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基于DNA技术的木材树种识别研究
作 者: 刘金良
导 师: 骆嘉言; 安榆林
学 校: 南京林业大学
专 业: 木材科学与技术
关键词: DNA技术 改良的SDS-CTAB法 叶绿体DNA 基因trnL 基因matK 巢式PCR 针叶材 黄檀属
分类号: S781.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
利用传统的形态学鉴定方法识别木材树种存在一定的局限性,本文通过利用DNA技术研究木材树种识别的新方法。通过本文的研究可得到如下结论:(1)通过与传统的CTAB法和试剂盒法比较,表明改良的SDS-CTAB法更适用于针叶材及黄檀属木材的基因组DNA的提取。(2)对叶绿体DNA基因trnL区域的DNA片段进行PCR扩增,测序及序列的比对分析,可成功将针叶材冷杉属、黄杉属、铁杉属、云杉属、落叶松属及松属6属木材区分,并可成功将用传统的形态学鉴定方法难以区分的白木香Aquilaria sinensis和印尼白木香Aquilaria malaccensis识别区分。(3)构建基于trnL区域序列的系统进化树,可将此6属针叶树木材分别聚类,从而将其识别区分。(4)设计巢式引物,运用巢式PCR技术对叶绿体DNA基因matK区域的DNA片段地成功扩增,并对扩增产物的测序及序列的比对分析,可成功将东非黑黄檀Dalbergia melanoxylon、奥氏黄檀Dalbergia oliveri、微凹黄檀Dalbergiaretusa、卢氏黑黄檀Dalbergia louvelii、马达加斯加黄檀Dalbergia greveana、交趾黄檀Dalbergia cochinchinensis、巴里黄檀Dalbergia bariensis及降香黄檀Dalbergia odorifera8种黄檀属木材区分。(5)运用DNA技术识别木材树种到“属”水平是容易的,且识别木材树种到“种”水平也是可达到的,区分用传统的形态鉴定方法无法区分的树种也是可行的。DNA技术必将成为木材树种识别的一种重要的新方法,是对传统形态鉴定方法的强大的辅助。
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全文目录
致谢 3-4 摘要 4-5 Abstract 5-8 第一章 绪论 8-14 1.1 研究背景 8-9 1.2 国内外研究现状 9-10 1.3 课题研究的目的和意义 10-11 1.4 课题研究的主要内容 11-12 1.5 实验的基本流程 12 1.6 实验难点 12-13 1.7 课题的特色创新 13-14 第二章 分子鉴定方法 14-20 2.1 聚合酶链式反应的简介 14 2.2 巢式 PCR 的简介 14-15 2.3 仪器与试剂 15-18 2.3.1 基本仪器 15-17 2.3.2 实验主要试剂 17-18 2.3.3 DNA 标记 18 2.3.4 引物 18 2.4 电泳分析 18-19 2.5 数据分析 19-20 第三章 基于 DNA 技术的针叶材树种的识别研究 20-32 3.1 实验材料 20 3.2 实验方法 20-23 3.2.1 DNA 的提取 20-22 3.2.2 PCR 扩增体系及程序 22-23 3.3 实验结果与分析 23-32 3.3.1 DNA 提取结果 23-24 3.3.2 不同 DNA 提取方法的比较 24-25 3.3.3 抑制实验 25-26 3.3.4 PCR 扩增实验 26-32 第四章 基于 DNA 技术的黄檀属木材树种的识别研究 32-44 4.1 实验材料 32 4.2 实验方法 32-36 4.2.1 DNA 的提取 32-34 4.2.2 DNA 的纯化 34-35 4.2.3 PCR 扩增体系及程序 35-36 4.3 实验结果与分析 36-44 4.3.1 不同纯化方法的比较 36-37 4.3.2 不同 DNA 提取部位的比较 37-38 4.3.3 PCR 扩增实验 38-44 第五章 基于 DNA 技术的白木香和印尼白木香木材树种的识别研究 44-47 5.1 实验材料 44 5.2 实验方法 44-45 5.2.1 DNA 的提取 44 5.2.2 PCR 扩增体系及程序 44-45 5.3 实验结果与分析 45-47 第六章 总结论 47-49 参考文献 49-51
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中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林采运与利用 > 木材学 > 木材的构造和识别
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