学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

新疆哈萨克族和维吾尔族人群原发性高血压与αENaC和β_2-AR基因多态性的关联研究

作　者: 张丽萍
导　师: 汪师贞；赵学信
学　校: 新疆医科大学
专　业: 内科学心血管
关键词: 高血压病 哈萨克族 维吾尔族 SNP 连锁不平衡 单体型分析 αENaC基因 β2-AR基因
分类号: R544.1
类　型: 博士论文
年　份: 2007年
下　载: 235次
引　用: 1次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的:原发性高血压（Essential hypertension;EH）是最常见的危害人类健康的心血管疾病,能引起一系列严重后果。其发病是多种遗传因素和环境因素共同作用的结果,其中遗传因素在高血压的发病机制中起重要作用。随着人类基因组测序的完成,研究与疾病表型相关的基因序列变异已成为医学遗传学的一个主要课题。单核苷酸多态性（single-nucleotide polymorphism;SNP）作为第三代遗传标记,具有数量大、分布广的特点,系统地在群体水平上筛查、鉴定SNP,特别是基因编码区和调控区的SNP,通过病例组与对照组间的比较和统计学分析,就有可能获得与疾病相关联的SNP位点或单体型,这对于阐明某些复杂多基因疾病的遗传机制具有重要意义。本课题对新疆巴里坤地区哈萨克族牧民和吐鲁番地区维吾尔族农民进行了高血压流行病学调查,了解高血压病流行现状并分析其高发因素;同时基于HapMap计划中国人群的数据,采用病例-对照研究和标签SNP（tSNP）方法在新疆地区哈萨克族和维吾尔族人群中分别对上皮细胞钠通道α亚单位基因（Epithelium Natrium Channelgeneαsubunit;αENaC）和β2-肾上腺素受体基因（β2-adrenergic receptor;β2-AR）多态进行分析。首先系统筛查两人群中αENaC和β2-AR基因SNP的存在和频率,阐明连锁不平衡模式和单体型分布,同时选择两候选基因的tSNP,进而在病例—对照中探讨这些tSNP及其所构成单体型与高血压的关联:并比较各SNP基因型、等位基因和单体型频率在两民族群体中的分布情况,以期阐明这些候选基因与原发性高血压的关系及其在原发性高血压发病机制中的作用,从遗传学角度剖析两群体高血压患病的原因,进一步明确其对更广泛人群高血压疾病发生所起的作用。方法:（1）采用整群抽取随机抽样的方法对新疆巴里坤县5个乡哈萨克族牧民和吐鲁番地区3个乡维吾族农民进行了三次流行病学调查,共采集哈族血液标本1141例,其中高血压组703例,正常对照组438例;维族血液标本894例,其中高血压组424人,正常对照组470例。（2）随机选取40例无血缘关系的哈萨克族样本,利用PCR产物直接测序的方法筛查αENaC基因调控区、启动子区、外显子以及部分内含子区域的全部序列变异。计算常见SNP（少见等位基因频率Minor Allele Frequency;MAF＞5%）的连锁不平衡系数D1和γ2;利用Haploview软件选择其中3个SNPs作为tSNPs,采用TaqMan技术和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymerase chain reaction-restrictedfragment long polymorphism;PCR-RFLP）技术分别对入选样本进行αENaC基因扩增和基因分型。（3）基于本实验室前期工作基础,选择目前公认研究较多的β2-AR基因编码区Arg16Gly和Gln27Glu两个高频多态位点,应用TaqMan技术进行高通量基因分型。（4）以新疆地区哈萨克族和维吾尔族人群作为研究对象进行群体病例-对照分析研究,分别探讨单个SNP位点及其构成的单体型与原发性高血压的相关性,并了解αENaC和β2-AR基因多态在新疆两民族群体中的分布情况。（5）借助spss13.0软件进行统计学处理。x2检验用于计数资料的关联分析和Hardy—Weinberg平衡检验,t检验用于临床指标的差异性判定,协方差分析用于均数的调整,Logistic回归分析用于多因素资料中筛查独立患病危险因素及计算优势比（Odds ratio,OR）;同时运用SHEsis软件在线分析多个位点之间的连锁不平衡（linkage disequilibrium;LD）关系,Haploview软件用于单体型模块判定和tSNP的选取,应用phase软件进行多态位点单体型的构建和分析。