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液滴微流控芯片用于酶活力的测定和细胞包裹
作 者: 龚莹莹
导 师: 刘笔锋
学 校: 华中科技大学
专 业: 生物化学与分子生物学
关键词: 液滴 微流控芯片 PDMS 化学发光 酶活性测定 细胞包裹
分类号: Q503
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要
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液滴微流控芯片是近年来新兴的生物化学分析平台。因其高效率、高通量、少消耗的优点,液滴微流控芯片被应用于多个科学研究领域,比如酶动力学研究、细胞分析、酶免疫检测、DNA分析等。本文中,我们设计制作了基于PDMS材料的流体聚焦式液滴微混合器芯片,利用液滴在蜿蜒通道内运动引起的对流,进行了酶活性的研究及单细胞在液滴内包裹的实验。我们首先优化了芯片结构,使其具有更高的混合效率。使用优化了的芯片,我们探索了液滴微混合器的混合流形,并用蓝墨水与纯水的混合实验及化学发光方法定性定量的证实了该芯片结构与以前设计的相比在混合上的高效性。在确定了液滴微流控芯片作为混合器在混合方面性能后,我们采用辣根过氧化物酶(HRP)/鲁米诺化学发光体系演示了液滴微混合器在对于酶活性测定上的应用前景。通过在线稀释的方法研究了相同浓度下的anti-IgG HRP与HRP的酶活性的不同。结果显示,当HRP与anti-IgG相连后,其活性比HRP降低了4倍。另外,利用该芯片形成的液滴大小可控的特点,我们将其应用在了细胞包裹方面,针对目前在细胞包裹当中出现的问题,例如细胞进样方式,细胞浓度等,我们做了一些探索。我们探讨了不同浓度下,液滴内细胞的包裹情况,选择了最适包裹浓度,为以后进行液滴内单细胞分析打下坚实的基础。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-7 1 引言 7-18 1.1 微流控的发展历史 7-10 1.2 微流控芯片的制作材料 10-11 1.3 微流控芯片制作方法 11-14 1.4 微流控芯片的应用 14-18 2 液滴微流控芯片 18-32 2.1 液滴的形成 19-20 2.2 液滴微流控芯片的应用 20-25 2.3 本文微流控芯片的加工方法 25-30 2.4 本文芯片设计及应用 30-32 3 液滴微流控芯片用于酶活力的测定 32-45 3.1 平台的搭建 32-33 3.2 混合效果及芯片结构的选择 33-37 3.3 液滴微流控芯片用于酶活力的测定 37-44 3.4 小结 44-45 4 液滴微流控芯片用于单细胞的包裹 45-52 4.1 细胞研究的意义 45-46 4.2 系统评价 46-48 4.3 细胞在液滴内的包裹 48-52 5 结论 52-53 致谢 53-54 参考文献 54-62
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中图分类: > 生物科学 > 生物化学 > 一般性问题 > 生物化学技术
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