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白血病儿童骨髓基质细胞对白血病细胞的保护作用及细胞粘附分子VLA-4抗体对其保护作用影响的研究

作　者: 李仲霞
导　师: 贾秀红
学　校: 滨州医学院
专　业: 儿科学
关键词: 儿童白血病 BMSC 细胞粘附分子(VLA-4)抗体化疗
分类号: R733.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:本实验通过研究BMSC对白血病细胞的保护作用,通过检测VLA-4抗体干预后白血病细胞凋亡率的改变,研究VLA-4抗体对BMSC保护作用的影响;通过检测抗凋亡基因Survivin、Bcl-2的表达变化,进一步阐明可能机制,为深入研究儿童白血病及其临床治疗提供理论依据。方法:一、收集白血病儿童骨髓标本,并进行分离培养,提取BMSC与白血病细胞并用倒置相差显微镜观察细胞形态;实验选第2代的BMSC和第4~6代的白血病细胞。二、采用荧光染色、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,研究BMSC对白血病细胞的保护作用及VLA-4抗体对其保护作用影响;三、应用RT-PCR法研究各组白血病细胞Survivin、Bcl-2基因的表达情况,从基因水平来说明BMSC、VLA-4抗体、化疗药物三者之间的关系以及它们对白血病细胞凋亡的影响。结果:一、体外单独培养原代白血病细胞生存时间较短,生长状态欠佳;在BMSC存在情况下,其生存时间延长,状态比较好。二、BMSC组的凋亡率低于白血病细胞组(P<0.05);抗体组、抗体加药物组白血病细胞凋亡率较BMSC组明显增高(P<0.05),抗体加药物组、抗体组、药物组三者两两比较均有显著差异(P<0.05);白血病细胞组、抗体加药物组、抗体组、药物组凋亡率随时间的延长而增加(P<0.01)。三、29例急性白血病中,23例有Survivin基因的表达,表达率高达79%;28例有Bcl-2基因的表达,表达率约97%。BMSC组Survivin、Bcl-2表达量明显高于其他各组(上清组除外)(P<0.05);抗体组、抗体加药物组Survivin、Bcl-2表达量较BMSC组低(P<0.05),且抗体加药物组、抗体组、药物组三者两两比较均有显著差异(P<0.05);以抗体加药物组表达量最少,与BMSC组比,Survivin表达降低了56%,Bcl-2表达量则降低了71%。结论:一、白血病患儿BMSC体外对患儿的白血病细胞具有保护作用。二.、VLA-4抗体在体外可促进白血病细胞的凋亡;三、VLA-4抗体能增强VP-16诱导的白血病细胞的凋亡敏感性;四、VLA-4抗体可通过下调Survivin、Bcl-2的表达发挥促凋亡作用;

全文目录

中文摘要  5-7
Abstract  7-9
1- 引言  9-11
2- 原代细胞的培养及形态观察  11-18
  2.1 材料  11-13
  2.2 方法  13-14
  2.3 结果  14-16
  2.4 讨论  16-18
3- BMSC 及 VLA-4 抗体对白血病细胞凋亡的影响  18-33
  3.1 材料  18-19
  3.2 方法  19-20
  3.3 结果  20-28
  3.4 讨论  28-33
4- BMSC 及 VLA-4 抗体对白血病细胞凋亡影响的机制探讨  33-45
  4.1 材料  33-35
  4.2 方法  35-37
  4.3 结果  37-40
  4.4 讨论  40-45
5- 结论  45-46
6- 参考文献  46-53
缩略语中英文对照  53-55
攻读硕士期间撰写及发表的论文  55-56
致谢  56

白血病儿童骨髓基质细胞对白血病细胞的保护作用及细胞粘附分子VLA-4抗体对其保护作用影响的研究

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