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极低频率电磁场对肝癌细胞凋亡及相关基因表达影响的初步研究

作　者: 卢杏生
导　师: 夏春林
学　校: 苏州大学
专　业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: 极低频电磁场肝细胞癌基因表达细胞凋亡
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的(1)研究极低频率电磁场(extremely low frequency electromagnetic field, ELF)对肝癌细胞生长和凋亡情况的影响,探究ELF对肝癌的可能治疗作用；(2)研究ELF对细胞凋亡相关基因的影响,探索其在肝癌治疗中的作用,揭示ELF对肝癌细胞作用的可能分子机制。方法通过MTT法观察ELF处理过的肝癌细胞系BEL-7402与正常肝细胞系L-02的生长曲线,分析ELF对肝癌细胞与肝细胞生长的影响；通过流式细胞仪技术检测ELF处理过的肝癌细胞系BEL-7402与正常肝细胞系L-02的凋亡情况,分析ELF对肝癌细胞与肝细胞凋亡的影响；采用Real-time PCR和Western-blot技术检测ELF对BEL-7402及L-02凋亡相关基因在mRNA和蛋白表达水平的影响；以免疫组化技术在组织标本中进一步验证。结果(1)L-02细胞经过ELF处理后,与未处理的细胞相比,第11代细胞的生长活力没有明显差别；第20代及30代细胞与未处理细胞相比,生长活力略微下降,但无统计学意义。采用ELF处理BEL-7402细胞后,与未经过ELF处理的细胞相比,第11代细胞生长略减慢,第20代及30代细胞生长明显减慢。(2)L-02细胞经过ELF处理后,第11代、第20代及第30代细胞的凋亡率分别为1.72±1.24%、2.34±1.31%及2.86±1.45%；其中各代细胞凋亡率相比无统计学意义。BEL-7402细胞经过ELF处理后第11代、第20代及第30代细胞的凋亡率分别是5.01±1.53%、8.74±1.29%及11.7±1.69%(与L-02细胞相比,P<0.05)。(3)BEL-7402细胞经过ElF处理后,与未处理组相比较,Bax mRNA和蛋白的表达明显上升及其蛋白表达水平明显提高(P<0.05),而Bcl-2,SODD和Survivin的mRNA及其蛋白表达水平则显著下降(P<0.05)。(4)免疫组化结果显示Bcl-2, SODD及Survivin在肝癌组织中的阳性率明显高于癌旁组织,而Bax的表达明显低于癌旁组织。结论(1)ELF对正常肝细胞系L-02的生长没有影响,ELF对肝癌细胞系BEL-7402的生长有抑制作用。(2)ELF不能影响正常肝细胞系L-02的细胞凋亡,但可以促进肝癌细胞系BEL-7402的细胞凋亡。(3)ELF可以提高Bax mRNA及其蛋白表达水平,降低Bcl-2, SODD及Survivin在mRNA和蛋白水平的表达。(4)ELF在促进肝癌细胞凋亡方面具有重要作用,为ELF在临床治疗肝癌提供了依据和治疗靶点。

极低频率电磁场对肝癌细胞凋亡及相关基因表达影响的初步研究

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