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当归多糖在合成当归多糖铁复合物前后的结构比较

作　者: 郭丹
导　师: 王凯平
学　校: 华中科技大学
专　业: 药剂学
关键词: 当归多糖分离纯化分子量单糖组成连接糖苷键糖残基
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

当归多糖是中药当归发挥补血活血作用的活性成分。参照已上市的多糖铁复合物力菲能,本实验室以当归多糖和三氯化铁为原料成功合成了当归多糖铁复合物,经药理实验证实当归多糖铁复合物确有显著的补铁作用,并能产生协同补血的作用。本论文首次报道了当归多糖ASP1和ASP2的结构,并首次考察了多糖铁复合物中的多糖结构,对合成当归多糖铁复合物前后的当归多糖的结构进行比较,为研究当归多糖铁复合物在分子水平上的作用机理提供理论依据。第一部分当归多糖ASP1、ASP2的提取分离纯化及其结构鉴定由水提醇沉法得到的当归粗多糖,经由碱沉酸调除去蛋白质后得到一定纯度的当归多糖,通过Sephadex G-50葡聚糖凝胶柱洗脱,得到分子量不同的当归多糖ASP1和ASP2。采用高效凝胶色谱测定ASP1的分子量,结果显示ASP1分子量单一,重均分子量约为7.8×104Da;将ASP1水解衍生化后进行气相色谱分析,结果表明ASP1的单糖组成及比例为阿拉伯糖:葡萄糖:半乳糖=1:5.68:3.91;由Smith降解反应的结果推测,ASP1的连接方式有1→4连接和1→6连接;由甲基化反应的结果可推测,ASP1的主链主要由1→4连接的葡萄糖和1→6连接的半乳糖组成,其摩尔比约为2:1;红外光谱证实,ASP1主要为含有α、β糖苷键的吡喃糖环结构,其中不含甘露糖;核磁共振谱结果表明ASP1中含有以下结构:-α-Ara-(1→4)-β-Gala- / -β-Gala-(1→4)-α-Glu- / -α-Glu-(1→6)-β-Gala-采用葡聚糖凝胶柱法测定ASP2的分子量,结果显示ASP2分子量单一,重均分子量约为1620Da;将ASP2水解衍生化后进行气相色谱分析,结果表明ASP2的单糖组成为葡萄糖;由Smith降解反应的结果推测,ASP2的连接方式有1→4连接和1→6连接;由甲基化反应的结果可推测,ASP2是以1→6连接为主,有部分1→4连接的直链葡聚糖;红外光谱证实,ASP2主要为含有α糖苷键的吡喃糖环结构,其中不含甘露糖;核磁共振谱结果表明ASP2中含有以下结构:-α-Glu-(1→6)-α-Glu-第二部分当归多糖铁复合物外层鞘状多糖ASP3的分离纯化及其结构鉴定当归多糖铁复合物是以FeOOH聚合铁核为结构中心,在聚合铁核上稳定螯合了一层多糖链形成铁核分子,铁核分子外部再包绕一层亲水性的鞘状多糖链。当归多糖铁复合物经Sephadex G-50葡聚糖凝胶柱洗脱,得铁核和外层鞘状多糖ASP3。采用葡聚糖凝胶柱法测定ASP3的分子量,结果显示ASP3分子量单一,重均分子量约为1620Da;将ASP3水解衍生化后进行气相色谱分析,结果表明ASP3的单糖组成为葡萄糖;由Smith降解反应的结果推测,ASP3的连接方式有1→4连接和1→6连接;由甲基化反应的结果可推测,ASP3是以1→4连接为主,有部分1→6连接的直链葡聚糖;红外光谱证实,ASP3主要为含有α糖苷键的吡喃糖环结构;核磁共振谱的结果说明ASP3中至少有3种不同化学环境的糖残基。第三部分当归多糖ASP1、ASP2与当归多糖铁复合物外层鞘状多糖ASP3的结构比较ASP1的重均分子量约为7.8×104Da;ASP2和ASP3的重均分子量为1620 Da。ASP1的单糖组成及比例为阿拉伯糖:葡萄糖:半乳糖=1:5.68:3.91;ASP2和ASP3的单糖组成均为葡萄糖。ASP1的主链主要由1→4连接的葡萄糖和1→6连接的半乳糖组成,其摩尔比约为2:1; ASP2由1→6连接的葡萄糖和少量1→4连接的葡萄糖组成;ASP3由1→4连接的葡萄糖和少量1→6连接的葡萄糖组成。ASP1主要为含有α、β糖苷键的吡喃糖环结构;ASP2和ASP3主要为含有α糖苷键的吡喃糖环结构,三者均不含甘露糖。合成当归多糖铁复合物前,当归多糖包含ASP1和ASP2两部分;合成当归多糖铁复合物后,经葡聚糖凝胶柱洗脱后为铁核和外层鞘状多糖ASP3。在合成当归多糖铁复合物的过程中,ASP1与聚合铁核发生螯合形成稳定的铁核分子,ASP2则包绕在铁核分子外部形成鞘状层结构。当归多糖铁复合物经过葡聚糖凝胶柱洗脱时,铁核外层的鞘状多糖ASP3被洗脱下来,在理论上ASP2与ASP3的结构一致。

全文目录

中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-10
前言  10-12
第一部分当归多糖ASP1、ASP2 的提取分离纯化及其结构鉴定  12-38
  1. 当归多糖ASP1、ASP2 的提取分离纯化及分子量测定  12-17
  2. 当归多糖ASP1 的结构鉴定  17-28
    2.1 当归多糖ASP1 的化学分析  17-21
    2.2 当归多糖ASP1 的光谱分析  21-27
    2.3 结论与讨论  27-28
  3. 当归多糖ASP2 的结构鉴定  28-38
    3.1 当归多糖ASP2 的化学分析  28-30
    3.2 当归多糖ASP2 的光谱分析  30-37
    3.3 结论与讨论  37-38
第二部分当归多糖铁复合物外层鞘状多糖ASP3 的分离纯化及其结构鉴定  38-48
  1. 当归多糖铁复合物的合成  38-39
  2. 当归多糖铁复合物外层鞘状多糖ASP3 的分离纯化及分子量测定  39-41
  3. 当归多糖铁复合物外层鞘状多糖ASP3 的结构鉴定  41-48
    3.1 当归多糖铁复合物外层鞘状多糖ASP3 的化学分析  41-44
    3.2 当归多糖铁复合物外层鞘状多糖ASP3 的光谱分析  44-47
    3.3 结论与讨论  47-48
第三部分当归多糖 ASP1、ASP2 与当归多糖铁复合物外层鞘状多糖 ASP3 的结构比较  48-50
研究总结  50-52
参考文献  52-57
综述及参考文献  57-75
致谢  75-76
附件发表论文  76

当归多糖在合成当归多糖铁复合物前后的结构比较

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