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骨形态发生蛋白7对高磷诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞钙化的影响机制研究

作　者: 李丽华
导　师: 李峻岭
学　校: 延边大学
专　业: 内科学
关键词: 骨形态发生蛋白7 血管平滑肌细胞高磷血管钙化核心结合因子α1
分类号: R543
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：研究骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein 7,BMP7)对体外培养高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化的影响。方法：应用大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行体外实验,实验分为3组：正常磷浓度(Pi1.4mmol/L)组、高磷浓度(Pi2.4mmol/L)组和高磷+BMP7组,分别培养3、6、9天。以更换培养液当天为D0天。应用BCA法检测不同时间的细胞内钙含量,应用放射免疫方法检测培养骨钙素含量,应用ELISA方法检测不同时间的细胞核结合因子α1(Core Binding Factorα1,Cbfα1)与DNA结合的活性,应用免疫组织化学方法检测α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达。结果：正常磷浓度组VSMCs钙含量在9天内无明显变化,高磷浓度组VSMCs钙含量在D3、D6、D9比D0明显增加(P<0.05),高磷+BMP7(200ng/ml)组在D6和D9细胞钙含量与同一时间高磷浓度组比较均显著降低(P<0.05)。培养72小时后,与正常磷浓度组上清液骨钙素水平相比,高磷浓度组骨钙素水平明显增加(14.62±2.93pg/μg蛋白vs 2.83±0.64pg/μg蛋白,P＜0.01)。高磷+BMP7组上清液骨钙素含量为9.36±1.373 pg/μg蛋白,与高磷浓度组相比,差异具有显著性(P<0.05)。高磷浓度组在D3、D6、D9α-SMA阳性细胞百分比均较正常磷浓度组显著减少(P<0.05),且随着时间延长,阳性细胞百分比逐渐下降；而高磷+BMP7组在D6、D9α-SMA阳性细胞百分比均较同一时间高磷浓度组显著增多(P<0.05)。正常磷浓度组细胞Cbfα1活性在9天内无明显变化。与D0相比,高磷浓度组在D6和D9天细胞Cbfα1活性显著增加(P<0.05)。高磷+BMP7组在D6和D9细胞Cbfα1活性与同一时间高磷浓度组比较均显著降低(P<0.05)结论：高磷可直接刺激大鼠VSMC的钙沉积和骨钙素产生增加,其作用可能与高磷上调VSMC上Cbfα1表达有关；BMP7可抑制大鼠VSMC的钙沉积和骨钙素产生,其作用可能与其降低VSMC上Cbfα1表达有关。

骨形态发生蛋白7对高磷诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞钙化的影响机制研究

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