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白术挥发油的提取、氧化分解及抗肿瘤研究

作　者: 王虹
导　师: 刘焕蓉；阎克里
学　校: 山西大学
专　业: 生药学
关键词: 白术挥发油氧化分解白术挥发油成分分析微量元素抗肿瘤作用
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

白术挥发油是白术的主要活性成分,因其抗肿瘤作用确切、不良反应小,具有开发成中药抗肿瘤新药的良好前景。挥发油性质不稳定、易氧化分解,给新药研发带来困难。针对上述,我们解决挥发油稳定性的研究思路是,让其尽快氧化分解,获得性质稳定的、具有抗肿瘤作用的白术挥发油。具体研究内容如下：1.筛选出白术挥发油最佳提取溶剂和不同提取方法的提取率,分别是乙酸乙酯(2.56%)和超临界CO2萃取(安徽产2.76%)；筛选出最佳氧化分解条件为室外光照(19-27℃),HPLC跟踪检测苍术酮的分解率为98.08%。2.通过HPLC测定氧化分解前后白术挥发油中苍术酮、γ-榄香烯、β-桉叶醇、白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ五种抗肿瘤成分的含量。结果表明,氧化后苍术酮和γ-榄香烯的含量降为零,其它三种成分含量显著增加,其中β-桉叶醇的含量是超临界CO2萃取安徽产最高,是氧化分解前的1527.56倍,白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ的含量是水蒸气蒸馏提取河北产最高,是氧化分解前的4.30倍。3.采用GC-MS技术,对氧化分解前后及不同提取方法的白术挥发油化学成分及含量变化进行了分析比较。研究表明,氧化分解后主要抗肿瘤成分苍术酮和γ-榄香稀的含量平均分别降低了95%和98%,而白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ、广木香内酯、β-桉叶醇和Isovelleral五种成分的总增加量是氧化分解前的3.68-11.04倍。4.采用电感耦合等离子体发射光谱(ICP-AES)对白术生药、挥发油和氧化分解挥发油中Mg, Al、Fe、Cr、Cu、Mn、Ni、Sr、Ti和Zn10种微量元素的含量进行了测定。结果在不同提取方法中,各微量元素含量变化较大。5.采用细胞生物学方法研究氧化分解前后白术挥发油对人源卵巢癌细胞SKOV-3的抗肿瘤作用。结果表明,抑制细胞增殖与诱导凋亡呈时间和剂量依赖关系,MTT法测定表明以挥发油浓度200mg/L抑制率最高,不同浓度以作用72h抑制率最明显；采用流式细胞仪测定氧化分解前后白术挥发油对SKOV-3细胞凋亡和细胞周期的影响,结果挥发油浓度为150mg/L凋亡率最高,细胞周期分别阻滞在G2/M期和S期。

全文目录

摘要  11-12
ABSTRACT  12-14
第一章综述  14-26
  1.1 白术挥发油的化学成分分析  14-17
    1.1.1 不同提取方法中挥发油的化学成分  14-16
    1.1.2 不同产地、不同品种白术挥发油的化学成分  16
    1.1.3 白术中微量元素含量的测定  16-17
  1.2 白术挥发油的药理作用  17-18
    1.2.1 白术挥发油的抗肿瘤作用  17
    1.2.2 白术挥发油中主要成分的抗肿瘤作用  17-18
  1.3 白术挥发油稳定性的研究  18-21
    1.3.1 白术挥发油的氧化分解  18-20
    1.3.2 白术挥发油的包合  20
    1.3.3 白术挥发油包合存在的问题  20-21
  1.4 立题背景  21
  1.5 主要研究内容  21-22
  参考文献  22-26
第二章白术挥发油提取氧化及主要成分的HPLC分析研究  26-44
  2.1 引言  26-27
  2.2 实验部分  27-41
    2.2.1 材料与试剂  27
    2.2.2 仪器  27
    2.2.3 白术挥发油的提取  27-30
    2.2.4 白术挥发油及挥发油有机溶液的氧化分解  30-33
    2.2.5 HPLC测定白术挥发油氧化分解对五种成分含量的影响  33-41
  2.3 小结  41-42
  参考文献  42-44
第三章氧化分解前后白术挥发油的GC-MS成分分析  44-60
  3.1 引言  44
  3.2 实验部分  44-45
    3.2.1 药材  44
    3.2.2 仪器  44
    3.2.3 试剂及材料  44
    3.2.4 氧化分解前后挥发油溶液的制备  44-45
    3.2.5 GC-MS测定条件  45
  3.3 结果与讨论  45-58
    3.3.1 氧化分解前后挥发油溶液稳定性的考察  45
    3.3.2 浙江、湖南、安徽、河北四产地氧化分解前后白术挥发油化学成分分析  45-53
    3.3.3 不同提取方法对不同产地白术挥发油化学成分分析  53-58
  3.4 小结  58
  参考文献  58-60
第四章不同提取方法白术挥发油中微量元素含量的测定  60-66
  4.1 引言  60
  4.2 实验部分  60-62
    4.2.1 试剂  60
    4.2.2 仪器  60
    4.2.3 样品的制备  60-61
    4.2.4 仪器工作条件的选择  61
    4.2.5 元素标准曲线的绘制  61-62
  4.3 结果与讨论  62-64
    4.3.1 四产地白术原生药微量元素分析  62-63
    4.3.2 不同提取方法提取四产地白术挥发油微量元素分析  63-64
  4.4 小结  64-65
  参考文献  65-66
第五章氧化分解前后白术挥发油对人类卵巢癌细胞SKOV-3生物学行为的影响  66-80
  5.1 引言  66
  5.2 实验部分  66-68
    5.2.1 试剂  66
    5.2.2 仪器  66-67
    5.2.3 药物和实验细胞  67
    5.2.4 MTT法比较氧化分解前后白术挥发油对卵巢癌细胞SKOV-3的抑制作用  67
    5.2.5 流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡  67-68
    5.2.6 流式细胞仪(FCM)检测细胞周期  68
  5.3 结果与讨论  68-77
    5.3.1 倒置显微镜下观察SKOV-3的生长情况  68
    5.3.2 不同产地白术挥发油氧化分解前后对SKOV-3细胞增殖的抑制率  68-73
    5.3.3 氧化分解前后白术挥发油对SKOV-3细胞凋亡的研究  73-75
    5.3.4 氧化分解前后白术挥发油对SKOV-3细胞周期的影响  75-77
  5.4 小结  77-78
  参考文献  78-80
总结与展望  80-81
  总结  80
  展望  80-81
攻读学位期间取得的研究成果  81-82
致谢  82-83
个人简历及联系方式  83-85

白术挥发油的提取、氧化分解及抗肿瘤研究

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