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海萝多糖的提取分离及其生理活性的研究

作　者: 颜璐璐
导　师: 余杰
学　校: 汕头大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 海萝多糖提取结构生理活性功能性食品
分类号: TQ28
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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引　用: 2次
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内容摘要

海萝多糖具有重要的科学价值与应用价值,对丰富海藻药物新品种和海藻类健康食品的开发具有重要的现实意义。本文分别对海萝多糖的提取工艺,分离纯化与结构分析,包括体外抑菌活性、体外抗氧化活性、体内抗氧化及对免疫调节功能的影响、抗突变作用等生理活性等多方面进行研究,并以小鼠为实验对象对海萝多糖进行安全性评价,最后在此基础上进一步研制了复合多糖含片、复合多糖果冻等多糖类功能性食品。对海萝多糖的提取研究中采用溶剂提取法、微波提取法和复合酶法提取三种方法,提取所得海萝多糖得率分别可达29.8%、28.1%和31.4%,其中采用酶法提取得率最高,且提取条件温和,有效保存多糖生物活性,并可去除部分蛋白,便于后续纯化工作的进行,是一种理想的提取方法。海萝多糖分离纯化显示,海萝多糖主要含由6-硫酸基-琼脂糖组成,含3,6-内醚-L-半乳糖和6-硫酸基-D-半乳糖两种组分。抑菌实验结果显示,海萝多糖对大肠杆菌等菌有良好的抑制作用,抑菌率可达64.9%。体外抗氧化实验结果显示具有较好的抗氧化活性。其中,清除羟自由基活性最强,清除率达70%,其次是清除超氧阴离子活性,清除率达61.5%,并具有一定抗脂质过氧化能力。小鼠实验结果证实,海萝多糖有明显的体内抗氧化及增强机体免疫功能的作用,实验组与对照组相比差异极显著。海萝多糖对由环磷酰胺诱发的微核率和精子畸形率也有着显著的抑制作用,具有很好的抗突变作用。由急性毒性实验可知,小鼠对海萝多糖的最大耐受量大于60g/kg,说明海萝多糖属无毒级。以此基础上研制成以海萝多糖为主的复合多糖含片、复合多糖营养保健果冻功能性食品,丰富海藻类健康食品的种类。本文对海萝多糖进行较全面深入的研究,将为海萝这一珍贵海洋藻类的开发与利用提供一定理论依据。

全文目录

目录  2-4
中文摘要  4-5
Abstract  5-7
缩略语  7-8
第1章前言  8-25
  1．1 海藻生物活性物质的研究概况  8-11
    1．1．1 海藻生物活性物质  8-11
    1．1．2 海藻生物活性物质的开发对人类健康的重要意义  11
  1．2 多糖的生理功能及海藻多糖研究概况  11-17
    1．2．1 多糖在生命活动中的重要生理作用  11-13
    1．2．2 海藻多糖及其生物活性研究进展  13-17
  1．3 海萝及其研究概况  17-22
    1．3．1 历史记载与生活习性  18
    1．3．2 化学成分  18-20
    1．3．3 海萝的生物活性研究进展  20-22
    1．3．4 应用  22
  1．4 本课题研究意义  22-23
  1．5 研究内容及研究目标  23-25
第2章实验材料、主要仪器与试剂  25-26
  2．1 实验材料  25
  2．2 主要仪器  25
  2．3 主要试剂  25-26
第3章实验方法  26-38
  3．1 海萝多糖提取工艺研究  26-27
    3．1．1 提取工艺流程  26
    3．1．2 提取方法  26-27
    3．1．3 实验参数的设定及计算  27
  3．2 多糖含量测定方法的比较  27-28
    3．2．1 海萝多糖的提取  27
    3．2．2 苯酚-硫酸法测定多糖含量  27
    3．2．3 蒽酮-硫酸法测定多糖含量  27-28
  3．3 海萝多糖的分离纯化与结构鉴定  28-29
    3．3．1 提取分离  28
    3．3．2 糖含量测定  28
    3．3．3 纯化  28
    3．3．4 纯度测定  28
    3．3．5 分子量测定  28
    3．3．6 单糖组成分析  28-29
    3．3．7 结构测定  29
    3．3．8 各组分含量测定  29
  3．4 海萝多糖生理活性的研究  29-34
    3．4．1 海萝多糖的制备  29
    3．4．2 体外抑菌活性实验  29-31
    3．4．3 体外抗氧化活性实验  31-32
    3．4．4 体内抗氧化及对免疫调节功能的影响实验  32-33
    3．4．5 抗突变作用实验  33-34
  3．5 海萝多糖安全性评价  34-35
    3．5．1 实验方法  34-35
    3．5．2 观察指标  35
  3．6 多糖在功能性食品的应用  35-38
    3．6．1 复合多糖含片的研制  35-36
    3．6．2 复合多糖果冻的研制  36-38
第4章结果与讨论  38-67
  4．1 海萝多糖提取工艺研究  38-45
    4．1．1 溶剂法提取海萝多糖的研究  38-42
    4．1．2 微波提取海萝多糖的研究  42-43
    4．1．3 酶法提取海萝多糖的研究  43-45
    1．1．4 各提取方法的比较  45
  4．2 多糖含量测定方法的比较  45-47
    4．2．1 苯酚-硫酸法  45-46
    4．2．2 蒽酮-硫酸法  46
    4．2．3 两种方法比较  46-47
  4．3 海萝多糖的分离纯化与结构鉴定  47-52
    4．3．1 分离纯化  47
    4．3．2 纯度鉴定  47-48
    4．3．3 分子量测定  48-49
    4．3．4 单糖组成分析  49
    4．3．5 结构测定  49-50
    4．3．6 各组分含量测定  50-52
    4．3．7 海萝多糖结构分析  52
  4．4 海萝多糖生理活性的研究  52-60
    4．4．1 体外抑菌活性实验  52-54
    4．4．2 体外抗氧化活性实验  54-57
    4．4．3 体内抗氧化及对免疫调节功能的影响实验  57-59
    4．4．4 抗突变作用实验  59-60
  4．5 海萝多糖安全性评价  60-61
    4．5．1 预备实验结果  61
    4．5．2 最大耐受量的测定  61
    4．5．3 急性毒性实验结果  61
  4．6 多糖在功能性食品中的应用  61-67
    4．6．1 复合多糖含片的研制  61-65
    4．6．2 复合多糖果冻的研制  65-67
第5章小结  67-68
参考文献  68-72
附录  72-74
致谢  74

海萝多糖的提取分离及其生理活性的研究

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