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氨磷汀和峰龄多糖对人粒—巨噬祖细胞的刺激增殖及化疗保护作用

作　者: 黄成垠
导　师: 陈宝安
学　校: 东南大学
专　业: 临床检验诊断学
关键词: 氨磷汀 峰龄多糖 粒-巨噬祖细胞 HL-60细胞 细胞保护
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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内容摘要


目的:研究氨磷汀(Amifostine,化学代号WR-2721)和峰龄多糖(Fengling polysaccharide,FLPS)对人粒-巨噬祖细胞(CFU-GM)的刺激增殖及化疗保护作用。方法:(1)取机采外周血干细胞样本,应用淋巴细胞分离液(Ficoll)分离单个核细胞(MNC),经与WR-2721和FLPS作用后,采用甲基纤维素半固体培养法测定CFU-GM集落产率。观察WR-2721和FLPS对人CFU-GM的刺激增殖作用。(2)WR-2721及FLPS处理的MNC,与化疗药物(依托泊甙,VP16)作用后,测定CFU-GM集落产率,研究WR-2721和FLPS对人CFU-GM的保护作用。(3)采用XTT法检测细胞增殖及药物敏感性,用Annexin/PI双染色法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期,研究WR-2721对白血病细胞系HL-60细胞增殖与凋亡的影响,观察WR-2721对HL-60细胞有无保护作用。(4)含有FLPS的HL60细胞悬液与VP16作用14h后,用XTT法检测细胞存活率,观察FLPS对HL60细胞的化疗损伤有无保护作用。结果:(1)经0.01-5.0mmol/L WR-2721、37℃作用30分钟的MNC以及FLPS浓度为0.5-25μg/ml时CFU-GM集落数均显著高于对照组,p<0.05,且集落较大。CFU-GM平均集落数在对照组,WR-2721(1mmol/L)组,FLPS(5μg/ml)组和WR-2721+FLPS组分别为每105 MNC 91.4±50.4,119.8±62.9,143.2±76.4和179.2±97.6,与对照组相比,各组间差异有显著性,p<0.05;WR-2721+FLPS组CFU-GM集落数显著高于WR-2721和FLPS组,p值分别小于0.01和0.05。(2)经WR-2721和FLPS处理的MNC与VP1637℃作用14h后,CFU-GM集落产率均明显高于VP16对照组,CFU-GM集落数在VP16对照组、空白对照组、WR-2721+VP16组、FLPS+VP16组和WR-2721+FLPS+VP16组分别为每105MNC 30.9±22.5、83.2±43.8、64.6±41.2、55.3±33.5和78.3±48.2,与VP16对照组相比,P值均<0.01。(3)WR-2721对HL-60细胞增殖呈浓度时间依赖性抑制,0.5mmol/L WR-2721、37℃处理30min后的HL-60细胞对VP16的敏感性增强,细胞存活率减少50%的VP16浓度(IC50)由52.5μg/ml下降为40.5μg/ml;5.0mmol/L的WR-2721作用72后,早期细胞凋亡由5.5%±1.9%增加至48.5%±8.4%(p<0.001),晚期细胞凋亡由1.2%±0.5%增加至39.0%±4.0%(p<0.001),并出现G2-M期细胞阻滞。(4)含和不含峰龄多糖的HL60细胞悬液与VP16作用14h后的细胞存活率无差异,重复21次的平均值分别为(90.5±2.9)%、(88.0±2.3)%,p >0.05。结论:(1)WR-2721和FLPS对人粒-巨噬祖细胞具有明显的刺激增殖及协同作用。(2)WR-2721和FLPS对人粒-巨噬祖细胞具有明显化疗保护及协同保护作用。(3)WR-2721能增强HL-60细胞对VP16的敏感性,并可通过G2-M期阻滞,诱导细胞凋亡,从而抑制HL-60细胞的增殖;(4)FLPS对HL60细胞的化疗损伤无保护作用。

全文目录


中文摘要  4-5
英文摘要  5-7
缩略词  7-9
前言  9-10
文献综述  10-15
材料与方法  15-19
实验结果  19-27
讨论  27-29
结论  29-30
致谢  30-31
参考文献  31-34
作者简介  34-35
附录  35

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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