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硫酸酯化多糖体外抗HIV-1和其它性病病原体活性的实验研究

作　者: 房世杰
导　师: 汪旭；贲昆龙
学　校: 云南师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 人免疫缺陷病毒(HIV) 性传播疾病 抗HIV药物 杀微生物剂 硫酸多糖化合物 白色念珠菌 HSV-II
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要


艾滋病是目前世界上最危险的传染性疾病之一，主要通过性行为、血液和母婴传播。虽然现在HIV疫苗的研制还在进行中，但药物抗HIV已取得一定的成果。如高效抗逆转录病毒疗法（HAART）。由于HIV具有高度的复杂性和变异性，容易出现抗药性。且药物治疗HIV存在药物副作用大、费用昂贵和无法彻底清除病毒等问题，因此我们面临最大的挑战不仅仅是保证抗病毒药物的疗效，更重要的是怎样有效的预防HIV的感染。杀微生物剂（Microbicides）是指性生活前应用于阴道、宫颈或者直肠内，能够直接杀灭或使HIV-1等病毒和细菌类病原体失活的、人工合成的或天然的物质。目前全世界还没有一种杀微生物剂上市，2006年报道的进入临床和正在研制中的杀微生物剂共有62种，有5种进入临床Ⅲ期试验，4种进入Ⅱ期试验，有超过20种的候选物进入了临床Ⅰ期研究。 本课题采用了合胞体形成抑制实验法、MTT比色法和时间过程及预作用方法，对几种硫酸多糖进行了研究。结果表明，待测样品306A、306B、306G、K1、F1、C1、SH1、Q4-1和LD相较其它待测样品显示出较好的抑制HIV-1ⅢB诱导C8166细胞形成合胞体的效果，其EC50值分别为0.10、0.47、0.54、0.75、0.23、0.16、0.08、0.22、0.21、6.23μg／ml。相较而言，306A、306B、306G、K1、F1、C1、SH1及Q4-1几种待测化合物，其治疗指数TI值分别为2123、1867、1333、3236、6512、14172、4545、6023，其中C1表现出较强的抑制HIV-1ⅢB诱导C8166细胞形成合胞体的效果，其TI值超过了阳性对照AZT。而化合物F1和Q4-1从抑制HIV-1ⅢB诱导C8166细胞形成合胞体的方面来看，其TI值已经接近阳性对照AZT的效果。除了对HIV-1ⅢB有抑制作用，待测化合物K1、306B、SH1和Q4-1对HSV-Ⅱ也有一定的抑制作用，其中，化合物K1对HSV-Ⅱ的EC50值达到85.69μg／ml，而化合物Q4-1、306B和SH1的EC50值分别为125.25、167.69和117.07μg／ml。同时，我们对待测化合物306A、306G、K1、C1、SH1、Q4-1及LD进行了白色念珠菌抑制实验，但结果显示，这些样品对白色念珠菌并没有明显的抑制作用。 为了初步确定待测样品在病毒复制周期中的作用位点，即待测化合物先与细胞作用后抑制了病毒与细胞的结合位点，还是待测化合物先与病毒作用，从而达

全文目录


中文摘要  5-7
Abstract  7-9
第一部分 研究背景  9-20
  人艾滋病及杀微生物剂的研究概况  9-20
    1.1 人艾滋病的研究背景  9-10
    1.2 AIDS病毒的基础知识  10-13
      1.2.1 HIV-1病毒颗粒  10-12
      1.2.2 HIV-1基因组结构  12
      1.2.3 HIV-1的生活周期  12-13
    1.3 杀微生物剂的研究背景  13-16
      1.3.1 杀微生物剂的概念  13
      1.3.2 杀微生物剂研究原理  13-15
      1.3.3 杀微生物剂研究概况  15-16
    1.4 硫酸多糖化合物抗HIV-1活性作用机理研究进展  16-20
      1.4.1 硫酸多糖抗HIV-1活性作用机理  16-20
第二部分  20-50
  硫酸酯化多糖体外抗HIV-1和其它性病病原体活性的实验研究  20-50
    2 实验材料及技术路线  20-26
      2.1 实验材料  20-21
        2.1.1 实验样品与试剂  20-21
        2.1.2 实验用病毒和细胞  21
        2.1.3 实验器材  21
      2.2 技术路线  21-26
        2.2.1 技术路线流程图  21-22
        2.2.2 化合物的H9／HIV-1_(ⅢB)病毒体外检测  22-24
        2.2.3 体外抗白色念珠菌的实验方法  24
        2.2.4 体外抗单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)的实验方法  24-25
        2.2.5 MTT法检测化合物对Vero细胞的毒性作用  25-26
        2.2.6 化合物抗HIV-1_(ⅢB)作用机理初探  26
    3 实验结果  26-47
      3.1 最适感染复数的确定  26-27
      3.2 化合物对HIV-1_(ⅢB)诱导C8166细胞形成合胞体的抑制作用及其对C8166细胞的毒性作用结果  27-38
      3.3 化合物体外抗白色念珠菌的作用结果  38-40
      3.4 化合物体外抗单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)的作用  40-44
      3.5 时间过程结果  44
      3.6 待测化合物与病毒或细胞预作用实验结果  44-47
    4 讨论  47-50
      4.1 待测化合物对HIV-1_(ⅢB)的抑制作用  48-49
      4.2 待测化合物的作用靶点  49-50
致谢  50-51
参考文献  51-55

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