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脉络膜新生血管发生机制及防治的实验研究

作　者: 赵世红
导　师: 何守志
学　校: 中国人民解放军军医进修学院
专　业: 眼科
关键词: 氪激光脉络膜新生血管增殖细胞核抗原分化群34 血管内皮生长因子碱性成纤维细胞生长因子胎肝激酶-1 成纤维细胞生长因子受体1 苏拉明免疫组织化学原位杂交
分类号: R773.4
类　型: 博士论文
年　份: 2003年
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内容摘要

目的：研究脉络膜新生血管发生机制，探索有效的防治方法。方法：1．应用氪激光(波长647nm)对33只DN大鼠实验眼视网膜进行光凝，功率360mW、光斑直径50μm、曝光时间0.05s，创建CNV模型。于光凝后3d，7d，14d，21d，28d和56d行FFA和ICGA后处死，进行光镜和电镜观察。2.20只BN大鼠实验眼光凝3d，7d，21d和28d行FFA、ICGA后处死，应用免疫组化方法检测PCNA、CD34、VEGF、FLK-1、bFGF和FGFR1的表达。3.40只BN大鼠实验眼光凝后，治疗组腹膜内注射苏拉明1ml(30mg／kg)，对照组腹膜内注入等量的生理盐水，每三日一次。于光凝后3d，7d，21d和28d行FFA、ICGA后处死，进行光镜及电镜观察，VEGFmRNA和bFGFmRNA原位杂交检测，FLK-1和FGFR1免疫组化检测。结果：1．光凝7d后，FFA光凝区显示圆盘状荧光素渗漏，ICGA可见CNV充盈，光镜和电镜可见视网膜下CNV。21d成模率为76.0％，达高峰。CNV厚度自光凝后7～21d逐渐增加(P＜0.01)，之后变化脉络膜新生血管发生机制及防治的实验研究中文摘要不显著（NO．05）。2．光凝后 3d，PCNA在光凝区视网膜及脉络膜内大量表达，3J 视网膜内PCNA阳性染色面积及密度逐渐下降（HO．01），7一28d CNV中阳性染色面积比值逐渐下降（HO．01）。CD34在视网膜及脉络膜血管内皮细胞表达，光凝后 7J，CNV中阳性染色面积及密度显著增加叫八o．们几VEGF在正常眼视网膜神经节细胞层、内核层、色素上皮层、视网膜和脉络膜血管内皮细胞表达。光凝后3～21d视网膜内VEGF表达水平逐渐下降（AO．01），7～21d在CNV中阳性染色面积及密度显著增加叫HO．01L21《8d变化不显著（NO．05）。FLK刁在正常SKjK网膜和脉瓣血管内皮细胞及视网膜神经节细胞层表达，光凝后7Jd，CW中阳性染色面积及密度显著增加叫八0．ofLbFGF在正常B毗网膜神经节细胞层、内核层、色素上皮层表达。FGFR在正常目腑网膜神经节细胞层、内核层和脉络膜血管层表达。光凝后 3＜1d视网膜内 bFGF和 FGFRI表达水平逐渐下降（H 0．01厂 7J 在mV中阳性细胞染色面积及密度显著增加（八0．OI入21上8d变化不显著（伶0．05）。3．腹腔内注射苏拉明的治疗组洲大鼠各时间点 FFA i ICGA检查，光凝区未见荧光素渗漏和＊G充盈，仅可见斑驳状的荧光素着染。光凝7d后光镜和电镜下可见CNV主要由迁移增殖的RPE细胞和纤维细胞组成，仅少量新生血管被包绕其中，7上8d 的CNV最大厚度为 4 脉络膜新生血管发生机制及防治的实验研究中文摘要 o5．28L6．56）M。对照组光凝7d后，FFA光凝区可见圆盘状荧光素渗漏，ICGA可见CNVk盈，光镜和电镜下可见富含新生血管的 CNV，7～28d的CNV最大厚度为（64．04f8．44）M。各时间点夕疗组与对照组相上，CNV厚度显著减小（HO．01），CNV中VEGFmRNA、 FLK－1、bFGFmRNA和 FGFR严性染色面积显著减少（H 0．01），但阳性染色面积比值无显著差异（伶0．05）。结论：氯激光可创建BN大鼠CNV模型，方法简便易行，成模时间短、维持时间长、成模率高，可用来模仿人类CNV病变进行防治研究。激光损伤后，光凝区视网膜内VEGF和bFGF向暴露的脉络膜毛细血管聚集，与各自的受体FLK叶和FGFRI有效结合后诱导血管内皮细胞分化和洲V形成。苏拉明通过阻断VEFG与受体巩K＜及 bFGF与受体 FGFRI 的有效结合抑制加V形成。

全文目录

前言  5-6
缩写词表  6-7
中文摘要  7-10
英文摘要  10-14
第一部分氪激光诱导大鼠脉络膜新生血管模型的研究  14-30
  实验目的  14
  材料与方法  14-17
  结果  17-22
  讨论  22-25
  结论  25-26
  参考文献  26-30
第二部分氪激光诱导大鼠脉络膜新生血管形成机制的研究  30-54
  实验目的  30
  材料与方法  30-34
  结果  34-41
  讨论  41-48
  结论  48-50
  参考文献  50-54
第三部分苏拉明对氪激光诱导大鼠脉络膜新生血管抑制作用的研究  54-80
  实验目的  54
  材料与方法  54-59
  结果  59-71
  讨论  71-73
  结论  73-75
  参考文献  75-80
附图  80-91
文献综述一光动力疗法治疗眼科疾病研究进展  91-102
  参考文献  98-102
文献综述二血管内皮生长因子及其受体与眼内新生血管性疾病  102-118
  参考文献  110-118
文献综述三碱性成纤维细胞生长因子及其受体与眼科疾病  118-130
  参考文献  123-130
发表论文  130-131
致谢  131

脉络膜新生血管发生机制及防治的实验研究

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