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目的:观察I组代谢型谷氨酸受体兴奋剂3,5-二羟基苯氨酸(DHPG)对大鼠海马CA1区穿通通路(perforant pathway PP通路)产生长时程抑制的作用。方法:实验用20-30天的Wistar大鼠,麻醉后断头法分离其大脑组织,在4oC冰冷溶液中冷却5分钟。滤纸吸干水分后将脑组织固定在切片托上,在同样的冰冷溶液中用振动切片机切出400μm厚的脑片,分离出海马组织,切除齿状回,同时切断CA1和CA3之间的联系,以防止非记录电活动的干扰和癫痫样放电。迅速将脑片转入25oC的人工脑脊液中孵育。实验分为DHPG作用组、DHPG和D-AP5作用组、双脉冲刺激(PPR)组,每组脑片数量分别为8,9,8片。在脑片孵育1-8小时后将单个脑片转入记录槽,它将持续浸泡在流速为1.5-2ml/min的脑脊液中,温度是室温25 oC,木防己苦毒素将加入脑脊液中,它可阻止其他受体的放电。用盖网固定法固定脑片,采用电生理的方法记录三组脑片在加药前后的刺激脑片所产生电活动的变化情况。结果:DHPG作用组基线稳定均值为1.0049±0.101,给予DHPG(100-200 mol·L-6,10分钟),药物洗掉20-25分钟场电位下降为0.7904±0.02197(n=8,t=15,p<0.01);DHPG和D-AP5给予N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)特异性拮抗剂AP5后,基线水平为1.0224±0.0724,用药DHPG(100-200 mol·L-6,10分钟),药物洗掉20-25分钟降为0.828±0.01475 (n=9, t=15,p<0.01);双脉冲刺激(PPR)组加药前记录的PPR其比值为0.9525±0.1691,加入DHPG(100-200 mol·L-6,10分钟),40min后再次测PPR比值为1.0511±0.2934,前后相比有显著差异。结论:该实验条件诱发的长时程抑制(LTD)是非NMDA受体依赖型,而是I组代谢型谷氨酸受体(mGluRs)依赖型的;由双脉冲刺激记录显示LTD的诱发机制是突触后的原因所致。
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