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中缅树鼩UCPs组织分布及系统学研究

作　者: 张逊
导　师: 王政昆
学　校: 云南师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 骨骼肌冷驯化系统学研究组织分布解偶联蛋白肝脏系统进化分析总蛋白含量分子水平系统发生树
分类号: Q951.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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内容摘要

本论文从分子水平探讨冷驯化对解偶联蛋白表达的影响,同时探讨UCP1、UCP2、UCP3在BAT、肝脏、骨骼肌和脑中的组织分布情况,以及对中缅树鼩解偶联蛋白基因的系统进化分析。本论文主要分三个部分: 1.冷驯化对中缅树鼩肝脏、BAT和骨骼肌的总RNA和总蛋白含量的影响。 2.中缅树鼩UCP1,UCP2和UCP3在肝脏、BAT、骨骼肌和脑四种组织中的分布。 3.依据UCP1对中缅树鼩进行系统发育研究及解偶联蛋白族的系统进化研究。主要结果: 1.中缅树鼩经冷驯化28后,体重、肝脏和骨骼肌相对重量均显著增加。同时,三种组织中总RNA和总蛋白相对含量也达到显著增加的水平。 2.在BAT、肝脏、骨骼肌和脑四种组织中,检测到UCP1只在BAT中表达:UCP2在除了脑以外的其它三种组织均检测到:UCP3只在骨骼肌和BAT中检测到。 3.UCP1RT-PCR后测序得到一段465bp的序列,将该序列与GeneBank中可利用的其它物种排序,构建了系统发生树。由系统树可见,中缅树鼩的进化地位与灵长类较接近。同一类型基因中进化关系较近的物种首先聚在一起。

全文目录

摘要  5-9
第一章前言  9-12
第二章材料与方法  12-17
  2．1 动物处理  12
  2．2 总RNA抽提及含量测定  12
  2．3 总蛋白抽提及含量测定  12-13
  2．4 PCR引物设计及合成  13
  2．5 UCP1的RT-PCR  13-14
  2．6 UCP2的RT-PCR  14
  2．7 UCP3的RT-PCR  14-15
  2．8 PCR产物的纯化及光密度扫描  15
  2．9 测序  15
  2．10 数据分析及系统进化分析  15-17
第三章中缅树鼩UCP1，UCP2，及UCP3在肝脏、BAT、骨骼肌和脑中的分布  17-25
  3．1 材料与方法  17
  3．2 结果  17-21
    3．2．1 RNA完整性的检验  17-18
    3．2．2 UCP1的组织分布  18-19
    3．2．3 UCP2的组织分布  19-20
    3．2．4 UCP3的组织分布  20-21
  3．3 讨论  21-25
第四章冷驯化对中缅树鼩肝脏、BAT和骨骼肌总RNA和总蛋白含量的影响  25-39
  4．1 材料与方法  26
  4．2 结果  26-36
    4．2．1 体重、肝脏及BAT相对重量的变化  26-30
    4．2．2 总RNA和总蛋白含量变化  30-36
  4．3 讨论  36-39
第五章依据 UCP1对中缅树的进行系统发育研究  39-50
  5．1 材料与方法  40
  5．2 结果  40-46
    5．2．1 中缅树鼩UCP1RT-PCR结果  40-41
    5．2．2 中缅树鼩UCP1的序列测定  41
    5．2．3 中缅树鼩UCP1 cDNA序列中对应的UCP1保守序列  41-42
    5．2．4 中缅树鼩UCP1 与其它物种UCPs序列相似性的比较  42-44
    5．2．5 中缅树鼩UCP1 cDNA部分序列构建系统发生树  44-46
  5．3 讨论  46-50
第六章综述  50-60
参考文献  60-66

中缅树鼩UCPs组织分布及系统学研究

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