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小型猪特异性麻醉颉颃剂对麻醉大鼠不同脑区单胺类神经递质和内阿片肽的影响

作　者: 姜胜
导　师: 王洪斌
学　校: 东北农业大学
专　业: 临床兽医学
关键词: 去甲肾上腺素多巴胺五羟色胺内阿片肽 XFM 小型猪颉颃
分类号: S859.79
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

依据平衡麻醉原理和小型猪生理特点研制成功了小型猪复合麻醉制剂(简称XFM),为了保证XFM麻醉的可控性,及麻醉后快速苏醒,本课题组通过正交试验和最佳组方筛选试验,成功研制出小型猪特异性麻醉颉颃剂。本研究在已完成小型猪特异性麻醉颉颃剂催醒信号转导机制以及血流动力学研究的基础上,进一步从神经递质角度研究其催醒作用机制。本实验以SD大鼠实验动物模型,以小型猪特异性麻醉颉颃剂为受试药物,使用XFM腹腔注射麻醉SD大鼠后,与早期(麻醉后10min)、中期(麻醉后30min)、晚期(麻醉后60min)腹腔注射小型猪特异性麻醉颉颃剂,采集大鼠脑组织样品,分别采用高效液相色谱法和ELISA方法检测大鼠不同脑区单胺类神经递质和内阿片肽的含量变化,从神经递质方面探讨小型猪特异性麻醉颉颃剂可能的催醒机制,实验结果如下：1.XFM腹腔注射麻醉大鼠后,腹腔注射小型猪特异性麻醉颉颃剂进行催醒,大鼠各脑区内去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)翻正反射恢复即刻含量升高,直线爬行时含量降低,催醒组高于对照组；脑内5-羟色胺(5-HT)含量降低。2.腹腔注射小型猪特异性麻醉颉颃剂,催醒XFM麻醉大鼠,催醒组脑内内阿片肽含量降低,催醒组海马、丘脑、脑干内p-EP含量显著低于对照组,大脑皮层内β-EP含量则无显著性差异；亮氨酸脑啡肽(L-ENK)、蛋氨酸脑啡肽(M-ENK)、强啡肽(DYN)催醒试验组含量低于对照组。3.反相高效液相色潜法检测大鼠不同脑区三种单胺类神经递质,方法简单,灵敏度高,日内和目间变异系数均低于5%,回收率较高,分别为94.75%、92.66%、92.50%。表明,大鼠催醒过程中,各脑区的NE、DA含量变化呈现升高趋势,说明小型猪特异性麻醉颉颃剂引起大鼠各脑区NE、DA含量的升高,揭示了NE、DA参与了小型猪特异性麻醉颉颃剂的催醒过程,并在催醒过程中恢复兴奋性冲动的神经传递,保证了小型猪特异性麻醉颉颃剂能较好的逆转XFM的麻醉作用,达到或加快大鼠的催醒；注射小型猪特异性麻醉颉颃剂后,脑中5-HT含量出现降低,脑中5-HT、DA的变化趋势与大鼠苏醒时的行为学变化结果吻合,说明5-HT、DA在催醒的过程中发挥了作用,脑内5-HT含量的减少,降低其对中枢神经系统的抑制作用,这可能是小型猪特异性麻醉颉颃剂催醒的作用机理之一；大鼠麻醉后不同时期注射小型猪特异性麻醉颉颃剂后,大鼠各脑区内的L-ENK、M-ENK、DYN、β-EP含量降低,依据内啡肽的主要生理作用,L-ENK、M-ENK、DYN的降低可能与镇痛消失有关,而β-EP含量降低,可能是由于小型猪特异性麻醉颉颃剂竞争性抑制阿片样物质与受体结合,使中枢神经系统中β-EP释放,引起脑内β-内啡呔含量减少,从而解除内啡肽对中枢神经的抑制,促进或加快苏醒,这可能是小型猪特异性麻醉颉颃剂催醒的作用机制之一。

全文目录

摘要  8-9
Abstract  9-11
1 引言  11-19
  1.1 麻醉概述  11-12
  1.2 神经递质概述及分类  12-13
  1.3 麻醉对中枢神经递质的影响  13-15
    1.3.1 麻醉对传统神经递质的影响  13-14
    1.3.2 麻醉对单胺类神经递质的影响  14
    1.3.3 麻醉对内源性阿片肽的影响  14-15
  1.4 动物麻醉颉颃剂对中枢神经递质的影响  15-17
    1.4.1 动物麻醉颉颃剂的分类  15
    1.4.2 特异性麻醉颉颃剂对中枢神经递质的影响  15-16
    1.4.3 非特异性麻醉颉颃剂对中枢神经递质的影响  16-17
  1.5 研究目的及意义  17-19
2 材料和方法  19-24
  2.1 实验材料  19-20
    2.1.1 实验动物  19
    2.1.2 试验仪器  19
    2.1.3 试验药品和试剂  19-20
  2.2 试验方法  20-23
    2.2.1 大鼠不同脑区内源性阿片肽的检测  20-21
    2.2.2 RP-HPLC检测单胺类神经递质方法的建立  21-22
    2.2.3 大鼠不同脑区单胺类神经递质的检测方法  22-23
  2.3 数据统计分析方法  23-24
3 结果  24-37
  3.1 大鼠不同脑区单胺类神经递质含量的测定结果  24-31
    3.1.1 RP-HPLC荧光法检测单胺类神经递质的标准品色谱图  24-25
    3.1.2 标准曲线的绘制  25
    3.1.3 精密度试验结果  25
    3.1.4 回收率试验结果  25-26
    3.1.5 小型猪特异性麻醉颉颃剂对大鼠不同脑区NE含量的影响  26-28
    3.1.6 小型猪特异性麻醉颉颃剂对大鼠不同脑区DA含量的影响  28-29
    3.1.7 小型猪特异性麻醉颉颃剂对大鼠不同脑区5-HT含量的影响  29-31
  3.2 大鼠不同脑区内阿片肽含量变化试验结果  31-37
    3.2.1 小型猪特异性麻醉颉颃剂对大鼠不同脑区L-ENK含量的影响  31-32
    3.2.2 小型猪特异性麻醉颉颃剂对大鼠不同脑区M-ENK含量的影响  32-34
    3.2.3 小型猪特异性麻醉颉颃剂对大鼠不同脑区β-EP含量的影响  34-35
    3.2.4 小型猪特异性麻醉颉颃剂对大鼠不同脑区DYN含量的影响  35-37
4 讨论  37-42
  4.1 脑中单胺类神经递质和内阿片肽检测方法的选择  37-39
    4.1.1 单胺类神经递质检测方法的选择  37-39
    4.1.2 ELISA检测内源性阿片肽  39
  4.2 小型猪特异性麻醉颉颃剂对大鼠不同脑区单胺类神经递质的影响及催醒机制分析  39-40
  4.3 小型猪特异性麻醉颉颃剂对大鼠不同脑区内阿片肽的影响及催醒机制分析  40-42
5 结论  42-43
致谢  43-44
参考文献  44-51
附录  51-52
攻读硕士学位期间发表的学术论文  52

小型猪特异性麻醉颉颃剂对麻醉大鼠不同脑区单胺类神经递质和内阿片肽的影响

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