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基于DNA技术的木材树种识别研究

作 者: 刘金良
导 师: 骆嘉言; 安榆林
学 校: 南京林业大学
专 业: 木材科学与技术
关键词: DNA技术 改良的SDS-CTAB法 叶绿体DNA 基因trnL 基因matK 巢式PCR 针叶材 黄檀属
分类号: S781.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要


利用传统的形态学鉴定方法识别木材树种存在一定的局限性,本文通过利用DNA技术研究木材树种识别的新方法。通过本文的研究可得到如下结论:(1)通过与传统的CTAB法和试剂盒法比较,表明改良的SDS-CTAB法更适用于针叶材及黄檀属木材的基因组DNA的提取。(2)对叶绿体DNA基因trnL区域的DNA片段进行PCR扩增,测序及序列的比对分析,可成功将针叶材冷杉属、黄杉属、铁杉属、云杉属、落叶松属及松属6属木材区分,并可成功将用传统的形态学鉴定方法难以区分的白木香Aquilaria sinensis和印尼白木香Aquilaria malaccensis识别区分。(3)构建基于trnL区域序列的系统进化树,可将此6属针叶树木材分别聚类,从而将其识别区分。(4)设计巢式引物,运用巢式PCR技术对叶绿体DNA基因matK区域的DNA片段地成功扩增,并对扩增产物的测序及序列的比对分析,可成功将东非黑黄檀Dalbergia melanoxylon、奥氏黄檀Dalbergia oliveri、微凹黄檀Dalbergiaretusa、卢氏黑黄檀Dalbergia louvelii、马达加斯加黄檀Dalbergia greveana、交趾黄檀Dalbergia cochinchinensis、巴里黄檀Dalbergia bariensis及降香黄檀Dalbergia odorifera8种黄檀属木材区分。(5)运用DNA技术识别木材树种到“属”水平是容易的,且识别木材树种到“种”水平也是可达到的,区分用传统的形态鉴定方法无法区分的树种也是可行的。DNA技术必将成为木材树种识别的一种重要的新方法,是对传统形态鉴定方法的强大的辅助。

全文目录


致谢  3-4
摘要  4-5
Abstract  5-8
第一章 绪论  8-14
  1.1 研究背景  8-9
  1.2 国内外研究现状  9-10
  1.3 课题研究的目的和意义  10-11
  1.4 课题研究的主要内容  11-12
  1.5 实验的基本流程  12
  1.6 实验难点  12-13
  1.7 课题的特色创新  13-14
第二章 分子鉴定方法  14-20
  2.1 聚合酶链式反应的简介  14
  2.2 巢式 PCR 的简介  14-15
  2.3 仪器与试剂  15-18
    2.3.1 基本仪器  15-17
    2.3.2 实验主要试剂  17-18
    2.3.3 DNA 标记  18
    2.3.4 引物  18
  2.4 电泳分析  18-19
  2.5 数据分析  19-20
第三章 基于 DNA 技术的针叶材树种的识别研究  20-32
  3.1 实验材料  20
  3.2 实验方法  20-23
    3.2.1 DNA 的提取  20-22
    3.2.2 PCR 扩增体系及程序  22-23
  3.3 实验结果与分析  23-32
    3.3.1 DNA 提取结果  23-24
    3.3.2 不同 DNA 提取方法的比较  24-25
    3.3.3 抑制实验  25-26
    3.3.4 PCR 扩增实验  26-32
第四章 基于 DNA 技术的黄檀属木材树种的识别研究  32-44
  4.1 实验材料  32
  4.2 实验方法  32-36
    4.2.1 DNA 的提取  32-34
    4.2.2 DNA 的纯化  34-35
    4.2.3 PCR 扩增体系及程序  35-36
  4.3 实验结果与分析  36-44
    4.3.1 不同纯化方法的比较  36-37
    4.3.2 不同 DNA 提取部位的比较  37-38
    4.3.3 PCR 扩增实验  38-44
第五章 基于 DNA 技术的白木香和印尼白木香木材树种的识别研究  44-47
  5.1 实验材料  44
  5.2 实验方法  44-45
    5.2.1 DNA 的提取  44
    5.2.2 PCR 扩增体系及程序  44-45
  5.3 实验结果与分析  45-47
第六章 总结论  47-49
参考文献  49-51

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中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林采运与利用 > 木材学 > 木材的构造和识别
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