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盐酸右美托咪啶对大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BK_(Ca)通道的影响

作　者: 曾东
导　师: 周述芝; 魏继承
学　校: 泸州医学院
专　业: 麻醉学
关键词: 盐酸右美托咪啶 大电导钙激活钾通道 膜片钳技术 肠系膜动脉平滑肌细胞
分类号: R614
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的盐酸右美托咪啶通过激动人体广泛分布的α2肾上腺素能受体产生镇静、镇痛、抗焦虑等作用，广泛应用于临床麻醉及重症监护治疗。持续输注盐酸右美托咪啶可能引起显著的低血压、心动过缓等心血管系统不良反应，这些不良反应的确切机制目前并不完全清楚。大电导钙激活钾通道(Large-conductance Ca2+-activated potassium channel，BKCa)广泛存在于血管平滑肌细胞，在调节血管舒缩过程中起着重要作用。有关盐酸右美托咪啶的心血管不良反应是否与对BKCa的作用有关，尚未见有研究报道。本实验应用膜片钳单通道电流记录技术，观察不同浓度盐酸右美托咪啶对大鼠肠系膜动脉平滑肌（mesenteric arterial smooth muscle，MASM）细胞BKCa通道的影响，以探讨右美托咪啶引起低血压的可能机制。方法解剖分离SD大鼠肠系膜动脉血管，在手术显微镜下仔细剔除周围脂肪和结缔组织，经急性酶分离后获得单个平滑肌细胞。将所得平滑肌细胞置于对称性高钾（[K+]+0:[K+]i=140:140mM）溶液中，使用膜片钳技术记录在+40mV去极化电压条件下，不同浓度盐酸右美托咪啶(0,10-9,10-8,10-7,10-6,10-5M)在无钙和钙离子浓度为10-7mol/L浴液中单通道内面向外式膜片（inside-out patch）上的电流。所得电流通过膜片钳放大器（CEZ-2200）后输入计算机，用Pclamp（10.1）软件系统进行数据采集及分析通道开放概率（Open Probability, Po），电流幅度值（Amplitude,Amp），平均开放时间（mean open Time, To）和平均关闭时间（mean close Time,Tc）。结果1.在对称性高钾溶液中，内面向外式膜片上，记录到的大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa通道电导值为216.38±5.92pS （n=8），通道具有电压依赖性和钙敏感性，48mM的四乙胺（TEA）几乎能完全阻断通道活动。2.在对称性高钾、无钙溶液中，内面向外式膜片上，各浓度组盐酸右美托咪啶均未引起通道Po、Amp、To及Tc的改变。3.在对称性高钾、钙离子浓度为10-7mM溶液中，内面向外式膜片上，与对照组（盐酸右美托咪啶=0M）比较，胞内盐酸右美托咪啶为10-9、10-8M时并未引起BKCa通道开放概率的增加，但已明显缩短通道平均关闭时间（p<0.01）。随着胞内盐酸右美托咪啶浓度的进一步增加(10-7～10-5M)，除通道平均关闭时间明显缩短外，BKCa通道开放概率也相应增加，且呈现浓度依赖性。4.各个浓度下通道平均开放时间均无变化（p>0.05），对通道电流幅度值亦无影响（p>0.05）。结论在单通道内面向外式膜片上，盐酸右美托咪啶能够直接激活大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa通道，且呈现浓度依赖性。盐酸右美托咪啶的降压作用可能与激活动脉平滑肌细胞BKCa通道有关。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-9
前言  9-11
材料与方法  11-16
结果  16-21
讨论  21-24
本实验的不足之处  24-25
结论  25-26
参考文献  26-31
英汉缩略词对照表  31-32
致谢  32-33
IP3 R、钙激活钾通道与气道平滑肌舒缩功能（综述）  33-42
  参考文献  39-42

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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 外科手术学 > 麻醉学
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