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三种食源性致病菌酶联免疫荧光法的分析研究

作　者: 林赛君
导　师: 应国清
学　校: 浙江工业大学
专　业: 制药工程
关键词: 沙门氏菌大肠埃希氏O157菌单核细胞增生李斯特菌检测酶联免疫
分类号: R155
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 61次
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内容摘要

目的:利用酶联免疫MINI-VIDAS法来快速初筛食品中沙门氏菌,大肠埃希氏菌O157和单核增生李斯特菌三种致病菌,以达到缩短检测周期,提高检测效率,确保检测数据的精确性。方法:由六家实验室分别对食品中沙门氏菌,大肠埃希氏菌O157和单核增生李斯特菌的酶联免疫MINI-VIDAS法的灵敏度和特异性的进行验证,并在四种不同污染程度的食品基质中添加标准菌液来检测国标法和酶联免疫MINI-VIDAS法的准确度和适用性。结果:沙门氏菌,大肠埃希氏菌O157和单核增生李斯特菌酶联免疫MINI-VIDAS法的特异性均为100%,沙门氏菌,大肠埃希氏菌O157和单核增生李斯特菌酶联免疫MINI-VIDAS法的准确度分别为100%,99%和99.6%;国标法的准确度分别为:99.8%,96.9%和99.2%。结论:酶联免疫MINI-VIDAS法比国标法的准确度要高,一定程度上能减少检测过程中的致病菌漏检事件,适合在广大质检机构推广使用。

全文目录

摘要  3-4
ABSTRACT  4-8
第一章文献综述  8-13
  1.1 酶联免疫荧光技术研究进展及其应用  8-11
    1.1.1 酶联免疫技术的研究发展  8-9
    1.1.2 酶联免疫荧光技术(ELFA)的特点  9
    1.1.3 ELFA在食品微生物检验中的应用  9-11
      1.1.3.1 对食品中沙门氏菌的检测  9-10
      1.1.3.2 对食品中大肠杆菌O157:H7的检测  10
      1.1.3.3 对食品中单增李斯特菌的检测  10-11
    1.1.4 ELFA的发展前景  11
  1.2 本论文研究的目的、意义及主要研究内容  11-13
第二章实验方法部分  13-23
  2.1 材料与方法  13-15
    2.1.1 材料  13
    2.1.2 培养基和试剂  13-15
  2.2 实验方法  15-23
    2.2.1 实验原理  15
    2.2.2 MINI-VIDAS快速筛选仪酶联免疫检测的操作方法  15-16
    2.2.3 菌落记数方法  16
    2.2.4 沙门氏菌的检测方法  16-19
      2.2.4.1 沙门氏菌的前增菌法和直接增菌法  16-17
      2.2.4.2 沙门氏菌酶联免疫检测方法流程图  17
      2.2.4.3 沙门氏菌酶联免疫MINI-VIDAS法仪器灵敏度检测方法  17-18
      2.2.4.4 沙门氏菌酶联免疫MINI-VIDAS法仪器的特异性检测方法  18
      2.2.4.5 沙门氏菌的准确性和适用性检测方法  18-19
    2.2.5 大肠埃希氏菌O157的检测方法  19-20
      2.2.5.1 大肠埃希氏菌O157的增菌方法  19
      2.2.5.2 大肠埃希氏菌O157酶联免疫检测方法流程图  19-20
      2.2.5.3 大肠埃希氏菌O157酶联免疫MINI-VIDAS法仪器灵敏度的检测方法  20
      2.2.5.4 大肠埃希氏O157菌酶联免疫MINI-VIDAS法仪器的特异性检测方法  20
      2.2.5.5 大肠埃希氏O157菌的准确性和适用性检测方法  20
    2.2.6 单核细胞增生李斯特菌的检测方法  20-23
      2.2.6.1 单核增生李斯特菌的增菌方法  20-21
      2.2.6.2 单核增生李斯特菌酶联免疫检测方法流程图  21-22
      2.2.6.3 单核增生李斯特菌酶联免疫MINI-VIDAS法仪器灵敏度的检测方法  22
      2.2.6.4 单核增生李斯特菌酶联免疫MINI-VIDAS法仪器的特异性检测方法  22
      2.2.6.5 单核增生李斯特菌的准确性和适用性检测方法  22-23
第三章实验结果与分析  23-44
  3.1 沙门氏菌的结果与分析  23-30
    3.1.1 酶联免疫MINI-VIDAS法仪器灵敏度的检测结果分析  23-24
    3.1.2 酶联免疫MINI-VIDAS法仪器的特异性检测结果分析  24-25
    3.1.3 沙门氏菌的准确性和适用性结果分析  25-30
    3.1.4 沙门氏菌酶联免疫MINI-VIDAS法的时效性分析  30
  3.2 大肠埃希氏O157菌的结果与分析  30-37
    3.2.1 酶联免疫MINI-VIDAS法仪器的灵敏度检测结果分析  30-31
    3.2.2 酶联免疫MINI-VIDAS法仪器的特异性检测结果分析  31
    3.2.3 大肠埃希氏O157菌的准确性和适用性检测结果分析  31-37
    3.2.4 大肠埃希氏O157菌酶联免疫MINI-VIDAS法的时效性分析  37
  3.3 单核增生李斯特菌的结果与分析  37-44
    3.3.1 酶联免疫法MINI-VIDAS仪器灵敏度的检测结果分析  37-38
    3.3.2 酶联免疫法MINI-VIDAS仪器的特异性检测结果分析  38-39
    3.3.3 单核增生李斯特菌准确性和适用性检测结果分析  39-43
    3.3.4 单核增生李斯特菌酶联免疫MINI-VIDAS法的时效性分析  43-44
第四章结论  44-46
  4.1 总结  44
  4.2 讨论  44-45
  4.3 体会与建议  45-46
参考文献  46-49
致谢  49-51
发表文章  51

三种食源性致病菌酶联免疫荧光法的分析研究

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