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ESR、RBP4、PRLP和ACTN1基因多态性与猪繁殖性能的关系研究
作 者: 于雷
导 师: 蒋思文
学 校: 华中农业大学
专 业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 种公猪 精液品质 ESR基因 RBP4基因 PRLP基因 ACTN1基因 产仔数
分类号: S828
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
根据精子发生的生殖内分泌调节机制,本论文选择参与精子发生的生殖激素受体以及与生殖有关的基因:雌激素受体基因(Estrngen Receptor, ESR)、催乳素受体基因(Prolactin receptor, PRLR),以及调控精子成熟、诱导顶体反应和促进精卵结合的基因:视黄醇结合蛋白4基因(Retinol binding protein4, RBP4)、α-辅肌动蛋白1基因(a-actininl, ACTN1)作为候选基因,采用PCR-RFLP方法,分析在杜洛克、约克夏和兰德瑞斯猪共601个样本中的基因多态性,探讨基因型与种公猪射精量、精子密度、精子活力和畸形率性状的关系,研究公猪基因多态性与配种母猪产仔数、产活仔数的关系以及分析249头母猪基因多态性与产仔数、产活仔数的相关性,结果如下:1.雌激素受体基因(ESR)采用PCR-RFLP方法在群体中检测到AA、AB和BB三种基因型。在杜洛克、约克夏和兰德瑞斯猪中A等位基因频率分别为0.99、0.53和0.96,在杜洛克中不存在BB基因型。在约克夏中,对精子畸形率性状AA型个体与BB型个体之间差异显著(p<0.05),BB型畸形率平均值为5.10%,AA型为10.56%。杜洛克和兰德瑞斯猪精液品质性状关联分析结果表明各基因型之间差异不显著。因此,推测在约克夏中ESR基因BB型为优势基因型,B等位基因可能与畸形率性状呈正相关。在约克夏公猪ESR基因多态性与配种母猪产仔数、产活仔数关系的研究中发现,第三胎产仔数AA型个体与BB型个体差异显著(p<0.05),AA型比BB型多3.25头/窝;产活仔数AA型个体与AB型个体差异显著(p<0.05),AA型比AB型多2.38头/窝。由此,推测约克夏中AA基因型为优势基因型。2.视黄醇结合蛋白4基因(RBP4)采用PCR-RFLP方法在群体中检测到AA、AB和BB三种基因型。杜洛克中,对精子畸形率性状AA型与AB型个体之间差异显著(p<0.05);约克夏、兰德瑞斯猪中,精液品质在不同基因型个体之间差异不显著,推测在杜洛克中RBP4基因AB杂合型为优势基因型,RBP4基因不是相关约克夏、兰德瑞斯猪精液品质的分子标记。在约克夏公猪RBP4基因多态性与配种母猪产仔数、产活仔数关系的研究中发现,第二胎产仔数、产活仔数AA型与AB、BB型差异显著(p<0.05),产仔数AA型比AB型多3.5头/窝,产活仔数AA型比BB型多3.87头/窝;第三胎产仔数AA型与BB型差异极显著(p<0.01),AA型比BB型多2.71头/窝,产活仔数AA、AB型与BB型差异显著(p<0.05),AA型比BB型多2.13头/窝。因此,推测AA型为约克夏公猪优势基因型,A等位基因可能与配种母猪产仔数、产活仔数呈正相关。3.催乳素受体基因(PRLP)采用PCR-RFLP方法在群体中检测到AA、AB和BB三种基因型。在兰德瑞斯猪中,对精子畸形率性状AB型个体与BB型个体之间差异显著(p<0.05)。对射精量和精子活力性状,三个猪种各基因型之间差异不显著。由此,推测在约克夏中PRLP基因AB杂合型为劣势基因型。在约克夏中PRLP基因多态性与配种母猪产仔数、产活仔数关系的研究中发现,AB基因型公猪具有优势,但与其他基因型个体之间差异不显著。因此,推测公猪PRLP基因该突变位点多态性可能与配种母猪的产仔数、产活仔数不相关。4.α-辅肌动蛋白1基因(ACTN1)采用PCR-RFLP方法在群体中检测到AA、 AB和BB三种基因型。在兰德瑞斯猪中,对精子密度性状AA型个体与BB型个体之间差异显著(p<0.05)。在杜洛克和约克夏中,精液品质各性状在各基因型个体之间差异均不显著。因此推测ACTN1基因多态性可能与杜洛克、约克夏的精液品质不相关。在约克夏中ACTN1基因多态性与配种母猪产仔数、产活仔数的关系研究发现,第一胎产仔数AA型与BB型差异显著p<0.05),AA型比BB型多4.54头/窝;第三胎产仔数AA型与BB型差异极显著p<0.01),AB型与BB型差异显著(p<0.05),AA型和AB型分别比BB型多3.51头/窝和2.5头/窝;第三胎产活仔数AA型与BB型差异显著(p<0.05),AA型比BB型多3.81头/窝。在杜洛克和兰德瑞斯猪中,各基因型个体之间差异不显著。由此,推测在约克夏中AA型为优势基因型,ACTN1基因多态性可能与杜洛克和兰德瑞斯猪生殖性能不相关。上述研究结果表明:约克夏中ESR基因BB型,ACTN1基因AA型为相关精液品质性状的优势基因,杜洛克中RBP4基因的AB型为优势基因型。公猪基因多态性与配种母猪产仔数、产活仔数的关系研究,ESR基因、RBP4基因和ACTN1基因的AA型均为约克夏的优势基因型。公猪中ESR基因相关精液品质和种用性能是不同的优势基因型,说明精液品质和种用性能不成正相关,应用于种公猪选育还有待进一步试验。
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全文目录
