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调节性T细胞输注移植对脑梗死大鼠的保护作用及抗炎机制

作　者: 周国庆
导　师: 孙保亮
学　校: 泰山医学院
专　业: 神经病学
关键词: 脑梗死 调节性T细胞 输注移植 免疫调节 神经保护 炎性因子
分类号: R743.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的1.探讨CD4~+CD25~+调节性T细胞（regulatory T cells）静脉输注移植对大鼠脑梗死的免疫调节脑保护作用。2.研究CD4~+CD25~+调节性T细胞输注移植后脑梗死大鼠血浆炎性细胞因子的变化，以及对中枢炎性细胞浸润的影响，并探讨CD4~+CD25~+调节性T细胞在脑梗死炎症反应发生发展中的作用机制。方法1.免疫磁珠两步法提取健康成年Sprague-Dawley（SD）大鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞。线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型，缺血2h再灌注。将健康成年雄性SD大鼠随机分为正常组，假手术对照组，脑梗死组，脑梗死组分为静脉输注PBS治疗组，静脉输注脾细胞（spleen cells,SP）治疗组和静脉输注调节性T细胞（Tregs）治疗组。分别于术后24h和72h对各组进行神经行为学评价,并在72h进行TTC染色，计算机图像分析系统测量脑梗死体积。2.选用健康成年雄性SD大鼠，线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型，缺血2h再灌注。将动物随机分为正常组，假手术对照组，脑梗死组，脑梗死组分为静脉输注PBS治疗组，静脉输注脾细胞治疗组和静脉输注调节性T细胞治疗组三个亚组。各组动物于治疗72h后断头取脑制备脑组织石蜡切片，免疫组织化学方法染色检测中性粒细胞在脑组织中的分布。生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定血浆细胞粘附分子ICAM-1和炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-10、 TNF-α、IFN-γ、TGF-β表达水平的变化。结果1.除正常组、假手术对照组外，其余各组动物均于术后出现不同程度的神经功能缺损，尤以脑梗死后静脉输注PBS治疗组和脑梗死后静脉输注脾细胞治疗组最为严重，脑梗死后静脉输注调节性T细胞治疗组显著减轻。Tregs组24h,72h Zea Longa评分都显著低于PBS和脾细胞组（P＜0.01）。24h,72h前肢放置实验Tregs组与前两组比较都显著减小（P＜0.01）。24h,72h NSS评分Tregs组也显著低于PBS和脾细胞组（P＜0.01）。脑梗死后72h梗死体积百分比Tregs组（27.13%）显著低于PBS（42.82%）和脾细胞组（40.85%），具有显著差异（P＜0.001）。2.与正常对照组和假手术组相比，脑梗死组粘附分子ICAM-1和促炎性细胞因子明显升高（P＜0.05）；调节性T细胞治疗组与PBS治疗组和脾细胞治疗组比较，血浆促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ的水平显著降低（P＜0.001），抗炎性细胞因子IL-10和TGF-β调节性T细胞治疗组与PBS治疗组和脾细胞治疗组相比显著降低（P＜0.001）。调节性T细胞治疗组细胞粘附分子ICAM-1和中枢中性粒细胞浸润与PBS治疗组和脾细胞治疗组相比显著降低，具有显著统计学意义（P＜0.01）。结论1. CD4~+CD25~+调节性T细胞静脉输注移植显著减小大鼠脑梗死体积并促进神经功能恢复。2. CD4~+CD25~+调节性T细胞输注移植能够降低脑梗死大鼠血浆细胞粘附分子ICAM-1和炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ的水平，并减轻中枢中性粒细胞浸润。

全文目录


中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
符号说明  9-10
前言  10-12
第一部分 CD4~+CD25~+调节性 T 细胞输注移植对脑梗死大鼠的免疫调节脑保护作用  12-36
  前言  14-16
  材料与方法  16-22
  结果  22-25
  讨论  25-30
  结论  30-31
  附图  31-34
  参考文献  34-36
第二部分 CD4~+CD25~+调节性 T 细胞输注移植对脑梗死大鼠外周炎性因子表达的影响  36-62
  前言  38-40
  材料与方法  40-44
  结果  44-46
  讨论  46-51
  结论  51-52
  附图  52-56
  参考文献  56-62
参考文献  62-65
综述  65-73
  参考文献  70-73
致谢  73-74
攻读学位期间发表的学术论文  74

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中图分类: > 医药、卫生 > 神经病学与精神病学 > 神经病学 > 脑血管疾病 > 急性脑血管疾病（中风）
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