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中华鳖养殖水体的环境因子调查与机体致病菌研究

作 者: 张磊
导 师: 管越强
学 校: 河北大学
专 业: 水生生物学
关键词: 中华鳖 浮游植物 环境监测 病原菌 药敏试验 血液分析
分类号: S947.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
下 载: 93次
引 用: 2次
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内容摘要


对河北省阜平县中华鳖养殖基地的疾病情况及养殖水体的环境因子进行为期9个月的采样和监测分析,探讨了水体中浮游植物的群落特征、理化因子对中华鳖疾病的影响;从患病中华鳖体内分离纯化细菌并进行鉴定,得到了3株能够感染中华鳖的致病菌,找出了能够有效抑制致病菌的药物;进行回染实验,通过对感染的中华鳖血液进行生理生化分析,发现患病后许多指标出现异常变化。上述结果为有效预防中华鳖细菌性疾病的发生提供参考依据。共鉴定出5门、5纲、22科、42种浮游植物,其中绿藻门藻类最多,有19属25种;其次为蓝藻门,9属13种;其它三门相对较少。优势种为四尾栅藻(Scenedesmus quadricanda),其较高的耐污性提示养殖水体有机污染程度较高。对养殖水体进行的化学指标监测结果表明总氮与氨氮含量比较高,结合疾病情况,可看出中华鳖的患病情况与总氮、氨氮含量的变化相一致。分离出3株优势细菌,通过菌体和菌落形态观察、生理生化特征分析和16SrDNA测序,鉴定出该3种细菌分别为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)。细菌回染实验结果表明3株细菌都能引起机体患病。药敏试验结果显示,嗜水气单胞菌对庆大霉素、红霉素、环丙沙星和氯霉素都有极强的敏感性;铜绿假单胞菌对四环素有极强的敏感性,对诺氟沙星、庆大霉素和环丙沙星有较强的敏感性;温和气单胞菌对土霉素、红霉素有极强的敏感性。在治疗中华鳖细菌性疾病时,可以选用针对性药物进行治疗,这样能在短时间内起到良好的效果。中华鳖在感染致病菌后,血细胞数量大量减少;血液内谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶3种酶活力显著高于健康中华鳖,这可能是病原感染后造成中华鳖体内器官病变,刺激酶活力升高,同时细胞内酶大量逸出也能导致这种情况。肌酸激酶变化不显著,可见中华鳖患病后对肌肉细胞的影响不大。蛋白质代谢方面:病鳖血液中总蛋白、白蛋白含量下降,尿素氮含量显著提高,说明中华鳖免疫系统受到细菌感染影响,免疫功能严重下降,其中尿素氮含量增加的原因可能是中华鳖患病后肾单位滤过及重吸收功能失调,肾功能不全。脂类代谢方面:患病中华鳖血液中甘油三酯含量显著低于健康中华鳖,甘油三酯含量与肝脏的健康程度密切相关,可见患病中华鳖肝脏受到了严重损伤;总胆固醇含量变化不显著。离子代谢方面:Ca2+、Na+和Cl-含量变化不显著,这可能是由于患病时间较短,离子浓度还没有出现显著变化。

全文目录


摘要  5-7
Abstract  7-12
第1章 绪论  12-22
  1.1 中华鳖的生物学特征  12-13
  1.2 中华鳖养殖水体的环境因子  13-16
    1.2.1 非生物因子  13-15
    1.2.2 生物因子  15-16
  1.3 中华鳖疾病概况  16-18
  1.4 中华鳖疾病的主要防治方法  18-20
    1.4.1 生态防治  18-19
    1.4.2 药物治疗与免疫防治  19-20
  1.5 实验目的及意义  20-21
  1.6 技术路线  21-22
第2章 中华鳖养殖水体浮游植物群落特征与疾病监测  22-29
  2.1 引言  22
  2.2 材料与方法  22-23
    2.2.1 采样时间和采样点的设置  22
    2.2.2 采样方法  22-23
    2.2.3 浮游植物群落特征及水质评价方法  23
  2.3 结果  23-27
    2.3.1 浮游植物的种类组成  23
    2.3.2 各采样点优势种  23-24
    2.3.3 各采样点浮游植物的频度和多度分布  24-25
    2.3.4 浮游植物多样性指数及绿藻商  25
    2.3.5 浮游植物密度变化  25
    2.3.6 中华鳖死亡情况调查结果  25-26
    2.3.7 藻类密度与中华鳖死亡数的相关性分析  26-27
  2.4 讨论  27-29
第3章 中华鳖养殖水体水质监测  29-36
  3.1 引言  29
  3.2 材料与方法  29-32
    3.2.1 采样时间和采样点的设置  29
    3.2.2 总氮的测定方法:过硫酸钾氧化紫外分光光度法  29-30
    3.2.3 氨氮的测定方法:纳氏分光光度计法  30-31
    3.2.4 亚硝酸盐氮的测定方法:  N-(1-萘基)-乙二胺分光光度法  31
    3.2.5 总磷的测定方法:钼锑抗分光光度法  31-32
  3.3 结果  32-34
    3.3.1 中华鳖养殖水体水质情况调查结果  32-34
    3.3.2 水质与中华鳖死亡数的关系  34
  3.4 讨论  34-36
第4章 患病中华鳖致病菌的分离、鉴定及药敏试验  36-52
  4.1 引言  36
  4.2 材料与方法  36-46
    4.2.1 实验材料的来源  36
    4.2.2 致病菌分离鉴定方法  36-45
    4.2.3 药敏试验方法  45-46
  4.3 结果  46-50
    4.3.1.细菌分离与纯化结果  46-47
    4.3.2 细菌生理生化鉴定结果  47-48
    4.3.3 测序结果  48-50
    4.3.4 药敏试验结果  50
  4.4 讨论  50-52
第5章 患病中华鳖体内致病菌回染实验与血液分析  52-64
  5.1 引言  52
  5.2 材料与方法  52-54
    5.2.1 中华鳖的饲养方法  52
    5.2.2 中华鳖疾病感染方法  52
    5.2.3 血液测定方法  52-54
  5.3 结果  54-62
    5.3.1 细菌回染实验结果  54
    5.3.2 血细胞密度  54-55
    5.3.3 血液生理生化结果  55-62
  5.4 讨论  62-64
第6章 结语与展望  64-66
  6.1 结语  64
  6.2 展望  64-66
参考文献  66-73
致谢  73

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