摘要 9-11 ABSTRACT 11-14 縮略词表 14-15 第一章 文献综述 15-27 1 引言 15 2 分子标记的主要研究方法及发展 15-19 2.1 限制性片段长度多态性 15-16 2.2 随机扩增多态性DNA标记 16 2.3 单链构象多态性 16-17 2.4 扩增片段长度多态性 17 2.5 微卫星 17-18 2.6 单核苷酸多态性 18-19 3 拟研究基因的研究进展 19-26 3.1 雌激素受体基因(Estrogen Receptor,ESR) 19-21 3.1.1 ESR基因在雄性动物中的研究 19-20 3.1.2 ESR基因在产仔数方面的研究 20-21 3.2 视黄醇结合蛋白4基因(Retinol binding protein 4,RBP4) 21-22 3.2.1 RBP4基因在产仔数方面的研究 22 3.2.2 RBP4基因在雄性动物上的研究 22 3.3 催乳素受体基因(Prolactin receptor,PRLP) 22-24 3.3.1 PRLP基因在产仔数方面的研究 23-24 3.3.2 PRLP在雄性动物上的研究 24 3.4 α-辅肌动蛋白1(α-actininl,ACTN1)基因 24-26 3.4.1 α-辅肌动蛋白的作用 24-25 3.4.2 ACTN1基因雄性动物上的研究 25 3.4.3 ACTN1基因在产仔数方面的研究 25-26 4 研究目的和意义 26-27 第二章 试验材料与方法 27-35 1 试验材料 27-29 1.1 试验动物 27 1.2 试验所需仪器设备、试剂 27-29 1.2.1 试验所需仪器设备 27-28 1.2.2 试验所需试剂 28 1.2.3 常用试剂的配制 28-29 2 试验方法 29-35 2.1 精液中DNA提取 29-30 2.2 毛囊DNA提取 30-31 2.3 猪精液品质的检测 31-32 2.4 母猪繁殖性能的测定 32 2.5 PCR扩增的引物 32-33 2.6 ESR基因的PCR-RFLP检测 33 2.6.1 ESR基因的PCR扩增反应 33 2.6.2 ESR基因的酶切反应 33 2.7 RBP4基因的PCR-RFLP检测 33 2.7.1 RBP4基因的PCR扩增反应 33 2.7.2 RBP4基因的酶切反应 33 2.8 PRLP基因的PCR-RFLP检测 33-34 2.8.1 PRLP基因的PCR扩增反应 33-34 2.8.2 PRLP基因的酶切反应 34 2.9 ACTN1基因的PCR-RFLP检测 34 2.9.1 ACTN1基因的PCR扩增反应 34 2.9.2 ACTN1基因的酶切反应 34 2.10 数据统计方法 34-35 第三章 结果与分析 35-58 1 试验结果 35-58 1.1 猪精液、毛囊中基因组DNA提取结果 35-36 1.2 四个候选基因的PCR与酶切分型结果 36-40 1.2.1 ESR基因的的PCR扩增与酶切分型结果 36-37 1.2.2 RBP4基因的的PCR扩增与酶切分型结果 37-38 1.2.3 PRLP基因的的PCR扩增与酶切分型结果 38-39 1.2.4 ACTN1基因的PCR扩增与酶切分型结果 39-40 1.3 四个候选基因多态性与公猪精液品质的关系 40-47 1.3.1 ESR基因多态性与公猪精液品质的关系 40-42 1.3.2 RBP4基因多态性与公猪精液品质的关系 42-43 1.3.3 PRLP基因多态性与公猪精液品质的关系 43-45 1.3.4 ACTN1基因多态性与公猪精液品质的关系 45-47 1.4 四种候选基因多态性与公猪种用性能的关系 47-52 1.4.1 ESR基因多态性与公猪种用性能的关系 47-48 1.4.2 RBP4基因多态性与公猪种用性能的关系 48-49 1.4.3 PRLP基因多态性与公猪种用性能的关系 49-50 1.4.4 ACTN1基因多态性与公猪种用性能的关系 50-52 1.5 四种候选基因多态性与母猪繁殖性能的关系 52-58 1.5.1 ESR基因多态性与母猪繁殖性能的关系 52-53 1.5.2 RBP4基因多态性与母猪繁殖性能的关系 53-55 1.5.3 PRLP基因多态性与母猪繁殖性能的关系 55-56 1.5.4 ACTN1基因多态性与母猪繁殖性能的关系 56-58 第四章 讨论 58-62 1 猪四种基因多态性与繁殖性能的关联分析 58-61 1.1 关于猪ESR基因突变的研究 58-59 1.1.1 猪ESR基因多态性与精液品质关系的研究 58 1.1.2 猪ESR基因多态性与繁殖性能关系的研究 58-59 1.2 关于猪RBP4基因突变的研究 59-60 1.2.1 猪RBP4基因多态性与精液品质关系的研究 59 1.2.2 猪RBP4基因多态性与繁殖性能关系的研究 59-60 1.3 关于猪PRLP基因突变的研究 60-61 1.3.1 猪PRLP基因多态性与精液品质关系的研究 60 1.3.2 猪PRLP基因多态性与繁殖性能关系的研究 60-61 1.4 关于猪ACTN1基因突变的研究 61 1.4.1 猪ACTN1基因多态性与精液品质关系的研究 61 1.4.2 猪ACTN1基因多态性与繁殖性能关系的研究 61 2 研究的不足之处和进一步的研究内容 61-62 参考文献 62-69 致谢 69
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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家畜 > 猪
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