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褐藻寡糖的制备及诱导烟草抗性研究

作　者: 王松
导　师: 姜国良
学　校: 中国海洋大学
专　业: 海洋生物
关键词: 褐藻酸钠 岩藻多糖 寡糖 诱导子 烟草花叶病毒
分类号: S432
类　型: 硕士论文
年　份: 2003年
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内容摘要


植物病毒病对农业生产造成很大威胁。其中烟草花叶病毒（Tobacco mosaic vires）是危害农作物的主要病毒之一，它危害范围广，对农作物的产量和品质影响极大。寻找防治烟草花叶病毒的有效方法一直是植物保护研究的重要内容之一。植物可以通过诱导产生抗病性，寡糖就是一种有效的诱导子，可以诱导植物防卫反应的发生。本文以海带为原材料，制备寡褐藻酸钠和岩藻寡糖，用于诱导烟草抗病性的研究，结果如下。 从海带中用沸水煮提方法得到褐藻酸钠和岩藻多糖两种多糖。其中水溶性的褐藻酸钠是褐藻胶用碳酸钠转化而来，两种多糖水提物经过70％乙醇沉淀和DEAE-纤维素离子交换层析纯化，得到纯品。 褐藻酸钠分别用0.25 mol·L-1盐酸、90％甲酸在90℃进行部分酸水解，用海螺酶在pH=8.5磷酸缓冲液中25℃降解。岩藻多糖用0.25mol·L-1盐酸，90℃进行部分酸水解。降解产物用80％乙醇分离，98％乙醇沉淀。实验结果表明，褐藻酸那经盐酸、甲酸和海螺酶降解反应8h后，寡糖的收率分别为0.52％、11.3％和9.7％。岩藻多糖经盐酸降解4h后，寡岩藻多糖糖的收率达到75％，超过4h寡糖收率开始下降。两种多糖的水解产物分别经过Sephdex G-25凝胶过滤，以蒸馏水洗脱，分离得到平均聚合度为8～20的寡褐藻酸钠和6～20的岩藻寡糖。 运用制备的两种褐藻寡糖进行诱导烟草防卫反应研究，分别以600μg·ml-1的寡褐藻酸钠和岩藻寡糖处理烟草幼苗。实验结果表明，寡褐藻酸钠和岩藻寡糖均能诱导烟草防御酶活性升高，寡褐藻酸钠处理烟草4d后POD活性升高，第6d达到峰值。岩藻寡糖诱导POD活性第2d开始升高，第6d达到峰值。寡褐藻酸钠诱导烟草PAL活性第5d达到最高值，岩藻寡糖诱导烟草PAL活性第4d达到最高值。中国海洋大学硕士毕业论文 分别以600林g·ml一’、500林g讯l”、1 000林g一ml一l、1 200林g·ml一l的两种褐藻寡糖诱导烟草防御酶活性，结果显示，两种寡糖对POD和PAL活性的诱导与浓度有直接关系，在600雌·讯l一’一1 000雌二ml一’之间，酶活随寡糖浓度上升而升高，到1000林gml一’达到最高诱导活性，1 000林g饥l一’以上不再有明显增高。 分别以两种褐藻寡糖诱导烟草对烟草花叶病毒的抗性作进一步研究，研究结果显示，无论是寡褐藻酸钠还是岩藻寡糖，在处理2d后对病毒的抑制效果并不明显，诱导处理4d以后抗性开始提高，寡褐藻酸钠处理第6d后诱导烟草对烟草花叶病毒的抗性达到最高。岩藻寡糖诱导抗性第sd达到最高。分别用600林g·ml一’、800林g·ml一，、1 00009·ml一’、1 200林g·讯l一’、1 400林g二ml一，5种浓度的寡褐藻酸钠、岩藻寡糖处理烟草，结果显示两种寡糖的浓度都在1 000雌二ml一’左右达到100%诱导抗病毒效果，对烟草花叶病毒的抑制率均达到60%左右。 实验结果显示，寡褐藻酸钠和岩藻寡糖都能诱导烟草的防卫反应，使两种有效的诱导子，因此有望发展成为一种新型、无毒的生物农药。

全文目录


摘要  5-7
Abstract  7-9
第一章 寡糖诱导植物抗病性研究概况  9-18
  1 植物防卫反应中的寡糖诱导子  10-14
  2 寡糖信号的特点  14-15
  3 寡糖诱导子作用机理  15-16
  4 寡糖诱导子的应用前景  16-18
第二章 褐藻多糖的分离、纯化  18-25
  1 材料和仪器  18-19
  2 实验方法  19-21
  3 结果  21-23
  4 讨论  23-25
第三章 褐藻寡糖的制备  25-33
  1 材料和仪器  26
  2 实验方法  26-28
  3 结果  28-30
  4 讨论  30-32
  5 小结  32-33
第四章 褐藻寡糖诱导烟草抗病性研究  33-50
  第一节 褐藻寡糖诱导烟草防御酶活性研究  33-42
    1 材料和仪器  34
    2 实验方法  34-35
    3 结果  35-38
    4 讨论  38-41
    5 小结  41-42
  第二节 褐藻寡糖诱导烟草抗植物病毒研究  42-50
    1 材料和仪器  43
    2 实验方法  43
    3 结果  43-48
    4 讨论  48-49
    5 小结  49-50
结语  50-51
参考文献  51-58

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 植物病害及其防治
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