3a,Wnt5a mRNA的表达  19-21
  2.5 OPG, Wnt3a和Wnt5a mRNA的表达指数  21-23
3 讨论  23-26
4 结论  26-27
参考文献  27-30
综述  30-36
  参考文献  34-36
攻读学位期间发表的学术论文目录  36-37
致谢  37

护骨素和Wnt3a、Wnt5a在口腔正畸骨改建中的表达

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