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重组人生长激素对阻塞性黄疸大鼠肠黏膜紧密连接蛋白zo-1及PMLC的影响

作　者: 康喜万
导　师: 李哲浩
学　校: 延边大学
专　业: 外科学
关键词: 阻塞性黄疸 紧密连接蛋白zo-1 磷酸化肌球蛋白轻链(PMLC) 肠黏膜 通透性 肠上皮细胞 重组人生长激素
分类号: R575
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的：探讨重组人生长激素(recombinant human growthhormone, rhGH)干预下阻塞性黄疸大鼠肠黏膜紧密连接蛋白(tight junction associated protin, TJP)zo-1的变化及肌球蛋白轻链(myosinlight chain, MLC)磷酸化水平的研究。方法：将70只wistar清洁级大鼠(雌雄不限)随机分为：一.假手术(sham operation, SO)对照模型组,7天组,n=10。二.阻塞性黄疸(obstructive jaundice,OJ)模型组,7天组,n=12,14天组,n=13。三.阻塞性黄疸重组人生长激素(recombinant human growthhormone, rhGH)治疗模型组,7天组,n=12,14天组,n=13。四.假手术重组人生长激素治疗组(GSO),7天,n=10.假手术组及假手术重组人生长激素治疗组模型单纯游离胆总管但不予以阻断,阻塞性黄疸重组人生长激素组及阻塞性黄疸组胆总管游离后用3.0丝线结扎,制成阻塞性黄疸模型。术后第一天开始每日阻塞性黄疸重组人生长激素治疗组及假手术重组人生长激素治疗组给予注射重组人生长激素(0.75iu/kg)。分别于术后第7天及第14天两侧结扎末端回肠3cm(不损伤结扎段回肠动静脉弓),结扎段肠腔内注射异硫氰酸荧光素-葡聚糖(FITC-Dextran),半小时后采集门静脉血、心尖血、取回肠末端小肠组织。门静脉血液用分光光度法检测异硫氰酸荧光素-葡聚糖吸收强度衡量肠黏膜通透性。心尖血液检测肝功能。小肠组织HE染色后观察黏膜病理形态学改变,免疫组织化学方法检测肠黏膜紧密连接蛋白zo-1及磷酸化的肌球蛋白轻链含量。结果：1)rhGH组及OJ组与SO组相比,血清中胆红素及谷丙转氨酶增高(P<0.05).OJ组及rhGH组大鼠血清中胆红素及谷丙转氨酶值随着梗阻时间的延长而逐渐增高(P>0.05).rhGH组与OJ组相比,大鼠血清中胆红素及谷丙转氨酶值无明显差异(P>0.05)。2)rhGH组及OJ组与SO组相比,肠黏膜形态学观察损伤程度较重(P<0.01)；且随梗阻时间延长肠黏膜损伤加重(P<0.05)；梗阻7天后治疗组肠黏膜损伤程度较轻(P<0.05)；梗阻14天后治疗组肠黏膜损伤程度较轻(P<0.01)。梗阻后治疗14天组肠黏膜损伤程度比治疗7天组有所减轻,但无明显差异性(P>0.05)。3)rhGH组、OJ组门静脉血异硫氰酸荧光素-葡聚糖吸收强度高于SO组(P<0.05),梗阻7天组较梗阻14天组FITC-dextran吸收值增高(P<0.05)。rhGH组与OJ组比较门静脉血异硫氰酸荧光素-葡聚糖吸收强度明显降低(P<0.05)。4)rhGH组及OJ组于SO组相比,肠黏膜紧密连接蛋白zo-1的表达水平明显降低(P<0.01)。rhGH组与OJ组相比,肠黏膜紧密连接蛋白zo-1的表达水平升高(P<0.01)。；梗阻后治疗14天组肠黏膜损伤程度比治疗7天组有所降低,但无明显差异性(P>0.05)。梗阻14天组肠黏膜紧密连接蛋白zo-1的表达比梗阻7天组降低(P<0.05)。5)rhGH组及OJ组与S0组相比,肠黏膜肌球蛋白轻链磷酸化的水平降低(P<0.01)；rhGH组肠黏膜肌球蛋白轻链的磷酸化水平比OJ组降低(P<0.01)；治疗14天组肠黏膜膜肌球蛋白轻链的磷酸化水平比治疗7天组有所升高,但无明显差异性(P>0.05)；阻黄14天组肠黏膜肌球蛋白轻链磷酸化的水平比阻黄7天组升高(P<0.05)。结论：梗阻性黄疸大鼠在给予重组人生长激素治疗后肠黏膜紧密连接蛋白Zo-1的表达升高而降低肌球蛋白轻链的磷酸化水平来减轻肠粘膜的损伤,降低肠黏膜的通透性,维护肠道黏膜的正常屏障功能。

全文目录


摘要  5-7
Abstract  7-10
英文缩略词表  10-11
第一章 前言  11-13
第二章 材料与方法  13-16
  2.1 实验动物  13
  2.2 实验仪器  13
  2.3 药物和试剂  13-14
  2.4 实验方法  14-15
    2.4.1 实验动物分组  14
    2.4.2 动物模型制备  14
    2.4.3 检测指标及方法  14-15
  2.5 统计学处理  15-16
第三章 结果  16-30
  3.1 大鼠一般状态观察  16
  3.2 血清胆红素、谷丙转氨酶浓度的变化  16-17
  3.3 FITC-Dextran吸收强度  17
  3.4 病理形态变化  17-22
  3.5 TJPZO-1免疫组化检测及光镜下定性分析结果  22-26
  3.6 PMLC免疫组化检测及光镜下定性分析结果  26-30
第四章 讨论  30-32
结论  32-33
致谢  33-34
参考文献  34-36
综述  36-44
  参考文献  42-44

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 消化系及腹部疾病 > 肝及胆疾病
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