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IGT患者维生素D、VDR基因FokI多态性与胰岛素抵抗的相关性研究

作　者: 侯离君
导　师: 亓文波
学　校: 泰山医学院
专　业: 内科学
关键词: IGT 胰岛素抵抗 25-OH-VD3 维生素D受体基因多态性 酶联免疫吸附试验（ELISA） 聚合酶链反应
分类号: R587.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的本实验为了观察泰安及周边地区汉族人群中是否存在VDR基因FokI等位基因多态性，检测IGT人群血清25-OH-VD3水平及VDR基因FokI等位基因多态性，并探讨IGT人群血清25-OH-VD3水平与胰岛素抵抗的关系，维生素D受体基因FokI多态性与胰岛素抵抗相关性以及了解维生素D在IGT发生中的作用和意义。本实验从分子生物学角度探索IGT的发病机制,为深入研究IGT的发病机制、为临床研究及预防IGT发展为2型糖尿病提供一定的科学理论指导。对象与方法采用病例-对照研究方法,在泰安中心医院就诊的患者中随机选取无亲缘关系的汉族IGT患者94例、单位及社区健康人54例作为研究对象。运用多聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RLFP）技术方法检测维生素D受体基因FokI多态性，对所有样本进行全血DNA提取，PCR扩增VDR基因，VDR基因FokI限制性内切酶酶切扩增产物，在凝胶成像系统下检测基因型，计算并比较IGT患者和正常对照组基因型频率、等位基因分布频率；同时测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)，计算稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR），以HOMA-IR评价机体的胰岛素抵抗程度；应用25-OH-VD3ELISA试剂盒测定以上所有样本的血清25-OH-VD3的水平，最后分析两组临床资料，用Pearson相关分析25-OH-VD3与HOMA-IR的关系,试图通过等位基因分布频率、血清25-OH-VD3水平及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等指标来阐明IGT患者的维生素D水平、维生素D受体基因FokI多态性与胰岛素抵抗状况。所有数据以SPSS13.0软件进行统计分析。结果1.血清25-OH-VD3水平<30ng/ml者占全部观察对象的63.8%；IGT组与健康对照组相比，血清25-OH-VD3水平低(22.05±2.37vs32.04±2.64ng/ml) P<0.05，差异有统计学意义；作Pearson相关分析示血清25-OH-VD3水平与HOMA-IR呈负相关（r=-0.813P<0.01）、与BMI呈负相关（r=-0.324P=0.026）、与WL呈负相关（r=-0.440P=0.002）。IGT组与健康对照组相比，BMI增高（26.07±2.50vs22.82±1.59kg/m2）、FINS水平增高(16.32±7.29vs8.11±4.06uIu/ml）、 HOMA-IR增高（4.14±1.88vs2.04±1.07)、TG增高（1.93±0.18vs1.47±0.21）、TC增高（5.46±0.72vs5.25±0.31）、LDL-C增高（3.14±0.94vs2.84±0.24）、PBG增高（8.99±0.85vs7.36±0.23）、HbA1c增高（5.89±0.35vs5.04±0.32）P<0.05，差异有统计学意义。2.本试验样本VDR FokI位点基因型符合Hardy-Weinberg遗传平衡。VDR基因FokI多态性在IGT组及健康对照组中均能检测到，采用PCR-RFLP技术检测泰安及周边地区汉族人群VDR基因FokI多态性，共检出VDR FokI位点三种基因型分别为FF、 Ff、 ff。 IGT组与正常对照组相比,“f”等位基因频率升高(46.8%vs25.9%P<0.05),"FF、Ff、ff "基因型频率同正常对照组相比（FF:30.9%vs57.4%;Ff:46.9%vs33.3%; ff:22.3%vs9.3%) P<0.05，差异有统计学意义。用优势比OR值计算FokI基因型在IGT患者中的患病相对危险度，发现携带Ff基因型个体发生IGT的危险性是FF基因型个体的2.613倍（OR=2.613,95%CI=1.239-5.512,P=0.018），携带ff基因型的个体患IGT的风险是FF基因型个体的4.49倍，（OR=4.49，95%CI=1.496-13.473,P=0.01），携带“f”等位基因型患IGT的危险性增加，是携带“F”等位基因型人群IGT的发病风险的2.465倍（OR=2.465，95%CI=1.188-5.116,,P=0.023）；Ff、ff基因型与FF型相比HOMA-IR高（3.91±0.46、7.05±2.37vs2.46±0.37） P<0.05差异有统计学意义；VDR基因FokI位点ff基因型患者较其它两组胰岛素抵抗更加明显(P<0.01)。结论：1.维生素D不足在人群中较为普遍。2.血清25-OH-VD3水平与胰岛素抵抗呈负相关。3.VDR基因FokI多态性在泰安及周边地区汉族人群中存在，VDR基因FokI可能是泰安及周边地区汉族人群IGT的易感基因。VDR基因FokI位点f等位基因与胰岛素抵抗明显相关，说明维生素D及维生素D受体基因FokI多态性可能对IGT人群的胰岛素抵抗起一定的作用, VDR基因FokI位点携带“f”等位基因者更易发生胰岛素抵抗。

全文目录


中文摘要  4-7
ABSTRACT  7-9
符号说明  9-10
前言  10-12
材料与方法  12-22
结果  22-27
讨论  27-33
结论  33-34
附图  34-36
参考文献  36-40
综述  40-50
  参考文献  46-50
致谢  50-51
攻读学位期间发表的学术论文  51

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 内分泌腺疾病及代谢病 > 胰岛疾病 > 糖尿病
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