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土壤放线菌中抗肿瘤有效成分的分离及结构鉴定

作　者: 胡艳红
导　师: 王正平
学　校: 哈尔滨工程大学
专　业: 应用化学
关键词: 土壤放线菌 有效成分 分离 结构鉴定 高效液相色谱
分类号: TQ464
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
下　载: 258次
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内容摘要


微生物是重要的天然产物资源。微生物品种极其繁多、代谢多样化，其代谢物的化学复杂性和多样性是研制新药取之不尽的宝库。微生物来源的药物在医疗保健中占有重要地位。有大量文献报道，从微生物代谢物中筛选、分离抗肿瘤活性成分具有广阔前景。 针对肿瘤形成机制，通过药理筛选或作用机制-生物活性筛选，从天然产物中寻找抗癌活性成分，是当今我国从天然产物中寻找新型天然药物先进、快速、有效的筛选途径，也是抗肿瘤药物以创新药物为主的战略性转变策略之一。 本文选择我国边远地区土壤放线菌，利用K562（慢性髓系白血病细胞）作为靶细胞，以Vero（非洲绿猴肾细胞）为正常对照细胞，建立一种适合较大量样品处理及筛选方法，筛选具有选择性抑制作用的微生物代谢物。 利用该方法对446株土壤放线菌进行筛选，发现5株活性菌株，2278#菌株具有较强的抑制活性。采用乙酸乙酯提取、硅胶柱层析和高效液相色谱等方法，从发酵液中分离出活性物质HYH-II-49I，通过对HYH-II-49I的理化性质、1H-NMR、13C-NMR及2D-NMR光谱的分析，初步确定为生物碱类化合物，进一步结构鉴定工作正在进行中。

全文目录


第1章 绪论  9-14
  1．1 课题研究背景及意义  9-11
    1．1．1 研究背景  9-10
    1．1．2 目的意义  10-11
  1．2 国内外研究进展  11-12
    1．2．1 国外研究进展  11
    1．2．2 国内研究进展  11-12
  1．3 天然产物中有效成分的分离研究  12-13
    1．3．1 早期的方法  12
    1．3．2 现今的方法  12-13
  1．4 本文的主要工作  13-14
第2章 生物活性微生物代谢物研究进展  14-33
  2．1 微生物生物活性物质的研究进展  14-21
    2．1．1 微生物新生物活性物质的研究概况  14
    2．1．2 生物活性物质的筛选  14-18
    2．1．3 稀有放线菌作为新生物活性物质来源越来越受到重视  18-19
    2．1．4 抗肿瘤抗生素的研究进展  19-21
  2．2 不同生态环境中微生物样本的分离及选择  21-26
    2．2．1 生态系统多样化  22-24
    2．2．2 菌种分离策略  24-26
  2．3 海洋微生物生物活性代谢物研究进展及技术问题  26-32
    2．3．1 海洋微生物代谢物的研究进展迅速  26-27
    2．3．2 海洋微生物代谢物的化学结构多样性和复杂性  27
    2．3．3 海洋微生物代谢物的生物活性研究  27-30
    2．3．4 海洋微生物代谢物研究面临的问题  30-31
    2．3．5 展望  31-32
  2．4 本章小结  32-33
第3章 活性代谢物的体外筛选  33-39
  3．1 材料与方法  33-35
    3．1．1 仪器与试剂  33
    3．1．2 供试土壤放线菌  33-34
    3．1．3 筛选样品的制备  34
    3．1．4 细胞培养及MTT法  34-35
  3．2 结果与讨论  35-37
  3．3 本章小结  37-39
第4章 有效成分的提取、分离纯化  39-48
  4．1 发酵  39-40
    4．1．1 材料与方法  39
    4．1．2 结果与讨论  39-40
  4．2 2278~#菌种的提取  40-42
    4．2．1 材料与方法  40-41
    4．2．2 结果与讨论  41-42
  4．3 有效成分的硅胶柱分离制备  42-44
    4．3．1 材料与方法  42
    4．3．2 结果与讨论  42-44
  4．4 活性成分的HPLC分离纯化  44-47
    4．4．1 材料与方法  44
    4．4．2 结果与讨论  44-47
  4．5 本章小结  47-48
第5章 有效成分的结构鉴定  48-60
  5．1 化合物的结构研究  48-49
    5．1．1 化合物的纯度测定  48-49
    5．1．2 结构研究的主要程序  49
  5．2 核磁共振波谱法  49-53
    5．2．1 概述  49-51
    5．2．2 氢谱在利用体液进行药物代谢研究时的应用  51
    5．2．3 碳谱在药物代谢研究中的应用  51-53
  5．3 质谱法  53-56
    5．3．1 概述  53-54
    5．3．2 质谱分析法的特点和用途  54-55
    5．3．3 质谱新方法、新技术及其在药物研究中的作用  55-56
  5．4 化合物HYH-II-49I的理化性质  56-57
  5．5 化合物HYH-II-49I的结构鉴定  57-59
    5．5．1 仪器与试剂  57
    5．5．2 结构鉴定  57-59
  5．6 本章小结  59-60
结论  60-61
参考文献  61-66
攻读硕士学位期间发表的论文  66-67
致谢  67-68
附录  68-75

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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 制药化学工业 > 生物制品药物的生产
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