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粒系集落刺激因子、STI571、三氧化二砷以及Velcade对BCR/ABL~+CD34~+细胞生物学行为的影响
作 者: 李澄宇
导 师: 孟凡义
学 校: 第一军医大学
专 业: 血液内科
关键词: CML CD34~+细胞 G-CSF ST1571 As2O3 Velcade
分类号: R733.72
类 型: 博士论文
年 份: 2006年
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内容摘要
研究背景和目的 慢性粒细胞白血病(CML)是起源于骨髓造血干细胞恶性增殖的克隆性疾病,可以检测出CD34抗原阳性伴BCR/ABL融合基因阳性的CML干细胞。研究表明,此类细胞有着独特的生物学特性,在CML的发病、进展及转归过程扮演着十分关键的角色,直接影响到CML患者的临床治疗效果及预后。 当前公认,除了异体造血干细胞移植(allo-HSCT)之外,STI571是阻止CML慢性期向急变期发展的最好治疗方法。但临床观察中却发现,对于那些经治疗已达CCR的患者,如果终止服药仍有可能复发。究其原因,应用实时定量PCR(Q-RT-PCR)技术检测,可以发现其体内尚仍有CML细胞残留。我们的先期研究也发现,部分经过STI571治疗已达CCR的CML患者用间期细胞荧光原位杂交法(I-FISH)检测骨髓MNC,尽管多次检测的结果均为阴性,但此时进行自体干细胞移植后仍然会复发,进一步研究这些患者发现,纯化后的CD34~+细胞中仍可以检测到较高的BCR/ABL融合基因。这些结果提示,STI571不能完全清除BCR/ABL~+-CD34~+细胞,而这些细胞将是导致CML复发的根源。 BCR/ABL~+-CD34~+细胞的生物学特性及其清除方法至今研究甚少,为此本实验旨在通过研究CML慢性期患者骨髓中CD34~+细胞伴随表达BCR/ABL融合基因和MDR-1的情况,了解其增殖动力学、抗原分化和形态学特征,及其对G-CSF作用后的变化。还研究了BCR/ABL~+-CD34~+细胞对STI571、Velcade和三氧化二砷处理的反应。 研究方法 1.采集慢性期CML患者骨髓的单个核细胞(MNC),用免疫磁珠法纯化CD34~+细胞,用流式细胞技术检测纯化前后细胞的CD34、MDR-1表达率。同样方法采集并检测正常人CD34~+细胞作为对照。用荧光原位杂交技术检测CML患者MNC纯化前后的BCR/ABL基因表达率。 2.用不同浓度(0-1000ng/ml)的G-CSF处理CD34~+细胞,于培养第0、48、96、144小时收集细胞进行以下检测:用胎盘兰计数法检测细胞数目;用
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全文目录
摘要 3-7 ABTRACT 7-15 第一部分 G-CSF对BCR/ABL~+-CD34~+CML细胞的增殖、分化影响 15-63 1.材料与方法 16-24 2.结果 24-52 3.讨论 52-56 4 小结 56-58 5.参考文献 58-63 第二部分 STI571、As_2O_3、Velcade对BCR/ABL~+-CD34~+细胞作用的研究 63-86 1.材料与方法 63-67 2.结果 67-78 3.讨论 78-81 4 小结 81-82 参考文献 82-86 综述 86-92 缩略语 92-93 在读期间发表文章情况 93-94 致谢 94-95 第一军医大学学位论文原创性声明 95 学位论文版权使用授权书 95
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 白血病 > 慢性白血病
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