结果:（1）流行病学调查结果显示:巴里坤地区哈萨克族高血压的检出率为61.6%:吐鲁番地区维吾尔族高血压的检出率为47.4%,哈萨克族人群的平均收缩压和舒张压均显著高于维吾尔族;两民族人群高血压的患病率随着年龄的增高而明显增加,且超重者和肥胖者血压增高明显多于体重正常者;血浆总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）的水平在高血压组和正常对照组间的差异有统计学意义（P＜0.05）;高血压组男性吸烟率亦明显多于正常对照组。（2）小样本测序在αENaC基因7kb范围内共检出9个高频SNPs位点,分别命名为G（-947）A、G（-321）A、A（+6）G、G（+49）C、C（+866）T、A334T、C（+20844）T、A（+26622）G和T663A,全部与NCBI dbSNP公共数据库中报道一致。（3）从测序检出的9个多态位点中选择3个SNPs作为tSNPs,可以很好的预测常见单体型和剩余常见SNP,它们分别是位于启动子区的G（-947）A、外显子6的A334T和外显子13的T663A:并对这3个tSNPs进行高通量的扩增与基因分型。（4）αENaC基因3个SNPs的基因型频率在两群体中分布均符合Hardy-Weinberg平衡;单个位点SNP关联分析显示:αENaC基因3个tSNPs基因型及等位基因频率分布在哈萨克族及维吾尔族群体高血压组和正常对照组中差异无统计学意义（P＞0.05）。（5）分别对9个多态位点做配对连锁不平衡分析,其中只有G（-947）A和G（+49）C、A（+26622）G和T663A位点在哈萨克族群体中均存在着强连锁不平衡,多数位点存在较弱或无连锁不平衡;单体型关联分析结果显示:3个tSNPs共构成8种单体型（H1～8）,单体型总体分布频率在哈萨克族病例组和对照组中的差异有统计学意义（P＜0.05）,进一步的关联分析表明哈萨克族群体中,H2、H3、H6和H7单体型频率在高血压组和正常对照组的差异有统计学意义（P＜0.05）:在维吾尔族群体中,除了H1和H3单体型频率在高血压组和正常对照组的差异未达到统计学意义,其余单体型频率在两组中的差异均有统计学意义（P＜0.05）。（6）比较αENaC基因单体型频率在新疆两个不同民族中的分布,结果发现其分布在哈萨克族与维吾尔族群体中的差异有统计学意义（P＜0.05）。（7）应用TaqMan技术对β2-AR基因进行大样本分型后发现:Arg16Gly多态和Gln27Glu多态的基因型频率在两群体中分布均符合Hardy-Weinberg平衡;单个位点关联分析显示:基因型频率及等位基因频率分布在两民族高血压组和正常对照组中差异均无统计学意义（P＞0.05）。（8）对β2-AR基因两个多态位点做配对连锁不平衡分析,强度D1值在哈萨克族和维吾尔族人群中分别为0.8和0.7,存在着连锁不平衡;进一步做单体型分析后,两位点所构成的4种单体型频率分布在两民族高血压组和正常对照组的差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论:（1）新疆哈萨克族高血压患病率明显高于维吾尔族,平均收缩压和舒张压在两群体中差异有统计学意义;哈、维两民族高血压的患病率随着年龄的增加而升高,并且高血压的发生均与吸烟、高体重指数、血脂紊乱等心血管病的危险因素密切相关。（2）研究未发现αENaC基因单个位点与新疆地区哈萨克族和维吾尔族人群的高血压相关联;而多位点单体型分析结果提示αENaC基因单体型结构分布在两民族病例组和对照组中差异均有统计学意义。由于多个位点分析的检验效能更强,因此我们推断在两民族群体中可能有民族特异性疾病易感的单体型或保护性单体型存在,本研究结果支持αENaC基因的基因剂量效应可能存在于单体型中,而不与单个位点直接关联。（3）αENaC基因单体型频率在新疆两民族人群中的分布差异有统计学意义,推断该基因多态的分布具有民族特异性,可能与两民族不同发病特点有关。（4）β2-AR基因Arg16Gly和Gln27Glu多态及其它们所构成的单体型与新疆地区哈萨克族和维吾尔族人群的高血压患病无直接关联。

