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P27、PCNA、CyclinD1等因子的表达和乳腺癌早期浸润的关系

作　者: 李会平
导　师: 邢鲁奇
学　校: 河南科技大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 乳腺导管癌 微浸润 乳腺肿瘤细胞 免疫组化
分类号: R737.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


背景与目的乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其中浸润性导管癌约占乳腺癌的80%。微浸润是指在大量导管内癌的背景下,乳腺间质中,存在一处或几处明确的、离散的、小的镜下灶性浸润。乳腺导管肌上皮的缺失成为微浸润乳腺导管癌发展的关键,因此明确癌细胞突破肌上皮向间质浸润的作用机理有着十分重要的理论和临床意义,可为研究肿瘤的浸润转移机制和临床靶向治疗提供理论依据。本实验采用p27、PCNA、CyclinD1等肿瘤增殖相关标记物检测微浸润乳腺导管癌中位于肌上皮缺失处及其附近的癌细胞的表达情况,并与同一导管内的其它癌细胞进行比较,探讨它们在乳腺导管癌浸润发展中的作用及与相关临床病理指标的关系,从而探索微浸润的发病机理,为乳腺导管癌的早期防治提供理论依据,并寻找在微浸润中有特殊意义的因子标记物。材料与方法选取乳腺微浸润性导管癌50例。采用双重染色法,用SMA单克隆抗体标记肌上皮细胞,定位乳腺导管,然后检测p27、PCNA、CyclinD1蛋白在微浸润处和导管内的癌细胞中的表达,探讨它们与ER、PR、C-erbB-2的关系;分析不同生物指标在癌细胞向基质浸润中的作用,并观察微浸润癌细胞的病理形态学特征。对20例导管内癌、20例微浸润导管癌和40例浸润性导管癌,用免疫组织化学法(S-P法)检测p27、CyclinD1和Ki-67蛋白在各组中的表达,并进行统计学分析。结果位于肌上皮缺失处的微浸润癌细胞缺乏肿瘤增殖相关指标p27、PCNA和CyclinD1的表达;缺乏肿瘤侵袭相关指标MMP-9和TIMP-1表达;缺乏抑制凋亡因子bcl-2和抑癌基因p16表达;另一方面,乳腺导管癌中微浸润的癌细胞高表达原癌基因c-erb-B2。同一导管内其它的癌细胞明显的表达上述p27、PCNA和CyclinD1等指标。p27、CyclinD1和Ki-67在20例导管内癌中高表达率分别为85%、10%、10%;在20例微浸润导管癌中分别为60%、25%、30%;在40例浸润性导管癌中分别为45%、55%、67.5%;p27,CyclinD1和Ki-67分别在导管内癌、微浸润导管癌和浸润性导管癌中的表达进行比较,P值分别为0.012、0.001、0.000,P <0.05有统计学意义;乳腺导管癌中p27与CyclinD1、p27与Ki-67的表达均呈负相关( r = ?1 ,P <0.01)。结论(1)乳腺导管癌中微浸润的癌细胞与导管内其它的癌细胞相比,具有明显不同的形态学和免疫组化特征,它们缺乏某些细胞增殖、肿瘤侵袭等相关因子的表达,这些细胞可能具有更强的潜在增殖和浸润能力,为较早反映肿瘤微环境中多种病理改变的标志之一。(2)随着乳腺导管癌的浸润和进展, p27蛋白的表达率呈递减趋势,CyclinD1和Ki-67的表达率呈递增趋势。p27在乳腺导管癌的发生发展中可能具有明显的抑制作用,联合检测p27与CyclinD1/Ki-67对反映乳腺导管癌的恶性程度以及预后可能更为客观。

全文目录


摘要  2-4
ABSTRACT  4-8
第1章 综述  8-15
  1.1 肌上皮细胞的正常分布、形态和功能  8-9
  1.2 肌上皮改变对相邻腺上皮细胞的影响  9-10
  1.3 肌上皮断裂与肿瘤浸润的关系  10
  1.4 微浸润癌细胞的标记物（增殖、凋亡、浸润和转移）  10-12
  1.5 微浸润癌细胞生物性质的改变与肿瘤浸润的关系  12-13
  1.6 展望  13-15
第2章 前言  15-18
  2.1 课题背景  15-16
  2.2 目前研究状况  16-17
  2.3 课题研究意义  17-18
第3章 材料与方法  18-23
  3.1 实验材料  18-20
    3.1.1 标本资料收集  18
    3.1.2 主要实验仪器  18
    3.1.3 实验试剂  18-20
  3.2 实验方法  20-22
    3.2.1 免疫组织化学双染法实验步骤  20-21
    3.2.2 免疫组织化学SP 法实验步骤  21
    3.2.3 实验对照  21-22
  3.3 结果判定  22
    3.3.1 免疫组化结果判定标准  22
    3.3.2 微浸润的判定标准  22
  3.4 统计学分析  22-23
第4章 结果  23-27
  4.1 微浸润乳腺导管癌组SMA 和相关因子的免疫组化双染结果  23-24
    4.1.1 形态学特征  23
    4.1.2 细胞增殖相关因子p27、PCNA 和CyclinD1 的表达  23
    4.1.3 肿瘤侵袭相关因子MMP-9、TIMP-1 的表达  23
    4.1.4 抑制凋亡因子Bcl-2 和抑癌基因p16 的表达  23-24
    4.1.5 c-erb-B2 的表达  24
    4.1.6 微浸润癌细胞与雌孕激素ER、PR 的关系  24
  4.2 各组乳腺导管癌中p27、CyclinD1 和Ki-67 表达的结果比较  24-27
    4.2.1 p27 在乳腺导管内癌、微浸润性导管癌和浸润性导管癌中的表达  24-25
    4.2.2 CyclinD1 在乳腺导管内癌、微浸润性导管癌和浸润性导管癌中的表达  25
    4.2.3 Ki-67 在乳腺导管内癌、微浸润性导管癌和浸润性导管癌中的表达  25
    4.2.4 乳腺导管癌中p27 的表达与CyclinD1、Ki-67 的相关性  25-27
第5章 讨论  27-32
  5.1 微浸润乳腺导管癌组SMA 和相关因子双重免疫组化结果  27-30
  5.2 各组乳腺导管癌中p27、CyclinD1 等免疫组化结果的比较  30-32
第6章 结论  32-33
参考文献  33-40
附录 附图  40-44
致谢  44-45
攻读硕士学位期间的研究成果  45

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 乳腺肿瘤
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