学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

口腔上皮细胞感染白色念珠菌后HBD-2 mRNA及蛋白表达的体外实验研究

作　者: 樊瑞斌
导　师: 张虹
学　校: 大连医科大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 口腔上皮细胞白色念珠菌 HBD-2
分类号: R780.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 29次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

背景:人β-防御素(Human beta defensins,HBDs)是一类富含半胱氨酸残基的、具有广谱抗菌包括抗念珠菌活性的小分子阳离子多肽,在机体先天免疫方面具有很重要的作用。目前研究最多的集中在HBD-1-3,在牙龈上皮、唾液腺、唾液以及龈沟液中都能检测到这三种防御素的表达。HBD-1和2主要对抗革兰氏阴性菌和酵母菌,而HBD-3在很低浓度下就可以抗革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌。HBDs抗真菌的活性已经被确定,但其确切的作用机制还不十分清楚。有文献报道在口腔念珠菌病患者的唾液中HBD-1和2的水平低于健康个体,而在念珠菌病颊粘膜上皮中,HBD-2蛋白的表达水平却比健康颊粘膜中的高,这些报道提示HBD-2可能在宿主口腔环境与念珠菌之间发挥着重要作用。目的:观察白色念珠菌与口腔上皮细胞的黏附,分析白色念珠菌的致病特点;检测人β防御素2(HBD-2)在口腔上皮细胞中的表达以及白色念珠菌对其表达的影响,探讨HBD-2在口腔上皮细胞早期抵御白色念珠菌感染、抑制白色念珠菌定植等方面的固有免疫作用及可能的分子机制,为口腔念珠菌病的防治提供新的策略。方法:以白色念珠菌与口腔鳞癌细胞株(KB)共同培养3、6、12、24h后,观察白色念珠菌的黏附总数、活力、及菌丝转换情况;分别以孢子相、菌丝相以及灭活的白色念珠菌与KB细胞共同培养6、12、24h后,采用酶联免疫反应(ELISA)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测各组KB细胞HBD-2mRNA及蛋白的表达情况,与对照组进行比较。结果:1.白色念珠菌作用于KB细胞3h后即可出现细胞黏附,24h内,随着时间,被黏附的KB细胞数呈增多趋势。2.黏附KB细胞的白色念珠菌活力均未丧失,但是,随着时间,黏附的白色念珠菌总数在减少,由感染3h后的1.5×105/ cm2减少到24h后的7×103/ cm2。3.白色念珠菌黏附KB细胞后,其形态发生了转换, 24h内,菌丝转换率逐渐增高,从感染3h后的23%提高到24h后的83%。4. KB细胞有HBD-2蛋白的基础表达,孢子相、菌丝相以及灭活的白色念珠菌均能诱导其表达上调,但在感染6h内,各组之间表达无差异(P>0.05);感染12h后,孢子组(93.974±6.426)、菌丝组(72.287±2.839)的表达均高于对照组(37.380±5.663)(P<0.05),差异有统计学意义;感染24h后,孢子组、菌丝组、灭活组的表达均高于对照组(P<0.05),但和12h的表达水平相比,孢子组(80.851±7.860)、菌丝组(63.932±8.070)出现了下降趋势,其中菌丝组的表达下降更明显。5. KB细胞感染孢子相白色念珠菌24h后HBD-2 mRNA的表达增高,与对照组相比,P<0.001,差异有显著统计学意义。而感染菌丝相白色念珠菌24h后HBD-2 mRNA的表达受到了抑制,与对照组相比,P<0.05,差异有统计学意义。结论:1.口腔上皮具有早期识别白色念珠菌入侵、抑制其黏附和生长的能力。2. HBD-2在口腔上皮细胞中有基础表达,菌丝相、孢子相、灭活的白色念珠菌均能诱导其表达上调。3.白色念珠菌对口腔上皮细胞HBD-2的诱导表达只发生在感染的特定时期内,当菌丝进一步侵袭后,HBD-2的表达会逐渐减弱。

全文目录

一、摘要  6-10
  （一）中文摘要  6-8
  （二）英文摘要  8-10
二、正文  10-29
  （一）前言  10-11
  （二）材料与方法  11-18
  （三）结果  18-20
  （四）讨论  20-25
  （五）结论  25-26
  （六）参考文献  26-29
三、综述  29-42
  （一）正文  29-38
  （二）参考文献  38-42
四、附录  42-44
五、致谢  44

口腔上皮细胞感染白色念珠菌后HBD-2 mRNA及蛋白表达的体外实验研究

内容摘要

全文目录

相似论文