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小鼠泌尿生殖系统显微三维重建及DES对睾丸形态的影响

作　者: 钟军
导　师: 蒋学武
学　校: 汕头大学
专　业: 小儿外科学
关键词: 泌尿生殖系统 形态学 三维重建 组织连续切片 已烯雌酚
分类号: R726.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的：近来研究表明,先天性生殖系统畸形及其相关疾病的发生日益增加,致畸因素以及致畸机理的研究进展很快,然而,既往对生殖系统畸形判定指标(即形态学量化研究)的研究深度一直不够,特别是生殖系统具有器官组织多且关系密切,结构细微又多管状走行,畸形常呈现系统性和多发性等特点,以至目前常用的畸形判定指标都显得过于粗糙且不全面,一直存在很大争议。面对目前低剂量以及环境剂量毒物致畸效应的研究则更显不适,迫切需要更精确、系统的畸形评判方法和指标。计算机三维重建技术作为一门新兴的技术不但能通过连续组织切片进行重建,还可以对重建的三维结构进行测量获得器官组织长度、表面积、体积等精确参数。本研究通过对新生小鼠泌尿生殖系统连续组织切片三维重建并测算DES作用下新生小鼠睾丸的表面积和体积参数,并整体展现正常及孕期暴露不同剂量DES后新生小鼠睾丸的形态、位置和结构,以探讨更为精确的评价生殖系统形态发育及畸形的方法。方法：8-10周龄雌性昆明小鼠30只随机平均分为3组：正常组、实验Ⅰ组及实验Ⅱ组。于孕9-17天,实验Ⅰ组皮下注射DES 100μg/kg/d,实验Ⅱ组皮下注射DES 1μg/kg/d,正常组织不给药。待产后将新生小鼠通过原位性腺观察进行解剖性别辨认抽取雄性仔鼠,每组随机挑选6只进行原位固定作横断面连续切片,常规HE染色。在带数字照相记录的生物显微镜下按一定顺序摄取图像以JPG格式保存。通过Photoshop、3D-doctor三维重建软件进行对小鼠泌尿生殖系统进行重建并获取小鼠睾丸表面积、体积等形态参数进行统计学分析。结果：1.正常组新生小鼠连续切片显微显示肾脏及睾丸形态曲线规整圆润,位置呈右高左低。睾丸均位于膀胱颈两侧附近,远离肾脏,睾丸附睾向下缩小演变或融合为睾丸引带。实验组睾丸发育差体积小,睾丸位置形态变化与DES剂量相关：剂量越高,睾丸出现上移的机率越高,位置相应越接近肾脏。2.三维重建后获得新生小鼠泌尿生殖系统立体图像及形态学参数：①正常组小鼠左右睾丸表面积分别为2621923.89±280270.28和2651522.14±53701.92μm2,体积分别为432910679.57±50133711.68和418385403.85±20078887.04μm3。②实验Ⅰ组小鼠左右睾丸表面积分别为2728634.03±200344.17和2728634.03±200344.17μm2,体积分别为442275396.27±51415726.79和432652932.27±33081719.62μm3。③实验Ⅰ组小鼠左右睾丸表面积分别为2148691.89±280270.28和2083414.40±118167.77μm2,体积分别为269457600.00±48909033.77 and 289652459.20±36903360.51μM3。正常组与实验组(lμg/kg/d)左右睾丸表面积及体积大致相同,比较无统计学差异(P>0.05),但正常组与实验组(lμg/kg/d)左右睾丸表面积及体积明显大于实验组(100μg/kg/d),比较均有统计学差异(P<0.05)。结论：1.本研究应用整块组织连续切片显微三维重建技术较为成功地重建了新生雄性小鼠的泌尿生殖系统的三维立体结构,确立了一种新生小鼠泌尿生殖系统显微结构三维重建的实用方法。2.本研究应用整块组织连续切片显微三维重建技术不仅获得了新生雄性小鼠的泌尿生殖系统的三维立体结构,并获得较的精确的形态学参数指标,可辨别新生小鼠泌尿生殖系统中各器官的细微的整体形态变化,为泌尿生殖系统畸形提供一个形态学判定平台,进一步量化外源性雌激素作用下新生小鼠泌尿生殖系统畸形的评判方法和形态学研究。3.母鼠孕期暴露于高剂量的DES可引起雄性新生小鼠睾丸体积、表面积的缩小,睾丸发育差且有形态异常,且有不同程度的上移,与膀胱颈距离较远,且与DES剂量相关：剂量越高,睾丸出现上移的机率越高,位置相应越接近肾脏。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
缩略语  8-9
目录  9-10
第1章 前言  10-12
第2章 材料与方法  12-17
第3章 结果  17-23
第4章 讨论  23-28
第5章 结论  28-29
第6章 展望  29-30
参考文献  30-33
综述  33-48
发表论文情况  48-49
致谢  49-50
个人简介  50

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中图分类: > 医药、卫生 > 儿科学 > 小儿外科学 > 小儿泌尿科学
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