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斑点叉尾鮰对几种致病菌疫苗的免疫应答

作　者: 杨军
导　师: 陈昌福；黄辨非
学　校: 华中农业大学
专　业: 渔业
关键词: 斑点叉尾鮰 嗜水气单胞菌 柱状黄杆菌 叉尾鮰爱德华菌 外膜蛋白 被动免疫 组织浆疫苗 免疫预防 免疫应答
分类号: S943
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


利用从嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、柱状黄杆菌(Flavobacteriumcolumnare)和叉尾鮰爱德华菌(Edwardsiella ictaluri)中提取的外膜蛋白(outermembrane protein,OMP)作为免疫原,注射接种斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatusRafinsque),获得凝集抗体和交叉凝集抗体效价较高的血清后,对人工致病的斑点叉尾鮰接种,进行了被动免疫效果的观察。结果表明,从3种致病菌中提取的OMP对斑点叉尾鮰均具有较强的免疫原性,受免鱼血清中存在对3种致病菌的交叉凝集抗体;用致病菌对斑点叉尾鮰人工致病后,对受感染鱼注射高免血清可以降低死亡率,说明了从受免斑点叉尾鮰体内获得的高免血清对传染性疾病具有被动保护作用。从患病的斑点叉尾鮰(Ictalunes punctatus Rafinsque)体内取肝、脾和肾脏等组织,依不同的方法制作组织浆疫苗作为免疫原,注射接种斑点叉尾鮰后,通过测定受免鱼血清中溶菌酶的活性,血液中吞噬细胞的吞噬活性和采用同居感染的攻毒方法,比较了几种组织浆疫苗对斑点叉尾鮰疾病的免疫预防效果。试验结果表明,几种组织浆疫苗对斑点叉尾鮰均具有免疫原性,受免鱼的血清中出现较高的溶菌酶活性,与对照鱼相比,血液中吞噬细胞对吞噬原的吞噬活性和对注射攻毒感染的相对免疫保护率(relative percent survival,RPS)有所上升。说明在斑点叉尾鮰苗种饲养阶段有斑点叉尾鮰病毒病(channal catfish virus diseases,CCVD)存在。将经福尔马林灭活的柱状黄杆菌(formalin killed Flavobacterium columnare,F-FC)、酚灭活的柱状黄杆菌(phenol killed F.columnare,P-FC)和热灭活的柱状黄杆菌(heat killed F.columnare,H-FC)作为免疫原,分别接种斑点叉尾鮰(Ictaluruspunctatus Rafinsque)后,通过测定受免鱼的交叉凝集抗体效价,头肾和血液中吞噬细胞的吞噬活性和用F.columnare活菌攻毒的方法,探讨了斑点叉尾鮰对3种灭活菌苗的免疫应答状况。试验结果表明,对斑点叉尾鮰经腹腔注射接种3种灭活菌苗能刺激受免鱼产生较强的免疫应答,受免鱼产生了对3种菌苗的特异性凝集抗体和交叉凝集抗体,与未接种菌苗的对照鱼相比,受免鱼头肾和血液中吞噬细胞的吞噬活性明显上升,活菌攻毒的结果也证明了受免斑点叉尾鮰对F.columnare已经产生了不同程度的相对免疫保护力(RPS)。

全文目录


摘要  7-8
ABSTRACT  8-10
缩略语表  10-11
第一章 前言  11-21
  1.1 鱼类免疫学研究概述  11-15
    1.1.1 鱼类的免疫组织和器官  11-12
    1.1.2 鱼类的免疫细胞  12-13
    1.1.3 鱼类体液免疫因子  13
    1.1.4 鱼病的免疫防治  13-15
  1.2 斑点叉尾鮰疾病的研究状况  15-19
  1.3 斑点叉尾鮰疾病的免疫预防研究  19-20
  1.4 研究的目的和意义  20-21
第二章 斑点叉尾鮰的被动免疫研究  21-27
  2.1 前言  21
  2.2 材料与方法  21-23
    2.2.1 供试菌株与培养条件  21-22
    2.2.2 菌体外膜蛋白的提取  22
    2.2.3 供试斑点叉尾鮰和饲养条件  22
    2.2.4 免疫与采血  22-23
    2.2.5 凝集抗体效价的测定  23
    2.2.6 人工致病  23
    2.2.7 抗血清被动免疫  23
  2.3 结果  23-25
    2.3.1 凝集抗体效价  23-24
    2.3.2 血清的被动保护效果  24-25
  2.4 讨论  25-27
第三章 几种组织浆疫苗对斑点叉尾鮰免疫预防效果的比较  27-32
  3.1 前言  27
  3.2 材料与方法  27-30
    3.2.1 病鱼组织来源  27-28
    3.2.2 组织浆疫苗的制备  28
    3.2.3 供试鱼及其饲养条件  28
    3.2.4 免疫与采血  28-29
    3.2.5 溶菌酶活性的测定  29
    3.2.6 吞噬活性的测定  29
    3.2.7 攻毒  29-30
  3.3 结果  30-31
    3.3.1 溶菌酶和白细胞吞噬活性的变化  30-31
    3.3.2 攻毒后的存活率  31
  3.4 讨论  31-32
第四章 柱状黄杆菌3种灭活菌苗对斑点叉尾鮰免疫接种的野外应用效果  32-40
  4.1 前言  32
  4.2 材料与方法  32-35
    4.2.1 供试菌株及其培养  32
    4.2.2 菌苗的制备  32-33
    4.2.3 供试鱼及其饲养条件  33
    4.2.4 免疫与采血  33
    4.2.5 头肾吞噬细胞液的制备  33-34
    4.2.6 凝集抗体效价的测定  34
    4.2.7 吞噬活性的测定  34
    4.2.8 杀菌活性的测定  34-35
    4.2.9 攻毒  35
  4.3 结果  35-38
    4.3.1 凝集抗体效价  35-36
    4.3.2 液和头肾中吞噬细胞的吞噬活性  36-37
    4.3.3 血液和头肾中吞噬细胞的杀菌活性  37
    4.3.4 相对免疫保护力  37-38
  4.4 讨论  38-40
参考文献  40-43
致谢  43

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中图分类: > 农业科学 > 水产、渔业 > 水产保护学 > 各种鱼的病害、敌害及其防治
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