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新疆黑槌虫草发酵工艺及药效学

作　者: 常玮
导　师: 闻建平；展江宏
学　校: 天津大学
专　业: 化学工程
关键词: 新疆黑槌虫草菌 发酵工艺优化 有效成分分析 药效学
分类号: TQ920.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 48次
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内容摘要


新疆黑槌虫草（Cordyceps gracilis）是我国一种传统珍稀药用真菌,属子囊菌门（Ascmycotina）、肉座菌目（Hypocreales）、麦角菌科（Clavicipticeae）。新疆黑槌虫草具有提高免疫力、治疗血崩等功效,由于野生环境不断遭到破坏,药源锐减,因此采用发酵技术对新疆黑槌虫草菌种进行大规模的人工培养很有必要。本研究以人工分离培养的新疆黑槌虫草无性型为菌种,采用正交试验,以菌丝量为检测指标,通过摇瓶实验优化了发酵培养基,其组成为:葡萄糖20g/l,玉米粉30g/l,蛋白胨10g/l,豆饼粉20g/l, MgSO4·7H2O 0.02g/l,无水KH2PO4 0.4g/l。在10L全自动发酵罐上进行发酵过程主要影响因素优化,优化的发酵条件为:接种量为15%,发酵温度为26℃,pH6.7,转速为100 rpm,种龄为96h,发酵周期为144h,在上述发酵工艺条件下,黑槌虫草菌丝体产量最高可达3.5%（干重）,比优化前提高了50%。对发酵所获得的新疆黑槌虫草菌丝体进行有效成分分析,结果表明在上述发酵工艺条件下,新疆黑槌虫草菌丝体内主要活性成分的含量分别为虫草多糖含量11.93%,腺苷0.062%,虫草酸5.52%,氨基酸总量25.93%,微量元素Zn 60 ppm,Se 0.3 ppm及多种微量元素,将天然新疆黑槌虫草和冬虫夏草中相应成分进行比较,两者的主要成分基本一致。对发酵得到的新疆黑槌虫草菌丝体的急慢性毒性及药效学进行了初步研究,其急性毒性试验未测出口服的半数致死量,最大耐受量试验未见不良反应。慢性毒性试验表明对小鼠生长、造血系统无明显影响,组织学检查未见引起组织学改变。药效学试验表明有镇静作用,可提高机体的适应能力,增强机体非特异性免疫功能和体液免疫功能。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-8
第一章 文献综述  8-17
  1.1 概述  8-10
  1.2 虫草主要化学成份  10-13
    1.2.1 虫草多糖  10-11
    1.2.2 虫草酸  11
    1.2.3 虫草素  11-12
    1.2.4 氨基酸  12
    1.2.5 微量元素  12-13
    1.2.6 麦角固醇  13
  1.3 虫草的药效学研究概况  13-14
    1.3.1 免疫作用  13
    1.3.2 对肾衰的治疗  13
    1.3.3 抗肿瘤作用  13-14
    1.3.4 抗氧化活性  14
    1.3.5 对心血管系统的影响  14
    1.3.6 其它作用  14
  1.4 虫草真菌人工培养研究概述  14-16
    1.4.1 固体栽培  14-15
    1.4.2 液体深层发酵  15-16
  1.5 课题立项依据  16-17
第二章 新疆黑槌虫草的菌种鉴定  17-21
  2.1 菌种来源  17
  2.2 菌种鉴定方法  17-18
    2.2.1 新疆黑槌虫草有性型形态特征  17
    2.2.2 新疆黑槌虫草无性型形态特征  17
    2.2.3 液体培养形态  17
    2.2.4 回接试验  17-18
  2.3 结果与讨论  18-21
    2.3.1 新疆黑槌虫草有性型形态特征  18-19
    2.3.2 新疆黑槌虫草无性型形态特征  19-20
    2.3.3 液体发酵培养形态特征  20
    2.3.4 回接试验  20-21
第三章 新疆黑槌虫草菌发酵工艺  21-28
  3.1 材料与方法  21-23
    3.1.1 菌株来源  21
    3.1.2 培养基  21
    3.1.3 培养条件  21-22
    3.1.4 收集菌丝体  22
    3.1.5 种龄的确定  22
    3.1.6 发酵终点的判断  22
    3.1.7 碳、氮源筛选  22-23
    3.1.8 C/N 最佳比试验  23
    3.1.9 发酵工艺优化  23
  3.2 结果与讨论  23-28
    3.2.1 种龄的确定  23-24
    3.2.2 发酵终点的确定  24
    3.2.3 碳、氮源筛选结果  24-25
    3.2.4 C/N 最佳比试验结果  25-26
    3.2.5 发酵工艺影响因素的优化  26
    3.2.6 优化工艺验证试验  26-28
第四章 新疆黑槌虫草菌药效成份分析  28-40
  4.1 仪器与试剂  28
    4.1.1 主要仪器  28
    4.1.2 供试材料  28
    4.1.3 主要试剂  28
  4.2 试验方法  28-31
    4.2.1 多糖含量分析  28-29
    4.2.2 腺苷含量的测定方法  29-30
    4.2.3 D-甘露醇含量测定  30
    4.2.4 微量元素测定  30
    4.2.5 氨基酸含量分析与对比试验  30
    4.2.6 新疆黑槌虫草发酵菌丝体与其他虫草化学成分的比较  30-31
  4.3 结果与讨论  31-40
    4.3.1 多糖标准曲线  31-32
    4.3.2 多糖含量测定结果  32
    4.3.3 腺苷含量测定结果  32-33
    4.3.4 D-甘露醇含量测定结果  33
    4.3.5 微量元素含量测定结果  33
    4.3.6 氨基酸含量测定与比较结果  33-36
    4.3.7 新疆黑槌虫草发酵菌丝体与其他虫草化学成分的比较结果  36-40
第五章 新疆黑槌虫草菌的急慢性毒性与药效学试验  40-49
  5.1 供试材料  40
    5.1.1 供试菌粉  40
    5.1.2 试验动物  40
  5.2 实验方法  40-41
    5.2.1 急性毒性试验  40
    5.2.2 最大耐受量试验  40
    5.2.3 慢性毒性试验  40
    5.2.4 对小鼠缺氧耐力的影响  40-41
    5.2.5 对小鼠运动能力的影响  41
    5.2.6 对小鼠的自发活动的影响  41
    5.2.7 对免疫功能的影响  41
    5.2.8 对非特异性免疫功能的影响  41
  5.3 结果与讨论  41-49
    5.3.1 急性毒性试验结果  41-42
    5.3.2 最大耐受量试验结果  42
    5.3.3 慢性毒性试验结果  42-45
    5.3.4 药效学试验结果  45-49
第六章结论与展望  49-51
  一、研究结论  49
  二、展望  49-51
参考文献  51-53
致谢  53

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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 其他化学工业 > 发酵工业 > 一般性问题 > 基础理论
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