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三氧化二砷对人肺腺癌A-549细胞株增殖及c-Myc基因表达的影响

作　者: 贺小龙
导　师: 马柏林
学　校: 延安大学
专　业: 呼吸内科学
关键词: 三氧化二砷（As2O3）人肺腺癌 A-549细胞株细胞周期凋亡 c-Myc基因
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:观察三氧化二砷（As₂O₃）对人肺腺癌 A-549细胞株的生长、增殖、细胞周期、凋亡等方面的影响,并初步探讨其机制。方法:选用人肺癌A-549细胞株进行细胞培养,取对数生长期细胞,设阴性对照组,经不同浓度As₂O₃作用一定时间后,以台盼蓝染色,光镜下计数,描写细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间;以MTT比色法检测细胞生长增殖的抑制率;用流式细胞术（FCM）测定细胞周期（CC）、凋亡率;用倒置相差显微镜动态观察A-549细胞的形态学变化;以免疫组织化学（SABC）法分析不同浓度As₂O₃对c-Myc基因表达的影响。结果:As₂O₃对体外生长人肺腺癌A-549细胞株的生长和增殖有较明显抑制作用,此作用有时间和剂量依赖性（时-效和量-效关系）;As₂O₃对A-549细胞周期有调控作用:0.5μmol/LAs₂O₃作用72小时后的A-549细胞出现了S期阻滞,但p>0.05,同对照组比较无统计学意义;1.0、2.0、4.0μmol/L As₂O₃组中,目标细胞表现为G₂/M期阻滞,即G₂/M期比例增高,同对照组比较有统计学意义（p<0.05）,但组间比较无显著差异; 8.0μmol/LAs₂O₃组,结果呈现S期阻滞,p<0.05。As₂O₃对A-549细胞生长增殖的抑制作用,不同浓度组表现为诱导凋亡或诱导坏死,0.5μmol/L组未见明显凋亡及坏死,与对照组比较无明显差异;1.0、2.0、4.0μmol/L As₂O₃作用A-549细胞后能诱导细胞凋亡,在此浓度范围内凋亡率随浓度增加而增加;8.0μmol/L主要诱导细胞坏死。不同剂量组的As₂O₃均对A-549细胞c-Myc基因表达具有下调作用,0.5～4.0μmol/L各浓度组间有量-效关系,p<0.01,4.0μmol/L下降最为明显,8.0μmol/L与4.0μmol/L组比较未见明显差异（p>0.05）。结论:三氧化二砷对人肺腺癌细胞株A-549的生长、增殖有明显抑制作用,并能调控细胞周期,在1.0～4.0μmol/L浓度范围内其抑制作用的机制主要是促凋亡,初步推测诱导凋亡是抑制了c-Myc基因的表达,预示了As₂O₃是一种比较有价值的抗肺癌作用药物。我们认为0.5～4.0μmol/L的浓度是As₂O₃体内实验安全有效的范围,全面开展安全范围内的毒副作用观察,改变剂型及给药方式,并与其它经典化疗药物联合应用是今后研究的重点和方向。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-10
前言  10-14
第一部分三氧化二砷对人肺腺癌A-549 细胞株生长增殖和细胞周期的影响  14-24
  一、实验材料和方法  14-16
  二、结果  16-21
  三、结论  21
  四、讨论  21-24
第二部分三氧化二砷诱导A-549 细胞凋亡的检测  24-30
  一、材料和方法  24-25
  二、结果  25-27
  三、结论  27
  四、讨论  27-30
第三部分 As_20_3 对A-549 细胞c-Myc 基因表达的影响  30-36
  一、材料和方法  30-31
  二、结果  31-34
  三、结论  34
  四、讨论  34-36
总结  36
今后研究的重点和方向  36-38
参考文献  38-42
附录  42-49
  参考文献  46-49
致谢  49

三氧化二砷对人肺腺癌A-549细胞株增殖及c-Myc基因表达的影响

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