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从中草药中筛选基质金属蛋白酶抑制剂

作　者: 金峰海
导　师: 房学迅
学　校: 吉林大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 基质金属蛋白酶天然化合物白附子
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

MMPs的生物功能除对细胞外基质（ECM）的降解外,它们在调控细胞因子、生长因子、激素和细胞粘附分子受体等的合成和分泌中发挥重要作用,进而参与细胞凋亡、形态发生、增殖和发育等一系列病理和生理过程。MMPs在肿瘤的发生、发展中的关键作用已被确立。本论文主要应用基质金属蛋白酶为分子靶点,重点应用酶学手段,从独特的天然化合物文库中筛选出能够抑制基质金属蛋白酶活性的先导化合物,建立基质金属蛋白酶活性的检测方法,建立酶反应动力学实验,建立抑制剂的筛选体系。对于已筛选出的复合的药源化合物白附子,筛选出其抑制MMP的活性组分,通过将有活性的组分梯度加入MMP活性检测反应,测出其IC₅₀。对于不同的MMP,求得此活性组分不同的IC₅₀,最终确定此类组分对基质金属蛋白酶抑制作用的特异性。

全文目录

第一章前言  8-21
  1. 基质金属蛋白酶(MMP)  8-16
    1.1 基质金属蛋白酶家族(MMPs)  8-11
    1.2 MMPs合成抑制剂  11-13
    1.3 膜型基质金属蛋白酶  13-14
    1.4 MT3-MMP  14-16
  2. 抑制剂  16-19
    2.1 抑制剂类型  16
    2.2 可逆抑制  16-18
    2.3 不可逆抑制  18-19
    2.4 抑制剂的种类  19
  3. 本论文的研究目的和策略  19-21
第二章酶反应动力学实验  21-35
  1. 材料  21-22
    1.1 耗材  21
    1.2 仪器  21
    1.3 软件  21-22
    1.4 试剂  22
  2. 方法  22-27
    2.1 底物  22-23
    2.2 计算 Km 和 Kcat/Km  23-24
    2.3 计算活化能  24-25
    2.4 计算 Ki  25-27
    2.5 蛋白浓度的测量  27
  3. 结果  27-34
  4. 讨论  34-35
第三章天然化合物文库中筛选 MMP 抑制剂  35-44
  1. 材料  35-37
    1.1 耗材  35
    1.2 仪器  35-36
    1.3 试剂  36-37
  2. 方法  37-39
    2.1 关白附分离提取  37
    2.2 细胞培养  37-38
    2.3 基质金属蛋白酶活性实验  38
    2.4 MTT 实验  38-39
  3. 结果  39-42
  4. 讨论  42-44
参考文献  44-50
PUBLICATIONS  50-51
致谢  51-52
中文摘要  52-55
ABSTRACT  55-56

从中草药中筛选基质金属蛋白酶抑制剂

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