全文目录


摘要  7-11
Abstract  11-15
英文缩略语表  15-17
前言  17-23
第一部分 新疆哈萨克族和维吾尔族原发性高血压群体流行病学研究  23-35
  研究背景与目的  23-24
  1. 材料和方法  24-26
    1.1 研究对象  24-25
    1.2 调查内容  25
    1.3 调查工作程序  25
    1.4 病例组和对照组的诊断纳入标准  25
    1.5 质量控制  25-26
    1.6 统计学分析  26
  2. 结果  26-32
  3. 讨论  32-33
  4. 小结  33-35
第二部分 上皮细胞钠通道α亚单位基因多态性与新疆维吾尔族原发性高血压的关联研究  35-65
  研究背景与目的  35-36
  1. 材料和方法  36-46
    1.1 研究设计  36
    1.2 主要仪器  36-38
    1.3 试剂  38-39
    1.4 实验方法  39-45
    1.5 统计学处理  45-46
  2. 结果  46-59
  3. 讨论  59-63
  4. 小结  63-65
第三部分 β_2-肾上腺素受体基因多态性与新疆哈萨克族和维吾尔族原发性高血压的关联研究  65-77
  研究背景与目的  65-66
  1. 材料和方法  66-67
    1.1 研究设计  66
    1.2 主要仪器  66
    1.3 试剂  66
    1.4 实验方法  66-67
    1.5 统计学处理  67
  2. 结果  67-73
  3. 讨论  73-76
  4. 小结  76-77
结论  77-78
致谢  78-80
参考文献  80-91
综述  91-119
攻读博士学位期间发表的学术论文  119-120
附录  120-121
个人简历  121-122
导师评阅表  122

相似论文

  1. 补肾活血汤治疗肾虚血瘀型老年性高血压病的临床疗效观察,R259
  2. 中西医结合治疗对老年高血压患者中医证候及生活质量的影响,R544.1
  3. 中国大豆地方品种群体的遗传结构和连锁不平衡特征及主要育种性状QTL的关联分析,S565.1
  4. 中国野生大豆的群体结构和连锁不平衡特点以及育种有关性状QTL的关联分析,S565.1
  5. 新疆维吾尔族与哈萨克族人群17个Y-STR基因座遗传多态性研究,R394
  6. 微量白蛋白尿与高血压病患者心血管事件的相关性研究,R544.1
  7. 汉维青年男性腰4、5椎体椎弓根CT形态差异及其临床意义,R687.3
  8. 荞麦种质CHS基因遗传多样性研究,S517
  9. 高血压病辨证分型与动态血压及经颅多普勒临床相关性研究,R259
  10. 外源性NO对旋毛虫肌幼虫杀伤作用及其机制研究,R532.14
  11. 胰岛素样生长因子-1与高血压心血管重构的相关性研究,R544.1
  12. 不同级别高血压病住院患者血管性认知功能障碍的发生率及其相关危险因素的研究,R544.1
  13. 维吾尔族与汉族女性三阴性乳腺癌患者的临床病理特征和预后分析,R737.9
  14. 高血压病住院患者中血管性认知功能障碍的发生率及相关危险因素分析,R749.1
  15. 中西医结合治疗急性高血压性脑出血的临床研究,R743.3
  16. Pfu高保真酶结合双硫代修饰引物在全血基因分型检测中的应用,R91
  17. 维吾尔族中学英语教师课堂语码转换研究,G633.41
  18. NPPA基因多态性与中国汉族人群心房颤动的关联分析,R541.75
  19. 上皮钙粘蛋白启动子-160 C/A位点多态性与鼻咽癌危险性分析,R739.63
  20. 维吾尔族舞蹈文化内涵及教学思考,J722.2-4
  21. 小麦基因组中雌性育性关联标记的研究分析,S512.1

中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 心脏、血管（循环系）疾病 > 血压异常 > 高血压
© 2012 www.xueweilunwen.com