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复式PCR检测疟原虫的应用研究
作 者: 张山鹰
导 师: 陆惠民
学 校: 苏州大学
专 业: 病原生物学
关键词: 复式PCR 间日疟原虫 恶性疟原虫 检测
分类号: R382.31
类 型: 硕士论文
年 份: 2001年
下 载: 66次
引 用: 0次
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内容摘要
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本研究通过建立复式PCR检测系统,一次扩增同时检测恶性疟原虫(P.f.)和间日疟原虫(P.v.),并对现场应用的效果进行评价。采用生理盐水处理滤纸干血滴,设计针对P.f. pRBK-14中度重复序列基因和P.v.线粒体细胞色素C氧化酶基因COⅢ合成引物,调整、优化反应体系,混合扩增检测P.f.和P.v.,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,P.f.在210bp,P.v.在370bP位置分别出现特异性条带,混合感染血样在210bP和370bP同时出现特异性条带。扩增食蟹猴疟原虫(P.c.)、鼠伯氏疟原虫(P.b.)及正常人白细胞均无特异性条带出现。不同地理株的P.f.和P.v.均可检测。可被检测的最低原虫密度P.f.为5.5×10-7,P.v.为1.5×10-6;现场样本检测的敏感性和特异性P.f.分别为100%和98.7%,P.v.为97.9%和98.7%。该系统用于闽南疟区现场监测,具有采样方便、易于操作、稳定性好,检测大批样本效率较传统镜检高2倍,且成本低于镜检,有推广应用前景,可用于疟疾监测、分子流行病学调查、献血员筛选和虫种鉴定等。
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全文目录
中文摘要 3-4 英文摘要 4-5 研究背景 5-8 第一部分: 复式PCR检测疟原虫的实验研究 8-15 第二部分: 复式PCR检测疟原虫的现场研究 15-23 结论 23-24 参考文献 24-27 综述: 疟疾分子流行病学研究概况 27-36 学习期间公开发表的论文 36-46 致谢 46
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学寄生虫学 > 医学原虫学 > 孢子虫 > 疟原虫
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